與其它蘑菇不同,銀耳各級菌種的生產是雙菌培養,即不管製作母種、原種或種植種,在每支試管、每個菌種瓶、每個種植袋(甚至每個接種穴)中都必須讓銀耳菌絲(雙核菌絲,又稱白毛團或芽孢狀菌種)和伴生菌香灰菌絲在培養基(料)中按比例、協調地生長,才能培養出有實用價值的,可以用於實際種植的有效菌種。
為了保證銀耳生產上用的菌種之質量,科研人員首先把銀耳雙核菌絲"白毛團"、酵母狀分生孢子"芽孢"、香灰菌絲(又稱羽毛狀菌絲、耳友菌絲)分別單獨分開培養,分開保藏。隻有到了製種季節才把兩種純菌種搭配起來,進行混合培養,製成生產上用的各級母種、原yuan種zhong或huo種zhong植zhi種zhong供gong各ge地di菌jun種zhong場chang或huo種zhong植zhi者zhe使shi用yong。由you此ci可ke以yi知zhi道dao,研yan究jiu單dan位wei保bao藏zang的de銀yin耳er菌jun種zhong和he生sheng產chan單dan位wei使shi用yong的de菌jun種zhong是shi不bu同tong的de。研yan究jiu所suo用yong的de銀yin耳er菌jun種zhong,可ke以yi說shuo是shi一yi種zhong始shi祖zu菌jun種zhong,是shi社she會hui上shang一yi切qie生sheng產chan種zhong的de老lao祖zu宗zong,育yu種zhong學xue家jia們men稱cheng之zhi"原原種",是單一菌種的純培養物。這些純菌種供育種、研究專用,一般不對外供應。而社會生產用的銀耳母種、原種和種植種則是雙菌培養物,即把銀耳菌絲或芽孢與香灰菌絲(子囊菌)tongshijiezhongzaipeiyangjizhongjinxinghunhepeiyang。zheyangdejunzhongyibanzhishiyongyici。fouzezaizhuanguanshirongyirenweidibashuangjunfenkai,shipeiyangwuzhongyinerjunsizhujianjianshao,juedabufenshengxiaxianghuijunsierzhishiyinerzhongzhishibai。xiamianjieshaoyinerjunzhongdefenli、製備及保藏技術:
㈠ 分離技術 獲得銀耳菌種的方法主要有擔孢子彈射分離法、組織分離法和耳木分離法。
1.孢子彈射法 這是利用新鮮的、成熟的子實體自動彈射出擔孢子來獲得純菌種的方法。取朵大、色白、無病蟲害的新鮮銀耳作為種耳。
用無菌水漂洗銀耳數次,再用無菌紗布或吸水紙,把銀耳表麵
的de水shui分fen吸xi幹gan。因yin為wei耳er片pian表biao麵mian若ruo有you薄bo水shui層ceng,便bian會hui影ying響xiang銀yin耳er擔dan孢bao子zi的de彈dan射she,並bing容rong易yi汙wu染ran上shang雜za菌jun。再zai把ba種zhong耳er切qie一yi小xiao塊kuai,以yi放fang入ru三san角jiao瓶ping或huo放fang入ru試shi管guan中zhong不bu會hui碰peng到dao瓶ping壁bi或huo管guan壁bi為wei度du,隨sui後hou用yong不bu鏽xiu鋼gang小xiao鉤gou鉤gou住zhu小xiao耳er片pian,迅xun速su懸xuan掛gua在zai三san角jiao瓶ping或huo試shi管guan內nei,同tong時shi注zhu意yi勿wu使shi種zhong耳er碰peng到dao培pei養yang基ji表biao麵mian,以yi防fang汙wu染ran雜za菌jun,塞sai上shang棉mian塞sai,然ran後hou放fang在zai20-25℃條件下,經24小(xiao)時(shi),從(cong)耳(er)片(pian)上(shang)彈(dan)射(she)出(chu)來(lai)的(de)擔(dan)孢(bao)子(zi),落(luo)在(zai)光(guang)滑(hua)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)表(biao)麵(mian)上(shang)形(xing)成(cheng)一(yi)個(ge)霧(wu)狀(zhuang)的(de)孢(bao)子(zi)印(yin)。此(ci)時(shi),在(zai)無(wu)菌(jun)箱(xiang)或(huo)無(wu)菌(jun)室(shi)中(zhong),將(jiang)懸(xuan)於(yu)瓶(ping)內(nei)的(de)耳(er)片(pian)取(qu)出(chu),再(zai)塞(sai)上(shang)棉(mian)塞(sai),移(yi)到(dao)20-25℃的室中培養,經2-3天,培養基表麵就會出現許多乳白色、糊hu狀zhuang的de小xiao菌jun落luo。此ci係xi銀yin耳er的de酵jiao母mu狀zhuang分fen生sheng孢bao子zi。當dang培pei養yang基ji上shang出chu現xian酵jiao母mu狀zhuang分fen生sheng孢bao子zi的de菌jun落luo時shi,為wei了le防fang止zhi和he減jian少shao汙wu染ran,應ying盡jin快kuai地di進jin行xing提ti純chun,即ji挑tiao取qu少shao許xu沒mei有you雜za菌jun的de銀yin耳er酵jiao母mu狀zhuang分fen生sheng孢bao子zi,移yi入ru新xin的de試shi管guan中zhong進jin行xing培pei養yang。不bu管guan銀yin耳er擔dan孢bao子zi或huo酵jiao母mu狀zhuang分fen生sheng孢bao子zi都dou不bu容rong易yi萌meng發fa成cheng菌jun絲si,所suo以yi直zhi接jie用yong於yu生sheng產chan時shi有you困kun難nan,目mu前qian已yi較jiao少shao采cai用yong。不bu過guo,為wei了le獲huo得de銀yin耳er有you性xing繁fan殖zhi的de後hou代dai,必bi須xu采cai用yong擔dan孢bao子zi分fen離li法fa,並bing使shi之zhi萌meng發fa成cheng單dan核he菌jun絲si,然ran後hou進jin行xing配pei對dui實shi驗yan。
2.組織分離法 和香菇、平菇不同,銀耳組織分離法比較難操作,實用意義也不大。因為耳片一旦膠質化之後,就不容易再長出菌
絲,況且段木種植的或野生的銀耳,暴露在外界的
生sheng長chang時shi間jian很hen長chang,耳er片pian上shang必bi定ding會hui附fu著zhe各ge種zhong雜za菌jun,組zu織zhi分fen離li時shi既ji不bu容rong易yi把ba附fu著zhe的de雜za菌jun洗xi掉diao,又you不bu容rong易yi用yong藥yao品pin進jin行xing表biao麵mian的de滅mie菌jun處chu理li,且qie容rong易yi導dao致zhi銀yin耳er和he條tiao菌jun同tong歸gui於yu盡jin。隻zhi有you位wei於yu樹shu皮pi和he木mu質zhi部bu之zhi間jian的de肥fei厚hou的de耳er基ji比bi較jiao容rong易yi進jin行xing組zu織zhi分fen離li,可ke以yi獲huo得de銀yin耳er的de純chun菌jun絲si。不bu過guo用yong耳er基ji分fen離li來lai的de銀yin耳er純chun菌jun絲si常chang是shi鵝e黃huang色se的de或huo橙cheng黃huang色se的de,不bu是shi純chun白bai的de,菌jun絲si生sheng長chang的de速su度du也ye比bi較jiao慢man,效xiao果guo也ye不bu太tai理li想xiang。
3.耳木分離法 利用長了銀耳子實體的段木(簡稱耳木)來進行分離,是目前獲得有實用價值的銀耳菌種最主要的方法。
ermufenlifadezhuyaojishushipaichuermuzhongzajundeganrao,fangzhifenlishiwuranzajun,bixubayinerjunsihexianghuijunsidandufenlichulai。duichuxuezhelaishuo,ermufenlifashiburongyizhangwode,bixufanfulianxi,zhidaozhangwofenlideyaoling。ermufenlifadezhuyaobuzhouruxia:
(1)耳木選擇 在長第一、二批銀耳時,取長耳最多,質量最好(尤其是片寬、色白),雜菌最少的耳木一小段,作為分離材料。分離材料經風幹,並用熏蒸劑驅蟲(特別是蟎)後,移入無菌箱或無菌室中進行分離。
(2)耳木滅菌 先把耳木鋸成2-4cm厚的木輪,然後去掉樹皮、耳基,放入接種箱(室)中,耳木表麵用0.1%升汞水或70%酒精揩擦滅菌。技術熟練者也可以不經表麵滅菌,就進行分離。
(3)耳木取種 通過耳基著生處把耳木縱切成兩瓣。然後,在耳基著生處的正下方木材內部剃取極小的木屑粉末(不能用小木片,接種塊越小,得到銀耳純菌種的機會越大,接種塊越大得到香灰菌絲,或香灰菌絲夾雜一點銀耳菌絲的機會越多),接種在試管中的培養基表麵。接種後,把試管放在20-28℃的室溫下培養,數天之後接種塊的周圍就開始長出菌絲來。
(4)分離結果 由於分離的技巧不同,分離的結果也不一樣。大致可以得到如下幾種結果:
隻得到銀耳菌絲;隻得到香灰菌絲;同時得到銀耳菌絲和香灰菌絲,但香灰菌絲占絕對多數;得到銀耳酵母狀分生孢子和香灰菌絲。如果有雜菌幹擾,分離的結果就更複雜了。
為了獲得有生產價值的銀耳菌種,在分離後的第3-7天內要天天觀察,把銀耳菌絲和香灰菌絲單獨分離出來。
銀耳菌絲的特征: 白色、淡黃白色以及由白色至黃色之間的各種中間色,氣生菌絲直立、斜立或平貼於培養基表麵,基內菌絲生於培養基裏麵。菌絲直徑l.5-3微米,有橫隔膜,有明顯的(但不是每個橫隔膜上都有)鎖suo狀zhuang聯lian合he,生sheng長chang速su度du比bi一yi般ban蘑mo菇gu緩huan慢man。在zai某mou些xie情qing況kuang下xia,在zai培pei養yang基ji表biao麵mian會hui出chu現xian纏chan結jie的de菌jun絲si團tuan,並bing逐zhu漸jian膠jiao質zhi化hua,變bian成cheng小xiao原yuan基ji,長chang出chu小xiao耳er片pian。當dang雙shuang核he菌jun絲si開kai始shi膠jiao質zhi化hua時shi,在zai菌jun絲si頂ding端duan可ke以yi發fa現xian有you若ruo幹gan擔dan子zi樣yang的de膨peng大da細xi胞bao,這zhe意yi味wei著zhe雙shuang核he菌jun絲si已yi進jin入ru結jie實shi階jie段duan。雙shuang核he菌jun絲si繼ji代dai(移植)後或繼續長出新的菌絲,或迅速膠質化,長出耳片,也可以變成粘糊糊的酵母狀分生孢子(取決於菌株的菌齡、發育程度、培養基表麵的水層,接種針熱或冷,接種時手勢輕或重等刺激).由雙核菌絲斷裂成的"酵母狀分生孢子"在適宜條件下變成銀耳菌絲。
香灰菌絲的特征: 菌絲初無色,大量生長時白色,羽毛狀, 常有特別細長的主幹和側生的略呈"羽毛狀"defenzhi,laojunsibiandanhuangse,danzongse,peiyangjizhujianyoudanhesebianweiheisehuoheidailvse。peiyangjibiaomiandeqishengjunsihuibaise,xirongzhuang,youshiyoutanzideheiba,fenshengbaozigengjinsaozhouzhuang,fenshengbaozishaojian。ruoyongmuxiepeiyangji,popinghoukefashenghuanglvsezhicaolvsedejintuoyuanxingdefenshengbaozi。zaiduanmubiaomiankeyichanshengbianpingheisedezizuo。yizhixianghuijunkenengbushidanyigewuzhong,kenenglishuyutantuanshuhetandoushu。you3-4種,其中有一種經鑒定初步認為是阿切爾碳團(Hypoxylon archeri).
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