1. 布氏杆菌屬
布氏杆菌屬是一類革蘭陰性細小杆菌,牛、羊、豬zhu等deng動dong物wu最zui易yi感gan染ran。人ren類lei接jie觸chu帶dai菌jun動dong物wu或huo食shi用yong病bing畜chu及ji其qi乳ru製zhi品pin,均jun可ke被bei感gan染ran。布bu氏shi杆gan菌jun病bing廣guang泛fan分fen布bu世shi界jie各ge地di,我wo國guo部bu分fen地di區qu曾zeng有you流liu行xing。布bu氏shi杆gan菌jun屬shu分fen為wei羊yang、牛、豬、鼠、綿羊及犬布氏杆菌6個種,20個生物型。中國流行的主要是羊、牛、豬三種布氏杆菌,其中以羊布氏杆菌病最為多見。
布氏杆菌屬細菌為非抗酸性,無芽胞,無莢膜,無鞭毛,呈球杆狀(見圖1)。血瓊脂(BAP)上為透明或半透明、光滑且有光澤菌落。此細菌不在麥康凱瓊脂上生長。布氏杆菌屬細菌尿素陽性,觸酶、氧化酶陽性,而吲哚陰性。由於該菌屬細菌具有強的傳染性,因此一旦懷疑應送往LRN B級參考實驗室進行確認。
2. 空腸彎曲菌
空kong腸chang彎wan曲qu菌jun是shi一yi種zhong人ren畜chu共gong患huan病bing病bing原yuan菌jun,可ke以yi引yin起qi人ren和he動dong物wu發fa生sheng多duo種zhong疾ji病bing,並bing且qie是shi一yi種zhong食shi物wu源yuan性xing病bing原yuan菌jun,認ren為wei是shi引yin起qi全quan世shi界jie人ren類lei細xi菌jun性xing腹fu瀉xie的de主zhu要yao原yuan因yin。其qi致zhi病bing因yin素su包bao括kuo粘zhan附fu、侵襲、chanshengdusuhefenzimonijizhidengsigefangmian,tongguofenzimonijizhikeyiyinqizuiyanzhongdebingfazhengyigelinyibalizonghezheng。kongchangwanqujunkeyitongguochanshengxibaojinzhangxingchangdusu、細胞毒素和細胞致死性膨脹毒素而致病。空腸彎曲菌對紅黴素、新黴素、慶大黴素、四環素、氯黴素、卡那黴素等抗生素敏感,但近年發現了不少耐藥菌株及多重耐藥性菌株。
空腸彎曲菌菌體輕度彎曲似逗點狀。菌體一端或兩端有鞭毛,運動活潑,在暗視野鏡下觀察似飛蠅。有莢膜,不形成芽胞。微需氧菌,在含2.5~5%氧和10% CO2的環境中生長最好,在正常大氣或無氧環境中均不能生長,最適溫度為37~42℃。本菌在普通培養基上難以生長,在凝固血清和血瓊脂培養基上培養36小xiao時shi可ke見jian無wu色se半ban透tou明ming毛mao玻bo璃li樣yang小xiao菌jun落luo,單dan個ge菌jun落luo呈cheng中zhong心xin凸tu起qi,周zhou邊bian不bu規gui則ze,無wu溶rong血xue現xian象xiang。空kong腸chang彎wan曲qu生sheng化hua反fan應ying不bu活huo潑po,不bu發fa酵jiao糖tang類lei,不bu分fen解jie尿niao素su。可ke還hai原yuan硝xiao酸suan鹽yan,氧yang化hua酶mei和he觸chu酶mei為wei陽yang性xing。能neng產chan生sheng微wei量liang或huo不bu產chan生sheng硫liu化hua氫qing,甲jia基ji紅hong和hev-p試驗陰性,枸椽酸鹽培養基中不生長,在彎曲菌中馬尿酸呈陽性反應具有重要鑒定價值。
3.“HACEK”群細菌
HACEK是指一組革蘭陰性杆菌:嗜血杆菌屬(H)、放線杆菌屬(A)、人心杆菌屬(C)、艾肯菌屬(E)、金氏杆菌屬(K)。這組微生物的共同特征是易導致心內膜感染,約占全部感染性心內膜炎的5-10%,它們是導致正常人群(非靜脈藥物濫用者)心內膜炎的常見原因之一。所有這些微生物都是口咽部正常菌群的一部分,生長緩慢、喜好富二氧化碳環境。除心髒瓣膜感染,HACEK菌還導致其他感染:菌血症、各類膿腫、腹膜炎、中耳炎、結膜炎、肺炎、化膿性關節炎、骨髓炎、尿路感染、傷口感染、腦膿腫、牙周感染。
嗜血杆菌屬因在生長過程中需含有生長因子X(氯化高鐵血紅素)和(或)V(輔酶Ⅰ)dexueyeqiongzhierdeming。benshuxijunweigelanyinxingxiaoganjun,wudongli,juyoumingxiandeduoxingxing,buxingchengyabao,xuyanghuojianxingyanyang。liuganshixueganjunshishixueganjunshuzuizhongyaodebingyuanjun,jingxiachengqiuganzhuang、長杆狀、少數為絲狀。粘液型菌株有莢膜,毒力較強。菌落一般為光滑型,若與金黃色葡萄球菌在BAP上共同孵育,則在葡萄球菌菌落周圍生長的流感嗜血杆菌菌落較大,這叫做“衛星現象”。原因是金黃色葡萄球菌能合成較多的V因子,促進流感嗜血杆菌的生長。
放線杆菌屬為革蘭陰性杆菌,有時呈球形、橢圓形(見圖3)。兼性厭氧菌,無動力,無莢膜,在含血清或血液的培養基上生長良好,37℃培養2~3天後形成直徑約1mm的菌落。在肉湯培養液中生長呈顆粒狀。對人或動物致病的有伴放線放線杆菌、林lin氏shi放fang線xian杆gan菌jun和he馬ma駒ju放fang線xian杆gan菌jun。伴ban放fang線xian放fang線xian杆gan菌jun因yin常chang見jian於yu人ren類lei的de某mou些xie放fang線xian菌jun病bing的de病bing灶zao中zhong而er得de名ming。但dan也ye可ke單dan獨du致zhi病bing,如ru一yi些xie亞ya急ji性xing細xi菌jun性xing心xin內nei膜mo炎yan是shi由you本ben菌jun引yin起qi的de。本ben屬shu細xi菌jun能neng還hai原yuan硝xiao酸suan鹽yan,不bu產chan生sheng吲yin哚duo,尿niao素su陽yang性xing。
人心杆菌是心杆菌屬內唯一的種,是人的鼻腔和咽喉部的正常菌群,可引起心內膜炎、尿路感染、腦膿腫和牙周炎等疾病。大部分菌株可從血液中分離而來,有的菌株也可從腦脊液中分離而來。人心杆菌為無鞭毛、無莢膜、無芽孢,並具有多形性的革蘭陰性杆菌(見圖4)。革蘭染色不易被脫色,單個存在或成對排列,有時形成短鏈或呈葡萄狀排列。該菌為兼性厭氧菌,某些菌株在初代分離時需要CO2,在生長過程中要有一定濕度,在幹燥環境中不生長;在35~37 ℃均可生長,但在22 ℃或42 ℃均不生長。該菌在BAP上不溶血,經24h 培養後菌落很小,48h 後可達1mm,菌落為圓形、凸起、光滑、有(you)光(guang)澤(ze)而(er)邊(bian)緣(yuan)整(zheng)齊(qi),某(mou)些(xie)菌(jun)株(zhu)的(de)菌(jun)落(luo)可(ke)長(chang)入(ru)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong),使(shi)培(pei)養(yang)基(ji)表(biao)麵(mian)瓊(qiong)脂(zhi)凹(ao)陷(xian)。麥(mai)康(kang)凱(kai)瓊(qiong)脂(zhi)上(shang)不(bu)生(sheng)長(chang)。人(ren)心(xin)杆(gan)菌(jun)氧(yang)化(hua)酶(mei)陽(yang)性(xing),觸(chu)酶(mei)陰(yin)性(xing),吲(yin)哚(duo)陽(yang)性(xing),不(bu)還(hai)原(yuan)硝(xiao)酸(suan)鹽(yan)。
齧蝕艾肯菌是革蘭陰性多形性球杆菌(見圖5),有you一yi種zhong漂piao白bai劑ji的de氣qi味wei,兼jian性xing厭yan氧yang,是shi口kou腔qiang和he許xu多duo其qi他ta粘zhan膜mo表biao麵mian的de正zheng常chang菌jun群qun。齧nie蝕shi艾ai肯ken菌jun是shi人ren咬yao傷shang後hou發fa生sheng的de蜂feng窩wo織zhi炎yan的de病bing原yuan體ti,它ta也ye是shi已yi發fa現xian靜jing脈mai藥yao物wu濫lan用yong者zhe軟ruan組zu織zhi感gan染ran和he心xin內nei膜mo炎yan主zhu要yao病bing原yuan體ti。它ta也ye能neng導dao致zhi各ge種zhong各ge樣yang的de肺fei部bu感gan染ran(如膿胸、肺炎、敗血症栓子),類似嚴格偏性厭氣菌。
大多數齧蝕艾肯菌性心內膜炎患者有潛在的生物瓣膜病變。與其他HACEK菌不同,大多數齧蝕艾肯菌性心內膜炎與靜脈藥物濫用有關。齧蝕艾肯菌在培養基上凹陷生長,吲哚陰性,鳥氨酸陽性。
金氏杆菌屬是革蘭陰性球杆菌,有3個種:
金氏金氏杆菌、產吲哚金氏杆菌、去硝化金氏杆菌,隻有金氏金氏杆菌引起心內膜炎。與其他HACEK菌不同,金氏杆菌感染進展相當迅速。金氏金氏杆菌在BAP呈大的、光滑、不透明、白色或米色、β-溶血菌落,與腸杆菌科細菌相似,但在麥康凱瓊脂上不生長。金氏金氏杆菌觸酶陰性,氧化酶陽性,通常分離自無菌組織和體液。
4. 土拉熱弗朗西斯氏菌
土拉熱弗朗西斯氏菌簡稱土拉弗氏菌,是引起土拉弗氏菌病(野兔熱)的病原菌。人類感染此病多因接觸患病動物而致,或攝食汙染食物和吸入汙染空氣所致。土拉杆菌是革蘭陰性多形性細菌,鏡下呈球狀、杆狀、豆狀和絲狀等,無芽胞、無動力、有莢膜。該菌營養要求較高,在普通瓊脂培養基和肉湯中均不生長,隻在加入
胱氨酸、半胱氨酸、血液或卵黃的培養基中生長,形成圓形、光滑、灰色、凸起、有粘性的菌落,在雞胚絨尿膜上也能生長,在卵黃囊中生長尤為茂盛,最適生長溫度35℃ ~37℃ 。若從動物或人體初次分離,一般需要3—5天。常用培養基主要有半胱氨酸葡萄糖血液瓊脂平板(Francis培養基)、卵黃瓊脂平板和半胱氨酸巧克力瓊脂。土拉熱弗朗西斯氏菌氧化酶陰性,觸酶陰性或弱陽性,β-內酰胺酶陽性。由於該菌具有強傳染性,必須在生物安全櫃中處理,一旦懷疑需送往LRN參考實驗室進行確認。
5. 卡他莫拉菌
卡他莫拉菌為革蘭陰性雙球菌。過去一直認為卡他莫拉菌是對人體無致病性的上呼吸道正常寄居菌,但是,近20多年的研究發現,該菌不僅可以引起兒童和老年人的上呼吸道感染,而且還是引起成人下呼吸道感染的重要病原菌,是兒童上頜竇炎、中耳炎、肺炎以及成人的慢性下呼吸道感染的第3位最常見致病菌,僅次於流感嗜血杆菌和肺炎鏈球菌。卡他莫拉菌在BAP上不溶血,整個菌落可推動,氧化酶、觸酶陽性,丁酸鹽、吲哚酚醋酸鹽陽性。
6. 奈瑟菌屬
奈瑟菌屬細菌為革蘭陰性球菌,單個或成雙排列,無芽孢、無鞭毛、有菌毛,觸酶、氧化酶陽性,包括腦膜炎奈瑟菌(見圖7)、淋病奈瑟菌等9種,其中有臨床意義的致病菌為腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌。BAP上呈透亮不溶血菌落,氧化酶、γ-穀氨酰氨肽酶陽性為腦膜炎奈瑟菌。BAP上呈淺灰色不溶血菌落,氧化酶、β-半乳糖苷酶陽性為乳糖奈瑟菌。淋病奈瑟菌在巧克力瓊脂上呈小的、有光澤的菌落,通常在BAP、MH和胰大豆瓊脂上生長,氧化酶陽性,觸酶強陽性(30%過氧化氫),而γ-穀氨酰氨肽酶、β-半乳糖苷酶陰性。
不常見革蘭陰性菌的快速鑒定方法
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細菌名稱 |
鑒定方法附加 |
確證試驗 |
備注 |
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1.革蘭陰性杆菌,似海鷗翅膀狀排列 |
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1.多形態的細小革蘭陰性杆菌 |
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1.細小革蘭陰性杆菌 |
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1.細小革蘭陰性杆菌或球杆菌 |
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1.革蘭陰性球杆菌 |
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1.革蘭陰性雙球菌 |
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二. 不常見革蘭陽性菌
1.產單核李斯特菌
李斯特菌是一種典型的胞內寄生的革蘭陽性短杆菌,共分為2個群,7個種。第一群包括產單核細胞李斯特菌、伊氏李斯特菌、無害李斯特菌(又名英洛克李斯特菌) 、韋氏李斯特菌及西爾李斯特菌;dierqunweijiaoshaojiandegeshilisitejunhemoshilisitejun。qizhongchandanhexibaolisitejunheyishilisitejunjuyouzhibingxing,qiechandanhexibaolisitejunshiweiyinengyinqirenleijibingde,shiyizhongrenshougonghuanbingdebingyuanjun,nengyinqiren、畜的李斯特菌病,感染後主要表現為敗血症、腦膜炎、流產和單核細胞增多。這種病菌在自然界廣泛存在,食品中存在的產單核細胞李斯特菌對人類的安全具有危險,世界衛生組織(WHO)指出,水產品、奶及奶製品、肉製品均有不同程度的汙染,並曾將其列為20世紀90年代食品中四大致病菌之一。
產單核李斯特菌是一種革蘭陽性短小杆菌,通常成雙排列,偶爾可見雙球狀(見圖8)。有鞭毛,但僅在18~20℃有動力,在37℃donglihuanman。wuyabao,yibanbuxingchengjiamo,danzaihanyouxueqingdeputaotangdanbaidongshuizhongnengxingchengzhanduotangjiamo。jianxingyanyang,duiyingyangyaoqiubugao,putongpeiyangjishangkeshengchang,zaixuepingbanshanghuixingchengβ-溶血。最適的生長溫度是30~37℃,並可在4℃條件下進行冷增菌。本菌耐堿不耐酸,對熱較為敏感,加熱50℃10min即可死亡同時該菌對多種抗生素敏感,以氨苄青黴素為首選,尚有青黴素、鏈黴素、四環素、氯黴素和紅黴素等敏感。但該菌對磺胺、杆菌肽和多粘菌素耐藥。產單核李斯特菌觸酶陽性,馬尿酸鹽陽性。
2.鏈球菌屬
鏈球菌屬細菌廣泛分布於自然界、人和動物腸道、健康人鼻咽部等,致病鏈球菌可引起各種化膿性炎症、猩紅熱、風(feng)濕(shi)熱(re)等(deng)疾(ji)病(bing)。本(ben)屬(shu)細(xi)菌(jun)為(wei)革(ge)蘭(lan)陽(yang)性(xing)球(qiu)菌(jun),鏈(lian)狀(zhuang)排(pai)列(lie),無(wu)鞭(bian)毛(mao),無(wu)芽(ya)孢(bao),可(ke)形(xing)成(cheng)莢(jia)膜(mo),在(zai)液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)易(yi)形(xing)成(cheng)長(chang)鏈(lian),致(zhi)病(bing)性(xing)強(qiang)的(de)菌(jun)株(zhu)多(duo)為(wei)長(chang)鏈(lian),在(zai)膿(nong)汁(zhi)標(biao)本(ben)中(zhong)多(duo)為(wei)短(duan)鏈(lian)。本(ben)屬(shu)細(xi)菌(jun)為(wei)需(xu)氧(yang)或(huo)兼(jian)性(xing)厭(yan)氧(yang)菌(jun),部(bu)分(fen)為(wei)厭(yan)氧(yang)菌(jun)。營(ying)養(yang)要(yao)求(qiu)較(jiao)高(gao),需(xu)在(zai)加(jia)有(you)血(xue)液(ye)、血清等成分的培養基生長良好。根據鏈球菌在血液瓊脂平板上菌落周圍溶血情況,有草綠色溶血環的稱為α型溶血,如草綠色鏈球菌;呈透明溶血環的稱為β型溶血,稱β溶血性鏈球菌或化膿性鏈球菌;也有不溶血的,稱為γ型溶血,如腸球菌。根據族特異性抗原將鏈球菌分A-T 18個族。鏈球菌屬細菌觸酶陰性。化膿鏈球菌(A群) PYR陽性。無乳鏈球菌(B群) 馬尿酸鹽陽性,CAMP陽性。草綠色鏈球菌PYR陰性,LAP陽性,膽汁溶菌試驗陰性。肺炎鏈球菌鏡下為革蘭陽性球菌,矛尖狀,成雙排列,在人和動物體內形成莢膜,菌落細小、周圍有草綠色溶血環,48小時後,由於菌落自溶,呈現“臍窩狀”,Optochin敏感試驗陽性,膽汁溶菌試驗陽性,菊糖分解試驗陽性。
表2 不常見革蘭陽性菌快速鑒定方法
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細菌名稱 |
初步鑒定方法 |
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凝固酶玻片法可能陽性 |
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分離自血培養或CSF才有意義 |
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