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今日分享內容：脂肪酸和反式脂肪酸檢測常見問題解答
《GB 5009.168-2016 食品安全國家標準 食品中脂肪酸的測定》
《GB 5009.257-2016 食品安全國家標準 食品中反式脂肪酸的測定》
一、《GB 5009.168-2016 食品安全國家標準 食品中脂肪酸的測定》
01
脂肪酸甲酯和脂肪酸甘油三酯標準品如何選擇？
國標《GB 5009.168-2016 食品安全國家標準 食品中脂肪酸的測定》按照定量方法分為三個方法，分別是內標法、外標法和歸一化法。內標法需要使用37種脂肪酸甲酯混標作為定性外標，十一碳酸甘油三酯作為定量內標；外標法需要使用相應的脂肪酸甘油三酯作為定量外標；歸一化法需要使用37種脂肪酸甲酯混標作為定性外標。
02
37種脂肪酸甲酯混標如何使用，
內標法如何配置標準曲線？
從國標GB 5009.168-2016的截圖，可以看出，內標法需要配置5mg/mL十一碳酸甘油三酯的內標溶液；而混合脂肪酸甲酯標液不需要配置標準曲線，僅用於定性和脂肪酸甲酯響應因子的計算。
如果選購37種脂肪酸甲酯混合標液（不同濃度於異辛烷，總計10 mg/mL），建議取1.0mL 混合標液稀釋至5mL或10mL，得到總計2mg/mL或1mg/mL的37種脂肪酸甲酯混合標準使用液。
脂肪酸甲酯混標的作用主要是用來計算脂肪酸甲酯相對十一碳酸甲酯的響應因子，因此進樣單點的標準溶液即可；樣品中脂肪酸甲酯的含量計算主要取決於樣品中添加的十一碳酸甲酯內標的含量和樣品中各脂肪酸甲酯的峰麵積及其響應因子。樣品中脂肪酸的含量需要由脂肪酸甲酯的含量再乘以轉換係數得到。
03
使用CD-2560進樣37種脂肪酸甲酯為什麼隻出了36個峰？
不同品牌、不同規格的色譜柱，色譜柱汙染、柱效下降的色譜柱都可能導致37種脂肪酸的分離有所變化，建議可通過調整流速等參數優化色譜條件，以達到最優分離度。
建議先在0.8mL/min 的流速條件下查看目標峰的分離情況，根據出峰情況，如果是31號和32號峰分離變差就增加流速，如果是24號峰、30號峰和35號峰分離變差就減小流速，通過流速的微調以找到最優的分離條件。具體調整方法可查看安譜實驗相關的單頁“37種脂肪酸甲酯分離的小秘密，你知道嗎？”。
04
外標法檢測有哪些需要注意？
waibiaofashiyongzhifangsuanganyousanzhizuoweibiaozhunpin，danxuyaojiangzhifangsuanganyousanzhibiaozhunrongyejingguozhijiaohuanzhuanbianweizhifangsuanjiazhishangjijiance，bukezhijiejiangzhifangsuanganyousanzhizhijieshangjijiance，yebukeshiyongzhifangsuanjiazhizuoweiwaibiaojinxingdingliangjisuan。
waibiaofashizhijiejisuanyangpinzhongzhifangsuandehanliang，buxuyaojisuanzhifangsuanjiazhidehanliang。tongguozhifangsuanganyousanzhidedandianwaibiaofajinxingjisuan，jisuanjieguozhuyaoyuzhifangsuanganyousanzhibiaozhunrongyedenongdu、脂(zhi)肪(fang)酸(suan)甲(jia)酯(zhi)的(de)峰(feng)麵(mian)積(ji)和(he)脂(zhi)肪(fang)酸(suan)甘(gan)油(you)三(san)酯(zhi)轉(zhuan)化(hua)為(wei)脂(zhi)肪(fang)酸(suan)的(de)係(xi)數(shu)有(you)關(guan)。脂(zhi)肪(fang)酸(suan)甘(gan)油(you)三(san)酯(zhi)標(biao)準(zhun)溶(rong)液(ye)濃(nong)度(du)的(de)選(xuan)擇(ze)可(ke)根(gen)據(ju)實(shi)際(ji)樣(yang)品(pin)中(zhong)脂(zhi)肪(fang)酸(suan)的(de)含(han)量(liang)進(jin)行(xing)優(you)化(hua)調(tiao)整(zheng)，使(shi)其(qi)盡(jin)量(liang)接(jie)近(jin)樣(yang)品(pin)中(zhong)含(han)量(liang)。
二、《GB 5009.257-2016 食品安全國家標準 食品中反式脂肪酸的測定》
01
要檢測哪些反式脂肪酸，標準品怎麼選擇？
標準要求檢測食品中C16:1t~C22:1t等16種反式脂肪酸。具體目標物信息可參見標準附錄A中的“表A.1 脂肪酸甲酯化學信息表”。
針對標準要求的反式脂肪酸，推薦的標準品選擇見下表，分別是6種反式單不飽和脂肪酸甲酯、4種十八碳二烯酸甲酯、8種十八碳三烯酸甲酯。
02
反式脂肪酸標品的使用有些什麼注意點？
上述推薦的3種zhong反fan式shi脂zhi肪fang酸suan標biao準zhun品pin中zhong十shi八ba碳tan二er烯xi酸suan甲jia酯zhi和he十shi八ba碳tan三san烯xi酸suan甲jia酯zhi均jun為wei同tong分fen異yi構gou體ti混hun合he物wu形xing式shi，均jun無wu準zhun確que濃nong度du，這zhe是shi反fan式shi脂zhi肪fang酸suan的de性xing質zhi及ji其qi生sheng產chan工gong藝yi導dao致zhi，但dan這zhe並bing不bu影ying響xiang結jie果guo的de計ji算suan，因yin為wei標biao準zhun中zhong反fan式shi脂zhi肪fang酸suan的de定ding量liang方fang法fa是shi麵mian積ji歸gui一yi化hua法fa，並bing不bu需xu要yao確que定ding某mou一yi個ge反fan式shi脂zhi肪fang酸suan的de準zhun確que濃nong度du，此ci標biao準zhun品pin更geng重zhong要yao的de作zuo用yong是shi目mu標biao物wu的de定ding性xing。
4種十八碳二烯酸甲酯混標和8種十八碳三烯酸甲酯混標中的目標物信息見下表，可以看出2個混標中分別含有順-9,12-十八碳二烯酸甲酯（亞油酸甲酯）和順-9,12,15-十八碳三烯酸甲酯（亞麻酸甲酯）這兩種順式脂肪酸甲酯。因此推薦的3種混標產品中總共含有18個目標物。
03
檢測食品中反式脂肪酸
還需要檢測其他常見脂肪酸嗎？
檢(jian)測(ce)食(shi)品(pin)中(zhong)的(de)反(fan)式(shi)脂(zhi)肪(fang)酸(suan)需(xu)要(yao)同(tong)時(shi)檢(jian)測(ce)其(qi)他(ta)順(shun)式(shi)脂(zhi)肪(fang)酸(suan)，反(fan)式(shi)脂(zhi)肪(fang)酸(suan)的(de)定(ding)量(liang)計(ji)算(suan)是(shi)使(shi)用(yong)歸(gui)一(yi)化(hua)法(fa)，從(cong)公(gong)式(shi)可(ke)以(yi)看(kan)出(chu)需(xu)要(yao)計(ji)算(suan)樣(yang)品(pin)中(zhong)所(suo)有(you)脂(zhi)肪(fang)酸(suan)甲(jia)酯(zhi)目(mu)標(biao)物(wu)的(de)校(xiao)準(zhun)峰(feng)麵(mian)積(ji)。通(tong)常(chang)建(jian)議(yi)可(ke)以(yi)和(he)《GB 5009.168-2016 食品安全國家標準 食品中脂肪酸的測定》同時檢測，因此檢測食品中反式脂肪酸還需要采購37種脂肪酸甲酯混標進行檢測。
需要注意的是“GB 5009.168-2016”和“GB 5009.257-2016”兩個標準中脂肪酸的歸一化法的計算公式是並不一樣，在實際檢測過程中需要分別參照標準要求的公式進行計算。
04
標準品中有一些脂肪酸甲酯的CAS號和標準不一樣？
因不飽和脂肪酸甲酯存在順反異構，以及順反物質的混合物，因此可能設計多個CAS號，所以需要對標準品的CAS號信息特別注意。特別是“GB 5009.257-2016”中的CAS號信息情況，詳見下表，而在“GB 5009.168-2016”中目標物的CAS號信息均正確無誤，各位老師可以結合“GB 5009.168-2016”進行目標物CAS號信息的確認。
05
有一些反式脂肪酸和順式脂肪酸分離度較差怎麼優化？
在脂肪酸檢測過程中常常遇到的一個問題是，順式脂肪酸 C18:3 6c,9c,12c 和he一yi些xie反fan式shi十shi八ba碳tan三san烯xi酸suan為wei同tong分fen異yi構gou體ti，且qie在zai色se譜pu柱zhu上shang出chu峰feng時shi間jian完wan成cheng重zhong合he，無wu法fa分fen離li，這zhe樣yang就jiu會hui導dao致zhi如ru果guo樣yang品pin中zhong有you出chu峰feng，則ze無wu法fa判pan定ding該gai目mu標biao物wu是shi反fan式shi和he順shun的de結jie構gou，影ying響xiang結jie果guo判pan定ding。
