操作要點：①取新鮮毛蚶肉
，蒸煮後絞碎
，與其澄清後的煮汁一並使用
，用硫酸調節至pH 2.5，煮沸0.5小時左右，濾去沉澱物。②向濾液中加1％的活性炭，攪拌2小時，濾去清液，濾液再用活性炭吸附1次，合並兩次經過吸附的活性炭
，加入2倍量的酸水攪拌15分鍾，除去沾在活性炭上的雜質。濾去液體，用碳酸鈉調節至pH 9.5，再加入1％的亞硝酸鈉
，加熱攪拌2小時過濾。③洗脫液中加入1％亞硝酸鈉和20％正丁醇不斷攪拌，同時加熱至60～70℃保持2小時
，如溶液有大量蛋白質析出

，將析出蛋白質濾去，再加入硫酸銨至飽和，攪拌並加熱至65～75℃保持1小時。④靜置
，待液體分層後，分出正丁醇溶液，再用鹽酸調節至pH 2.5
，然後用0.1摩／升鹽酸提取7～8次，將抽提液用碳酸鈉調節pH為4.5～5.0。⑤將上述溶液用碳酸鈉調節pH 8.5，在通風櫥中緩慢加入0.7％氰化物，攪拌均勻後，置於暗處約5小時，氰化即可完成。⑥向氰化液中加入食鹽，使溶液呈飽和狀態，用酚-丁ding醇chun混hun合he液ye抽chou提ti數shu次ci。二er氰qing絡luo合he物wu即ji溶rong解jie於yu有you機ji溶rong劑ji層ceng。抽chou提ti液ye中zhong加jia入ru等deng量liang三san氯lv甲jia烷wan
，充chong分fen攪jiao拌ban，並bing用yong蒸zheng餾liu水shui抽chou提ti。再zai在zai水shui抽chou提ti液ye中zhong加jia入ru四si氯lv化hua碳tan和he蒸zheng餾liu水shui抽chou提ti。最zui後hou水shui抽chou提ti液ye用yong乙yi醚mi洗xi滌di
，即ji得de到dao較jiao純chun的de玫mei瑰gui紅hong溶rong液ye。⑦將兩倍體積的丙酮加入活化後的氧化鋁攪拌，靜置。待氧化鋁沉降傾出上層丙酮
，另加入1倍體積丙酮
，倒入層析柱中。向濃維生素B12溶液中加入3倍體積的純丙酮混合均勻後，灌人層析柱。待全部溶液通過後，再以80％bingtongrongyexidixifuzhu。zaichongxiguochengzhong
，cengxizhushangjifenlichubutongyansehuan，zuishangyihuanweihuanghese


，dierhuanweichenghongse，zuixiayihuanweitaohongse，jiweiweishengsuB12。隨著時間的延長，各環的分離也愈完全。在桃紅色環降至層析柱2／3處時，改用50％丙酮水溶液洗脫，收集桃紅色洗脫液，在水溶鍋中加熱濃縮至原體積的1／8。⑧在濃縮液中加入10倍量純丙酮混合均勻，把溶液置於5℃冷庫中放置2天，維生素B12 即(ji)逐(zhu)漸(jian)結(jie)晶(jing)成(cheng)玫(mei)瑰(gui)紅(hong)色(se)的(de)針(zhen)狀(zhuang)或(huo)棱(leng)柱(zhu)狀(zhuang)的(de)晶(jing)體(ti)

，待(dai)母(mu)液(ye)的(de)紅(hong)色(se)極(ji)淡(dan)時(shi)

，倒(dao)出(chu)母(mu)液(ye)
，用(yong)丙(bing)酮(tong)洗(xi)滌(di)結(jie)晶(jing)數(shu)次(ci)，再(zai)用(yong)乙(yi)醚(mi)洗(xi)滌(di)
，在(zai)真(zhen)空(kong)幹(gan)燥(zao)箱(xiang)中(zhong)避(bi)光(guang)幹(gan)燥(zao)。