腸杆菌科作為食品衛生指標菌在歐洲已有多年曆史，對其檢驗方法不少學者曾進行了研究。目前北歐食品分析委員會（NMKL）及ISO已製定了食品中腸杆菌科檢驗的標準方法。包括了直接增菌和前增菌的定性方法；菌落計數和帶恢複的MPN定ding量liang方fang法fa。近jin年nian來lai
，隨sui著zhe對dui外wai貿mao易yi的de發fa展zhan，歐ou洲zhou一yi些xie國guo家jia已yi對dui我wo國guo出chu口kou的de某mou些xie食shi品pin和he動dong物wu飼si料liao提ti出chu了le檢jian測ce和he限xian量liang要yao求qiu。且qie將jiang其qi作zuo為wei國guo際ji間jian食shi品pin微wei生sheng物wu學xue實shi驗yan室shi質zhi量liang控kong製zhi、水平測試的必測項目之一。我國大多數食品衛生檢驗人員對該項指標和檢驗方法缺乏了解，為適應外貿發展需要，原天津、遼寧商檢局的技術人員，采用標準菌株和自然食品樣品參照國外現有標準方法進行了研究，製定了《出口食品中腸杆菌科檢驗方法》行業標準。該行業標準有如下特點：

　　1
、zhidingleliangzhongdingliangjianyanfangfa，kegenjuduigezhongshipinguidingdebutongxianliangbiaozhunhuojiagongfangshijinxingxuanze。junluojishufashiyongyujianzhaweijingjiagongchulideshengxianshipinhuochangganjunkejishuxianliang>100/g的加工食品，帶恢複的MPN法適用於腸杆菌科計數≤100/g的加工食品。

　　2
、采用了亞致死性損傷菌恢複步驟並成功地應用於MPN定量法中，對冷凍產品，加熱冷凍產品采用36±1℃4h恢複，對加熱幹燥等處理過的食品需用36±1℃18－24h恢複。

　　3、將國外現有標準方法中EE肉湯作了改良，即將原配方中的膽汁含量由20g/L降至10g/L。大大降低了對腸杆菌科細菌的抑製力，提高了方法的靈敏度和檢出率。

　　4
、對在分離培養基VRBGA上經36±1℃培養24h後，菌落直徑仍<0.5mm的腸杆菌科。如奇異變形杆菌
、小腸結腸炎耶爾森氏菌等延長培養時間至48h，彌補了國外現有方法中僅在VRBGA 36±1℃培養24h後，挑選菌落直徑>0.5mm的腸杆菌科菌落可造成漏檢之不足。

　　5、NMKL法僅以氧化酶陰性、ISO方法以氧化酶陰性和葡萄糖瓊脂呈黃色為陽性對腸杆菌科進行確認。前法可將不發酵葡萄糖，但可利用蛋白腖生長、氧化酶也為陰性的沃夫氏不動杆菌誤判為腸杆菌科
，造成假陽性結果，使計數結果偏高；houfazeyijiangputaotangqiongzhibiaomianbianweilansedeyingouchangganjun，chanqichangganjunheshaleishijunloujian，chuxianjiayinxing
，shijishujieguopiandi。benxingyebiaozhuncaiyongleyanghuameiyinxing，putaotangqiongzhifajiaoweiquanhuanghuohuangsediceng、藍色斜麵，產氣或不產氣作為判定標準才可對腸杆菌科進行準確的確認。

6、方法的靈敏度 

1. 菌落計數法的靈敏度為≥10/g  
2. 帶恢複的MPN法的靈敏度為≤10/g或<100/g

    四、食品中腸杆菌科的汙染情況

   　　Mossel氏等曾對103份幹蛋粉
   、22份椰子粉和44份動物飼料共計169份樣品進行了腸杆菌科汙染情況的調查，其檢出率分別為80%、95%和84%。PitarGaya氏等對采集於13個農場的39份鮮羊奶和采集於乳品店的120份當日羊奶的檢樣進行了腸杆菌科及其它相關菌的調研，發現鮮羊奶中的腸杆菌科/mL的幾何平均計數為4.4×10²，當日羊奶為6.2×10³。

   　　原天津商檢局曾對四種食品100份樣品進行了調查
   ，結果為：從四種食品中共檢出了腸杆菌科細菌陽性樣品63份，陽性檢出率為63％
   
   ，但依食品種類而異
   ，以凍魚片檢出率最高，為83.3%。脫脂淡奶粉檢出率最低
   ，為30.0％。在63份陽性樣品中，腸杆菌科計數>10³/g的試樣14份。占22.2％
   ；計數<10⁸/g的試樣49份，占77.8％。其中，凍魚片為16份，占該食品陽性樣品的64.0％；速凍方便食品為15份
   ，占該食品陽性樣品的83.3％；脫水白蘿卜絲為15份
   
   ，占該食品陽性樣品的88.2％；脫脂淡奶粉的３份陽性樣品的腸杆菌科計數均＜10⁸/g。

   　　從四種食品中共分離出腸杆菌科中九個菌屬的十五種細菌
   ，占腸杆菌科常見的十四個菌屬的64.3％，另分離出其它菌群中的團聚腸杆菌。除脫脂淡奶粉外，從其它三種食品中均分離出了陰溝腸杆菌；在速凍方便食品中，克雷伯氏菌為優勢菌，占鑒定出種別的腸杆菌科細菌的50％；在脫水白蘿卜絲和脫脂淡奶粉中均檢出了團聚腸杆菌
   
   ；而(er)在(zai)凍(dong)魚(yu)片(pian)中(zhong)
   ，檢(jian)出(chu)的(de)腸(chang)杆(gan)菌(jun)科(ke)屬(shu)別(bie)較(jiao)多(duo)，表(biao)明(ming)其(qi)汙(wu)染(ran)源(yuan)較(jiao)為(wei)複(fu)雜(za)。特(te)別(bie)值(zhi)得(de)注(zhu)意(yi)的(de)是(shi)在(zai)凍(dong)魚(yu)片(pian)中(zhong)還(hai)檢(jian)出(chu)了(le)嗜(shi)冷(leng)性(xing)分(fen)解(jie)脂(zhi)肪(fang)和(he)蛋(dan)白(bai)質(zhi)的(de)蜂(feng)房(fang)哈(ha)夫(fu)尼(ni)亞(ya)菌(jun)和(he)沙(sha)雷(lei)氏(shi)菌(jun)
   
   ；在(zai)凍(dong)菜(cai)卷(juan)中(zhong)還(hai)檢(jian)出(chu)了(le)誌(zhi)賀(he)氏(shi)菌(jun)。目(mu)前(qian)，在(zai)我(wo)國(guo)仍(reng)廣(guang)泛(fan)采(cai)用(yong)大(da)腸(chang)菌(jun)群(qun)作(zuo)為(wei)指(zhi)標(biao)菌(jun)，很(hen)少(shao)以(yi)腸(chang)杆(gan)菌(jun)科(ke)作(zuo)為(wei)食(shi)品(pin)衛(wei)生(sheng)指(zhi)標(biao)菌(jun)，但(dan)對(dui)歐(ou)洲(zhou)出(chu)口(kou)食(shi)品(pin)時(shi)有(you)腸(chang)杆(gan)菌(jun)科(ke)檢(jian)測(ce)計(ji)數(shu)要(yao)求(qiu)。

   五
   
   、食品中腸杆菌科檢驗方法（見SN/T0738－1997）