（一）常用消毒劑

    現將常用的消毒藥品及其配製、使用方法
，介紹如下：

    1．35％甲醛水溶液（HCHO）：又名福爾馬林
，使蛋白質變性。用於培養室、無菌室的滅菌。

    2．0.1％的升汞水（HgCL3）：能使蛋白質變性，抑製酶類。0.1％升汞配製方法是稱取升汞0.1克，用少許酒精溶解，再加水至100毫升即成。用於無菌箱、培養箱、培養皿四周表麵以及手指的滅菌。

    3．石炭酸（C6H5OH），5％濃度噴霧後，能使蛋白變性沉澱。石炭酸（苯酚）50毫升

，加水950毫升配成。用於 工作服、實驗桌的滅菌。殺菌效果同升汞。

    4．高錳酸鉀（KMnO4）：氧化劑。0.1％濃度能使蛋白質與氨基酸氧化，失去酶的活性，用於消毒
，能抑製或殺死 雜菌。

    5．乙醇（CH3CH3OH）：又稱酒精。消毒以75％濃度的效果最好。它能使蛋白質脫水變性。高濃度酒精會使蛋白質很快脫水凝固，消毒作用反而減弱。

    6．新潔爾滅：0.25％新潔爾滅用於無菌箱、無菌室的滅菌。一般新潔爾滅5％原液50毫升；加水950毫升配成。     7．漂白粉水：取漂白粉10克
，加水140毫升配成。通常在使用前臨時配製，靜置1～2小時，取上清液噴射，進 行室內消毒，每平方米用1升。

    8．藥皂：煤酚皂、硼酸皂等各種藥皂的水溶液，均可用於器具
、橡皮塞及手指的消毒。

    9．2％硫酸銅溶液：用硫酸銅（膽礬）2克，加水至 100毫升加熱溶解配成。用於床架、木架等各種菌種架的消 毒。還可用5％硫酸銅溶液。

    10．0.5％波爾多液：先用硫酸銅1斤，溶於100斤水， 再用石灰1斤，加水100斤。然後等量混合起來即成。用於菌種架、段木的消毒。

    11.多菌靈：用於殺滅真菌、半知茵。1：800倍拌料或 1：500倍噴灑均可。

    （二）無菌箱及無菌室的消毒滅菌

    無菌箱的消毒滅菌
，可采取以下幾種方法：

    l．用甲醛和高錳酸鉀混合熏蒸：一般每平方米需40％甲醛10毫升、高錳酸鉀8毫升
，進行熏蒸。使用時，先密閉門窗，量甲醛溶液盛入容器中、然後倒入量好的高錳酸鉀
，人員隨之離開接種室
，關緊房門，熏蒸20―30分鍾即可。

    2．0.1％升汞水消毒：用0.1％升(sheng)汞(gong)水(shui)浸(jin)過(guo)的(de)紗(sha)布(bu)或(huo)海(hai)綿(mian)進(jin)行(xing)指(zhi)擦(ca)
，或(huo)用(yong)噴(pen)霧(wu)器(qi)噴(pen)霧(wu)滅(mie)菌(jun)，使(shi)箱(xiang)內(nei)的(de)上(shang)下(xia)左(zuo)右(you)都(dou)沾(zhan)上(shang)升(sheng)汞(gong)水(shui)，手(shou)也(ye)可(ke)用(yong)升(sheng)汞(gong)水(shui)消(xiao)毒(du)，並(bing)把(ba)袖(xiu)子(zi)卷(juan)起(qi)來(lai)。噴(pen)霧(wu)後(hou) 20～30分鍾
，箱內的雜菌和霧滴一起落到箱底被殺死，內部的空氣就變得很清潔。

    3．紫外線照射滅菌：在無菌箱中裝一支200伏、3O瓦的紫外線燈管；每次開20～30分鍾，就能達到空間殺菌的 目的。照射結束後，罩黑布半小時，以增強殺菌效果。

    4．石炭酸噴霧：在每次接種之前，用5％石炭酸溶液噴霧，可促使空氣中的微粒和雜菌沉降，防止桌麵微塵飛揚，並有殺菌作用。

    5．石灰揩擦：經jing常chang用yong藥yao物wu熏xun蒸zheng，易yi造zao成cheng酸suan性xing環huan境jing，特te別bie用yong甲jia醛quan和he高gao錳meng酸suan鉀jia熏xun蒸zheng長chang久jiu，汙wu染ran往wang往wang越yue來lai越yue嚴yan重zhong
，預yu防fang辦ban法fa可ke把ba各ge種zhong藥yao品pin交jiao替ti使shi用yong
，過guo一yi段duan時shi間jian（約五周）用石灰擦洗一遍。實踐證明
，這樣做效果很好。

    無菌室消毒同無菌箱。

    （三）無菌室的使用規程

    無菌室無固定程序，但按一般操作應遵循如下規程：

    1．接種室內和緩衝室內使用前，用5％石炭酸溶液噴霧。把所需要的器材搬入緩衝室清洗，等曬幹後搬入接種 室，打開紫外線燈，照射殺菌。

    2．穿上工作服及無菌工作帽、鞋，然後用煤皂液洗手2 分鍾。進人接種室後
，查驗器械是否放在一定位置。然後用 5％石(shi)炭(tan)酸(suan)溶(rong)液(ye)重(zhong)點(dian)在(zai)工(gong)作(zuo)台(tai)的(de)上(shang)方(fang)和(he)附(fu)近(jin)的(de)地(di)麵(mian)上(shang)噴(pen)霧(wu)。然(ran)後(hou)退(tui)回(hui)緩(huan)衝(chong)室(shi)。還(hai)可(ke)給(gei)接(jie)種(zhong)室(shi)門(men)口(kou)地(di)麵(mian)灑(sa)一(yi)層(ceng)石(shi)灰(hui)，進(jin)門(men)時(shi)踩(cai)石(shi)灰(hui)可(ke)使(shi)鞋(xie)底(di)保(bao)持(chi)無(wu)雜(za)菌(jun)狀(zhuang)態(tai)。

    3．接種操作前，用70％的酒精棉球擦手。進行無菌操作時，要嚴格認真，動作輕捷
，盡量減少空氣流動。

    4．工作結束後，立即將台麵收拾幹淨，不留殘物。然後用5％石炭酸全麵噴灑。

    5．操作時，注意安全。如棉塞著火，用手緊握即可熄滅。如打破菌瓶
，可用抹布沾5％石炭酸，收拾到廢物桶 內。每次的汙染物應小心放在盤內，蓋嚴拿出室外深埋或燒掉。

    （四）無菌室空氣汙染情況的檢驗

    定期檢驗無菌室空氣汙染情況，對改進滅菌措施，提高成品率是非常必要的。常用方法步驟如下：

    1．平板檢驗法：用常規培養基，倒成平板，收入接種室。在事先熏蒸好的接種室
，使用前半小時或1小時把供試的培養皿或試管打開
，按預定時間蓋好培養皿或試管。留對照皿不打開。然後一起放入30℃的溫箱中培養48小時
，檢查有無菌殖生長
，並由菌落形態，判斷雜菌種類。一般要求平板培養基開蓋5分鍾
，菌落不超過3個；敘麵培養基開塞 30分鍾者
，以不出現菌落為合格。

    2．斜麵檢驗法：將常用的瓊脂斜麵培養基各取二管， 放(fang)入(ru)接(jie)種(zhong)室(shi)
，按(an)無(wu)菌(jun)操(cao)作(zuo)各(ge)將(jiang)其(qi)中(zhong)的(de)一(yi)管(guan)的(de)棉(mian)塞(sai)取(qu)出(chu)，放(fang)在(zai)滅(mie)菌(jun)的(de)培(pei)養(yang)皿(min)內(nei)。經(jing)過(guo)一(yi)定(ding)時(shi)間(jian)後(hou)
，再(zai)將(jiang)棉(mian)塞(sai)通(tong)過(guo)火(huo)焰(yan)，塞(sai)回(hui)試(shi)管(guan)，連(lian)同(tong)對(dui)照(zhao)一(yi)起(qi)培(pei)養(yang)。經(jing)48小時後，檢驗有無雜菌生長。和上邊方法同。

    3．空氣汙染情況檢驗：在接種過程中，人員的出過、器材的搬放
、接種操作的動作等原因造成空氣汙染，檢驗方法是在準備工作結束後
，接種操作開始時，按上述方法打開培養皿蓋子或試管塞
，經5分鍾、30分鍾或直到工作結束時再蓋好，以檢驗在不同的使用時間內，空氣汙染的程度。

    如黴菌較多時
；可先用5％石炭酸全麵噴射後

，再用甲醛熏蒸。如細菌較多時，可采取用乳酸和甲醛交替熏蒸的辦法加以殺滅。