GB 4789.15-2016相比GB 4789.15-2010,最大的區別可能就在於對平皿的培養方式。2016版的國標在5.2中要求:瓊脂凝固後,正置平板,置28℃±1℃培養箱中培養,觀察並記錄培養至第5d的結果。
其實針對這一條,需要注意兩點:
第一,是需要對平板進行觀察的,不能直接培養至第5天計數,因為黴菌的特殊性,在培養過程中會產生大量孢子,導致整個平板蔓延。因此,在培養後的第2天開始,就要對平板進行觀察,並計數典型菌落,而這樣的觀察在之後每一天都應該進行,直至培養第5天。
第二,就是正置培養。這一點是16版國標與舊版最大的區別,10版之前的國標都是倒置培養的。而進行正置培養,很多朋友可能都會遇到平板被黴菌汙染的問題,比如圖中的情況,這怎麼解決呢?

遇到這種情況,一開始我們也是十分疑惑,檢測方法的黴菌是從哪裏來的呢!
其實造成這種情況的原因有很多種,可能有培養箱環境汙染,平皿冷凝水汙染,操作環境汙染、培養基問題等等,這些問題都該如何解決呢?
汙染原因與解決措施
一、培養箱環境汙染
很hen多duo實shi驗yan室shi培pei養yang黴mei菌jun采cai用yong的de是shi專zhuan用yong的de黴mei菌jun培pei養yang箱xiang,所suo以yi培pei養yang箱xiang空kong間jian裏li會hui有you大da量liang的de黴mei菌jun孢bao子zi。而er平ping皿min的de蓋gai和he底di是shi有you一yi定ding縫feng隙xi的de,尤you其qi是shi玻bo璃li平ping皿min縫feng隙xi還hai是shi比bi較jiao大da的de,正zheng置zhi培pei養yang中zhong,孢bao子zi會hui向xiang上shang飛fei揚yang通tong過guo縫feng隙xi落luo到dao平ping板ban的de培pei養yang基ji上shang,導dao致zhi汙wu染ran。細xi心xin地di實shi驗yan猿yuan可ke能neng發fa現xian,汙wu染ran的de菌jun落luo大da部bu分fen都dou是shi在zai平ping皿min邊bian緣yuan生sheng長chang的de。用yong一yi次ci性xing塑su料liao平ping皿min來lai培pei養yang,汙wu染ran的de概gai率lv就jiu會hui小xiao很hen多duo,因yin為wei一yi次ci性xing塑su料liao平ping皿min的de蓋gai和he底di之zhi間jian的de縫feng隙xi相xiang比bi之zhi下xia是shi比bi較jiao小xiao的de。因yin此ci培pei養yang箱xiang環huan境jing中zhong的de孢bao子zi可ke能neng會hui是shi主zhu要yao汙wu染ran源yuan。
這樣一來,解決的方法就應該是對培養箱進行殺菌。可以考慮用紫外線殺一下菌,同時輔助消毒劑擦拭的方法,常用消毒劑比如75%jiujinghexinjieermiedeng,yinggaizhuyideshi,zheyangdeshajuncaozuoyeshixuyaojingchangjinxingde,yinweimeijundebaozishishifennanqingchude,ermeicipeiyangkenengyouhuiyinjinxindewuranyuan,keyikaolvmeizhoujinxingliangci,baozhengpeiyanghuanjingwuwuranyuan。
二、平皿冷凝水汙染
正zheng置zhi培pei養yang過guo程cheng中zhong,若ruo是shi平ping皿min的de上shang蓋gai有you泠ling凝ning水shui,在zai培pei養yang過guo程cheng中zhong冷leng凝ning水shui滴di落luo到dao培pei養yang基ji上shang,也ye極ji容rong易yi造zao成cheng菌jun落luo蔓man延yan,平ping皿min汙wu染ran。因yin此ci在zai培pei養yang之zhi前qian,一yi定ding要yao保bao證zheng平ping皿min幹gan燥zao,可ke以yi把ba平ping皿min放fang在zai37℃的環境裏烘幹,烘幹之後再進行培養,就會避免這個原因造成的汙染。
三、操作環境和培養基的汙染
因yin為wei無wu菌jun室shi裏li可ke能neng也ye會hui因yin為wei滅mie菌jun效xiao果guo不bu理li想xiang造zao成cheng汙wu染ran。小xiao編bian之zhi前qian工gong作zuo的de實shi驗yan室shi,操cao作zuo台tai使shi用yong紫zi外wai線xian滅mie菌jun,經jing常chang就jiu會hui滅mie菌jun不bu徹che底di有you孢bao子zi汙wu染ran,尤you其qi是shi在zai進jin行xing過guo黴mei菌jun的de相xiang關guan檢jian測ce之zhi後hou。所suo以yi在zai進jin行xing過guo黴mei菌jun檢jian測ce之zhi後hou,適shi當dang的de增zeng長chang滅mie菌jun時shi間jian,可ke能neng會hui達da到dao比bi較jiao理li想xiang的de效xiao果guo。另ling外wai,為wei了le徹che底di解jie決jue無wu菌jun室shi空kong間jian孢bao子zi汙wu染ran的de問wen題ti,可ke以yi購gou買mai安an裝zhuang臭chou氧yang發fa生sheng器qi,通tong過guo紫zi外wai線xian+臭氧的雙重消毒模式,效果就十分理想了。
大家如果還是想驗證一下究竟是什麼原因造成的汙染,這裏提供一個簡單的驗證試驗:在正常檢測的環境中倒一組空白平皿,將這些平皿分為AB兩組,其中A組用有充足氧氣的自封袋將平皿封好,B組不封,均放置在培養箱中正置培養。若是A組B組均有黴菌生長,則需要考慮培養基汙染或者操作環境的汙染;若是A組不生長黴菌而B組生長,則需要考慮是培養箱內的環境汙染。通過這個小試驗,可以基本上確定汙染源,然後針對汙染源進行相應的處理。
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