營養物質濃度及配比合適

peiyangjizhongyingyangwuzhinongduheshishiweishengwucainengshengchanglianghao，yingyangwuzhinongduguodishibunengmanzuweishengwuzhengchangshengchangsuoxu
，nongduguogaoshizekenengduiweishengwushengchangqiyizhizuoyong
，lirugaonongdutangleiwuzhi
、無機鹽、重金屬離子等不僅不能維持和促進微生物的生長，反而起到抑菌或殺菌作用。

另外，培養基中各營養物質之間的濃度配比也直接影響微生物的生長繁殖和(或)代謝產物的形成和積累，其中碳氮比(C/N)的(de)影(ying)響(xiang)較(jiao)大(da)。嚴(yan)格(ge)地(di)講(jiang)，碳(tan)氮(dan)比(bi)指(zhi)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)碳(tan)元(yuan)素(su)與(yu)氮(dan)元(yuan)素(su)的(de)物(wu)質(zhi)的(de)量(liang)比(bi)值(zhi)，有(you)時(shi)也(ye)指(zhi)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)還(hai)原(yuan)糖(tang)與(yu)粗(cu)蛋(dan)白(bai)之(zhi)比(bi)。例(li)如(ru)
，在(zai)利(li)用(yong)微(wei)生(sheng)物(wu)發(fa)酵(jiao)生(sheng)產(chan)穀(gu)氨(an)酸(suan)的(de)過(guo)程(cheng)中(zhong)，培(pei)養(yang)基(ji)碳(tan)氮(dan)比(bi)為(wei)4/l時，菌體大量繁殖
，穀氨酸積累少
；當培養基碳氮比為3/l時，菌體繁殖受到抑製，穀氨酸產量則大量增加。再如，在抗生素發酵生產過程中
，可以通過控製培養基中速效氮(或碳)源與遲效氮(或碳)源之間的比例來控製菌體生長與抗生素的合成協調。

控製pH條件

培養基的pH必須控製在一定的範圍內，以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產生代謝產物。各類微生物生長繁殖或產生代謝產物的最適pH條件各不相同，一般來講，細菌與放線菌適於在pH7～7.5範圍內生長，酵母菌和黴菌通常在pH4.5～6範圍內生長。值得注意的是，在微生物生長繁殖和代謝過程中
，由於營養物質被分解利用和代謝產物的形成與積累
，會導致培養基pH發生變化

，若不對培養基pH條件進行控製，往往導致微生物生長速度下降或(和)代謝產物產量下降。因此
，為了維持培養基pH的相對恒定，通常在培養基中加入pH緩衝劑，常用的緩衝劑是一氫和二氫磷酸鹽(如KH2PO4和K2HPO4)組成的混合物。K2HPO4溶液呈堿性，KH2PO4溶液呈酸性
，兩種物質的等量混合溶液的pH為6.8。當培養基中酸性物質積累導致H+濃度增加時，H+與弱堿性鹽結合形成弱酸性化合物，培養基pH不會過度降低
；如果培養基中OH-濃度增加
，OH-則與弱酸性鹽結合形成弱堿性化合物，培養基pH也不會過度升高。

但KH2PO4和K2HPO4緩衝係統隻能在一定的pH範圍(pH6.4～7.2)內起調節作用。有些微生物，如乳酸菌能大量產酸，上述緩衝係統就難以起到緩衝作用
，此時可在培養基中添加難溶的碳酸鹽(如CaCO3)來進行調節，CaCO3難溶於水
，不會使培養基pH過度升高
，但它可以不斷中和微生物產生的酸，同時釋放出CO2
，將培養基pH控製在一定範圍內。

在培養基中還存在一些天然的緩衝係統
，如氨基酸
、肽
、蛋白質都屬於兩性電解質，也可起到緩衝劑的作用。

原料來源的選擇

zaipeizhipeiyangjishiyingjinliangliyonglianjiaqieyiyuhuodedeyuanliaozuoweipeiyangjichengfen，tebieshizaifajiaogongyezhong，peiyangjiyonglianghenda，liyongdichengbendeyuanliaogengtixianchuqijingjijiazhi。liru，zaiweishengwudanxibaodanbaidegongyeshengchanguochengzhong，changchangliyongtangmi(製糖工業中含有蔗糖的廢液)
、乳清(乳製品工業中含有乳糖的廢液)、豆製品工業廢液及黑廢液(造紙工業中含有戊糖和己糖的亞硫酸紙漿)等都可作為培養基的原料。再如
，工業上的甲烷發酵主要利用廢水
、廢渣作原料，而在我國農村

，已推廣利用人畜糞便及禾草為原料發酵生產甲烷作為燃料。另外
，大量的農副產品或製品
，如鼓皮
、米糠、玉米漿、酵母浸膏、酒糟、豆餅、花生餅、蛋白腖等都是常用的發酵工業原料。

滅菌處理

要yao獲huo得de微wei生sheng物wu純chun培pei養yang
，必bi須xu避bi免mian雜za菌jun汙wu染ran，因yin此ci對dui所suo用yong器qi材cai及ji工gong作zuo場chang所suo進jin行xing消xiao毒du與yu滅mie菌jun。對dui培pei養yang基ji而er言yan，更geng是shi要yao進jin行xing嚴yan格ge的de滅mie菌jun。對dui培pei養yang基ji一yi般ban采cai取qu高gao壓ya蒸zheng汽qi滅mie菌jun

，一yi般ban培pei養yang基ji用yong 1.05kg/cm2，121.3℃條件下維持15～30min可達到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過程中
，長時間高溫會使某些不耐熱物質遭到破壞，如使糖類物質形成氨基糖
、焦糖，因此含糖培養基常在0.56kg/ cm2，112.6℃15～30min進行滅菌，某些對糖類要求較高的培養基
，可先將糖進行過濾除菌或間歇滅菌

，再與其他已滅菌的成分混合；長時間高溫還會引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽離子(特別是鈣、鎂、鐵離子)結(jie)合(he)形(xing)成(cheng)難(nan)溶(rong)性(xing)複(fu)合(he)物(wu)而(er)產(chan)生(sheng)沉(chen)澱(dian)，因(yin)此(ci)，在(zai)配(pei)製(zhi)用(yong)於(yu)觀(guan)察(cha)和(he)定(ding)量(liang)測(ce)定(ding)微(wei)生(sheng)物(wu)生(sheng)長(chang)狀(zhuang)況(kuang)的(de)合(he)成(cheng)培(pei)養(yang)基(ji)時(shi)，常(chang)需(xu)在(zai)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)加(jia)入(ru)少(shao)量(liang)螯(ao)合(he)劑(ji)，避(bi)免(mian)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)產(chan)生(sheng)沉(chen)澱(dian)，常(chang)用(yong)的(de)螯(ao)合(he)劑(ji)為(wei)乙(yi)二(er)胺(an)四(si)乙(yi)酸(suan)(EDTA)。還可以將含鈣
、鎂、鐵等離子的成分與磷酸鹽
、碳酸鹽分別進行滅菌，然後再混合，避免形成沉澱；高壓蒸汽滅菌後，培養基pH會發生改變(一般使pH降低0.2)，可根據所培養微生物的要求
，在培養基滅菌前後加以調整。