誌賀氏菌屬(Shigella) 的細菌(通稱痢疾杆菌),是細菌性痢疾的病原菌。臨床上能引起痢疾症狀的病原生物很多,有誌賀氏菌、沙門氏菌、變形杆菌、大腸杆菌等,還有阿米巴原蟲、鞭毛蟲、以yi及ji病bing毒du等deng均jun可ke引yin起qi人ren類lei痢li疾ji,其qi中zhong以yi誌zhi賀he氏shi菌jun引yin起qi的de細xi菌jun性xing痢li疾ji最zui為wei常chang見jian。人ren類lei對dui痢li疾ji杆gan菌jun有you很hen高gao的de易yi感gan性xing。在zai幼you兒er可ke引yin起qi急ji性xing中zhong毒du性xing菌jun痢li,死si亡wang率lv甚shen高gao。
一、生物學性狀
誌賀氏菌屬細菌的形態與一般腸道杆菌無明顯區別,為革蘭氏陰性杆菌,長約2-3μ m ,寬0.5-0.7μ m 。不形成芽胞,無莢膜,無鞭毛,有菌毛。DNA的G+C為49-53克分子%(Tm法)。
需氧或兼性厭氧。營養要求不高,能在普通培養基上生長,最適溫度為37℃,最適pH為6.4-7.8。37℃培養18-24小時後菌落呈圓形、微凸、光滑濕潤、無色、半透明、邊緣整齊,直徑約2nm,宋內氏菌菌落一般較大,較不透明,並常出現扁平的粗糙型菌落。在液體培養基中呈均勻渾濁生長,無菌膜形成。
本菌屬都能分解葡萄糖,產酸不產氣。大多不發酵乳糖,僅宋內氏菌遲緩發酵乳糖。靛基質產生不定,甲基紅陽性,VP試驗陰性,不分解尿素,不產生H2S。根據生化反應可進行初步分類。
誌賀氏菌屬的細菌對甘露醇分解能力不同,可分為二大組。
A、不分解甘露醇組:主要為誌賀氏菌。又根據能否產生靛基質,進一步分靛基質陽性(1、3、4、5、6、9、10型)和靛基質陰性(2、7、8型)的誌賀氏痢疾菌。
B、分解甘露醇組:包括福氏、鮑氏、宋(song)內(nei)氏(shi)菌(jun)。再(zai)按(an)乳(ru)糖(tang)分(fen)解(jie)情(qing)況(kuang),分(fen)為(wei)遲(chi)緩(huan)分(fen)解(jie)乳(ru)糖(tang)的(de)宋(song)內(nei)氏(shi)和(he)不(bu)分(fen)解(jie)乳(ru)糖(tang)的(de)福(fu)氏(shi)和(he)鮑(bao)氏(shi)菌(jun)。後(hou)者(zhe)進(jin)一(yi)步(bu)再(zai)根(gen)據(ju)靛(dian)基(ji)質(zhi)產(chan)生(sheng)與(yu)否(fou),分(fen)靛(dian)基(ji)質(zhi)陽(yang)性(xing)(福氏菌1、2、3、4、5型和鮑氏菌5、7、9、11、13、15型)和靛基質陰性(福氏菌6型和鮑氏菌1、2、3、4、6、8、10、12、14)二類(見表一)

抗原構造與分型:誌賀氏菌屬細菌的抗原結構由菌體抗原(O)及表麵抗原(K)組成。主要抗原有三種。
型特異性抗原:型(xing)多(duo)糖(tang)抗(kang)原(yuan)為(wei)菌(jun)體(ti)抗(kang)原(yuan)的(de)一(yi)種(zhong),是(shi)光(guang)滑(hua)型(xing)菌(jun)株(zhu)所(suo)含(han)有(you)的(de)重(zhong)要(yao)抗(kang)原(yuan)。當(dang)菌(jun)株(zhu)變(bian)為(wei)粗(cu)糙(cao)型(xing)時(shi),此(ci)抗(kang)原(yuan)也(ye)常(chang)隨(sui)之(zhi)消(xiao)失(shi),各(ge)菌(jun)型(xing)所(suo)含(han)的(de)型(xing)抗(kang)原(yuan)不(bu)同(tong),可(ke)用(yong)於(yu)區(qu)別(bie)菌(jun)種(zhong)的(de)型(xing)別(bie)。
群特異性抗原:為(wei)光(guang)滑(hua)型(xing)菌(jun)株(zhu)的(de)次(ci)要(yao)抗(kang)原(yuan),也(ye)是(shi)菌(jun)體(ti)抗(kang)原(yuan)的(de)一(yi)種(zhong)。特(te)異(yi)性(xing)較(jiao)低(di),常(chang)在(zai)數(shu)種(zhong)近(jin)似(si)的(de)菌(jun)內(nei)出(chu)現(xian)。在(zai)福(fu)氏(shi)菌(jun)株(zhu)中(zhong),由(you)於(yu)所(suo)含(han)群(qun)抗(kang)原(yuan)不(bu)同(tong),可(ke)將(jiang)某(mou)些(xie)菌(jun)型(xing)分(fen)為(wei)多(duo)種(zhong)亞(ya)型(xing),如(ru)福(fu)氏(shi)菌(jun)2型,根據群抗原不同,可分成2a、2b兩個亞型。
表麵抗原(K抗原):在新分離的某些菌株菌體表麵含有此種抗原。不耐熱,加熱100℃1小時即被破壞。具有此種抗原的菌株,可阻止菌體抗原與相應免疫血清發生凝集。
根據抗原構造的不同,按最新國際分類法,將本屬細菌分為四個群、39個血清型(包括亞型)(見表二)
表二 誌賀氏菌屬抗原的分類
|
菌 名 |
血 清 分 類 |
生 化 特 性 |
|||
|
群 |
型 |
亞 型 |
甘露醇 |
鳥氨酸脫羧酶 |
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誌賀氏菌 |
A |
1~10 |
|
+ |
- |
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福 氏 菌 |
B |
1~6 x、y變種 |
1a、1b、2a、2b、3a、3b 3c、4a、4b |
+ |
- |
|
鮑 氏 菌 |
C |
1~15 |
|
+ |
- |
|
宋內氏菌 |
D |
1 |
|
+ |
- |
A群:也稱誌賀氏菌群,有10個血清型。不發酵甘露醇,無鳥氨酸脫羧酶,與其他各群細菌無血清學聯係。
B群:也稱福氏菌群,已有13個血清型(包括亞型和變種)。最近又發現3個亞型(1c、4c、5b)。發fa酵jiao甘gan露lu醇chun,無wu鳥niao氨an酸suan脫tuo羧suo酶mei。抗kang原yuan結jie構gou較jiao複fu雜za,各ge型xing間jian有you交jiao叉cha凝ning集ji。每mei一yi福fu氏shi菌jun型xing具ju有you二er種zhong抗kang原yuan,即ji型xing特te異yi性xing抗kang原yuan和he群qun抗kang原yuan,前qian者zhe隻zhi存cun在zai於yu同tong型xing菌jun株zhu中zhong,後hou者zhe有you許xu多duo種zhong,存cun在zai於yu福fu氏shi各ge菌jun型xing中zhong。例li如ru福fu氏shi1b型除含有1型特異性抗原外,尚含有4、6群抗原。
C群:也稱鮑氏菌群,有15個血清型,分解甘露醇,無鳥氨酸脫羧酶。各型內無交叉凝集。
D群:也稱宋內氏菌群,僅有一個血清型。分解甘露醇,有鳥氨酸脫羧酶,遲緩發酵乳糖。有Ⅰ、Ⅱ相之分。
抵抗力:誌賀氏菌屬在外界環境中的生存力,以宋內氏最強,福氏菌次之,誌賀氏菌最弱。一般在潮濕土壤中能存活34天,37℃水中存活20天,在冰塊中可存活96天,在糞便內(室溫)存活11天。日光直接照射30分鍾,56-60℃10分即被殺死,對高溫和化學消毒劑很敏感,1%石炭酸中15-30分鍾即被殺死,對氯黴素、磺胺類、鏈黴素敏感,但易產生耐藥性。
變異性:
S-R型變異:菌落可由光滑型變為粗糙型,同時常伴有生化反應、抗kang原yuan構gou造zao和he致zhi病bing性xing的de變bian異yi。在zai機ji體ti內nei,尤you其qi在zai慢man性xing患huan者zhe和he恢hui複fu期qi患huan者zhe,誌zhi賀he氏shi菌jun可ke發fa生sheng變bian異yi而er失shi去qu原yuan來lai的de生sheng化hua和he抗kang原yuan特te性xing,成cheng為wei不bu典dian型xing菌jun株zhu。但dan其qi中zhong部bu分fen不bu典dian型xing菌jun株zhu,可ke通tong過guo10%danzhiroutangdengfanzuweidianxingjunzhu。guzaimanxinghuanzhehuodaijunzhefenbianjianzhashi,duizheleijunzhuyaotebiezhuyi,bixuduocifanfujianzha。yinzheduichuanranyuandefaxianjikongzhiyouzhongyaoyiyi。
耐藥性變異:自從廣泛使用抗菌素以來,誌賀氏菌的耐藥菌株 不斷增加,給防治工作帶來許多困難。國內部分地區報道(1972-1974),誌賀氏菌對四環素的耐藥率達74%、氯黴素73.6-97%、鏈黴素84-98%、合黴素75-100%、磺胺類97-100%,可見國內對常用幾種抗菌素的耐藥率相當高。
毒力變異與其他變異:1963年南斯拉夫Mel氏首先創用依賴鏈黴素的誌賀氏菌株(依鏈Sd株,口服預防痢疾。Sd株是一株必須有鏈黴素存在下才能生長的菌株,其毒力減弱但仍保持免疫原性。美國以天然變異無毒株與大腸杆菌雜交而獲得的MH株製成疫苗,其免疫效果和穩定性均較Sd株差。我國正大力利用變異方法通過動物和藥物處理等尋找安全有效可供口服的痢疾杆菌活菌苗,並已取得初步成效。
與E.coli的鑒別:誌賀氏菌與E.coli的區別,的確是很困難的,這也反映了這二者在DNA_DNA雜交顯示密切相關性,實質是“同一種”。A.培養物常常是不運動的,賴氨酸是陰性。B.除了福氏誌賀氏6、鮑氏誌賀氏13和14、痢疾誌賀氏3少數菌株外,在糖發酵時不產氣。C.發酵粘液酸或乙酸鹽洋菜上或Chiristensen檸檬酸洋菜 。如呈堿反應的菌株則類似與E.coli。D.鮑氏誌賀氏菌和痢疾誌賀氏菌在美國很少見。
二、流行病學 :
人和靈長類是誌賀氏菌的適宜宿主,營養不良的幼兒、老人及免疫缺陷者更為易感。據報道,每年約有14000例誌賀氏菌病,但估計發病人數為30萬。
據FDA統計,1997年美國加州等5個州食源性疾病共為8051例,其中誌賀氏菌引起的為1263例。
誌賀氏菌病常為食物爆發型或經水傳播。和誌賀氏菌病相關的食品包括色拉(土豆、金槍魚、蝦、通心粉、雞),shengdeshucai,naihenaizhipin,qin,shuiguo,mianbaozhipin,hanbaobao,heyouqiyulei。zhiheshijunzaiyongjihebuweishengtiaojianxianengxunsuchuanbo,jingchangfaxianyurenyuandaliangjizhongdedifangrucanting、食(shi)堂(tang)。食(shi)源(yuan)性(xing)誌(zhi)賀(he)氏(shi)菌(jun)流(liu)行(xing)的(de)最(zui)主(zhu)要(yao)原(yuan)因(yin)是(shi)從(cong)事(shi)食(shi)品(pin)加(jia)工(gong)行(xing)業(ye)人(ren)員(yuan)患(huan)菌(jun)痢(li)或(huo)帶(dai)菌(jun)者(zhe)汙(wu)染(ran)食(shi)品(pin),食(shi)品(pin)接(jie)觸(chu)人(ren)員(yuan)個(ge)人(ren)衛(wei)生(sheng)差(cha),存(cun)放(fang)已(yi)汙(wu)染(ran)的(de)食(shi)品(pin)溫(wen)度(du)不(bu)適(shi)當(dang)等(deng)。
三、致病性:
誌賀氏菌引起的細菌性痢疾,主要通過消化道途徑傳播。根據宿主的健康狀況和年齡,隻需少量病菌(至少為10個細胞)進入,就有可能致病。
致病因素:誌賀氏菌的致病作用,主要是侵襲力、菌體內毒素個別菌株能產生外毒素。
侵襲力:zhiheshijunjinrudachanghou,youyujunmaodezuoyongzhanfuyudachangzhanmodeshangpixibaoshang,jierjinrushangpixibaobingzaineifanzhi,kuosanzhilinjinxibaojishangpixiaceng。youyudusudezuoyong,shangpixibaosiwang,zhanmoxiafayan,bingyoumaoxixiguanxueshuanxingchengyizhihuaisi、脫tuo落luo,形xing成cheng潰kui瘍yang。誌zhi賀he氏shi菌jun一yi般ban不bu侵qin犯fan其qi他ta組zu織zhi,偶ou爾er可ke引yin起qi敗bai血xue症zheng。目mu前qian認ren為wei不bu論lun是shi產chan生sheng外wai毒du素su的de還hai是shi隻zhi有you內nei毒du素su的de誌zhi賀he氏shi菌jun,必bi須xu侵qin入ru腸chang壁bi才cai能neng致zhi病bing。因yin此ci,對dui粘zhan膜mo組zu織zhi的de侵qin襲xi力li是shi決jue定ding致zhi病bing力li的de主zhu要yao因yin素su。
內毒素:zhiheshijunshuzhonggejunzhudouyouqiangliedeneidusu,zuoyongyuchangbi,shitongtouxingzenggao,congercujindusudexishou。jierzuoyongyuzhongshushenjingxitongjixinxueguanxitong,yinqilinchuangshangyixilieduxuezhengzhengzhuang,rufare、神誌障礙,甚至中毒性休克。毒素破壞粘膜,形成炎症、kuiyang,chengxiandianxingdelijinongxuebian。dusuzuoyongyuchangbizhiwushenjing,shichangdaogongnengwenluan,changrudonggongjishitiaohejingluan,youqizhichangkuoyuejizuimingxian,yinerfashengfutong、裏急後重等症狀。
外毒素:誌賀氏菌1型及部分2型(斯密茲痢疾杆菌)菌株能產生強烈的外毒素。為蛋白質,不耐熱,75-80℃1小xiao時shi即ji可ke破po壞huai。其qi作zuo用yong是shi使shi腸chang粘zhan膜mo通tong透tou性xing增zeng加jia,並bing導dao致zhi血xue管guan內nei皮pi細xi胞bao損sun害hai。外wai毒du素su經jing甲jia醛quan或huo紫zi外wai線xian處chu理li可ke脫tuo毒du成cheng類lei毒du素su,能neng刺ci激ji機ji體ti產chan生sheng相xiang應ying的de抗kang毒du素su。一yi般ban認ren為wei具ju有you外wai毒du素su的de誌zhi賀he氏shi菌jun引yin起qi的de痢li疾ji比bi較jiao嚴yan重zhong。
所致疾病:誌賀氏菌引起的細菌性痢疾可分為兩類6型。
A、急性細菌性痢疾:又分急性典型、急性非典型、急性中毒性菌痢三型。急性典型菌痢症狀典型,有腹痛腹瀉、膿血粘便、裏急後重、faredengzhengzhuang。gexingjundoukeyinqi,yizhiheshijunyinqidejiaozhong,songneishijunyinqidejiaoqing。jingzhiliao,yuhoulianghao。ruzhiliaobuchedi,kezhuanweimanxing。jixingfeidianxingjunlizhengzhuangbudianxing,yizhenduancuowuyanwuzhiliao,changdaozhidaijunhuomanxingfazhan。jixingzhongduxingjunlixiaoerduojian,gexingjundoukefasheng。zhongduxingjunliyixiliedebinglishenglibianhua,zhuyaoshineidusuzaochengjitiweixunhuanzhangaidejieguo。daozhineizangyuxue、周圍循環衰竭(休克),主要功能器官灌注不足,發生心力衰竭、腦水腫,急性腎功能衰竭。嚴重微循環障礙,再加上內毒素損傷血管內皮細胞、激活凝血因子等,而發生彌漫性血管內凝血(DIC)。
B、慢性細菌性痢疾:又分慢性遷延型、慢性隱伏型、急性發作型三型。慢性遷延型,通常由急性菌痢治療不徹底等引起。病程超過2個(ge)月(yue),時(shi)愈(yu)時(shi)發(fa),大(da)便(bian)培(pei)養(yang)陽(yang)性(xing)率(lv)低(di)。在(zai)有(you)臨(lin)床(chuang)症(zheng)狀(zhuang)時(shi)為(wei)急(ji)性(xing)發(fa)作(zuo)型(xing),該(gai)型(xing)往(wang)往(wang)在(zai)半(ban)年(nian)內(nei)有(you)急(ji)性(xing)菌(jun)痢(li)病(bing)史(shi)。慢(man)性(xing)隱(yin)伏(fu)型(xing)菌(jun)痢(li),是(shi)在(zai)一(yi)年(nian)內(nei)有(you)過(guo)菌(jun)痢(li)病(bing)史(shi),臨(lin)床(chuang)症(zheng)狀(zhuang)早(zao)已(yi)消(xiao)失(shi),但(dan)直(zhi)腸(chang)鏡(jing)可(ke)發(fa)現(xian)病(bing)變(bian)或(huo)大(da)便(bian)培(pei)養(yang)陽(yang)性(xing)。
誌賀氏菌帶菌者有三種類型。A.健康帶菌者,是指臨床上無腸道症狀而又能排出痢疾杆菌者。這種帶菌者是主要傳染源,特別是飲食業、炊事員、和保育員中的帶菌者,潛在的危險性更大。B.恢複期帶菌者,是指臨床症狀已治愈的病人,仍繼續排菌達2周之久者。C.慢性帶菌者,是指臨床症狀已治愈,但長期排菌者。
免疫性:病(bing)後(hou)有(you)一(yi)定(ding)的(de)免(mian)疫(yi)力(li),但(dan)免(mian)疫(yi)期(qi)短(duan),也(ye)不(bu)穩(wen)定(ding)。可(ke)能(neng)因(yin)本(ben)菌(jun)屬(shu)菌(jun)型(xing)眾(zhong)多(duo),相(xiang)互(hu)間(jian)無(wu)交(jiao)叉(cha)免(mian)疫(yi)性(xing)之(zhi)故(gu)。免(mian)疫(yi)性(xing)與(yu)血(xue)中(zhong)抗(kang)體(ti)似(si)乎(hu)無(wu)關(guan),而(er)與(yu)腸(chang)道(dao)粘(zhan)膜(mo)細(xi)胞(bao)吞(tun)噬(shi)能(neng)力(li)加(jia)強(qiang)和(he)機(ji)體(ti)對(dui)痢(li)疾(ji)杆(gan)菌(jun)內(nei)毒(du)素(su)耐(nai)受(shou)性(xing)提(ti)高(gao)有(you)關(guan)。腸(chang)道(dao)分(fen)泌(mi)型(xing)抗(kang)體(ti)即(ji)糞(fen)抗(kang)體(ti)亦(yi)有(you)一(yi)定(ding)作(zuo)用(yong)。糞(fen)抗(kang)體(ti)出(chu)現(xian)早(zao)、消失快,在膿血粘便中,糞抗體檢出率高達90%。這為誌賀氏疫苗經口免疫的可能性,提供了理論依據。
四、檢驗和控製:
(1-3見附錄)
4.增菌培養:
宋內氏誌賀氏菌的增菌培養;以無菌的手續稱取樣品25g放入事先加有0.5μg/mL新生黴素的250mL誌賀氏菌肉湯中,將此混懸液於室溫中靜置10min並時時振搖之。將浸液傾入滅菌的500mL錐形瓶中,調整pH,必要時用1N NaOH或1NHCL調至pH7.2±0.2,再將此錐形瓶置於加有新鮮催化劑的厭氧缸中,放入 GasPak並加水使之活化。因此厭氧罐內部溫度較高,每次用後皆應將催化劑加熱。將厭氧罐置於44.0℃水浴中培養20h,振搖混懸液後劃線接種於麥康凱氏瓊脂平板。於35℃培養20h。
對其他誌賀氏菌的增菌培養亦按上述方法進行。但加入新生黴素量為3μg/mL,並在厭氧環境下置42.0℃水浴培養。
5.誌賀氏菌的分離
a.常規培養方法
檢查麥康凱瓊脂平板,誌賀氏菌的菌落為淺粉紅色,半透明,將此可疑菌落接種於下列培養基中:葡萄糖肉湯,TSI瓊脂斜麵,賴氨酸脫羧酶肉湯,動力試驗瓊脂和胰腖。置35℃培養48h,但應在20h進行檢查,棄去所有有動力、產H2S、產氣、賴氨酸脫羧以及發酵蔗糖與乳糖的培養物。關於產生吲哚者,應棄去其44℃增菌物中的陽性培養物。至於42℃增菌培養中的所有可疑培養物皆有可能是陽性或是陰性,因此皆應予保留。
b.生理學性狀
將初篩反應良好的培養物再接種其他生化試驗,誌賀氏菌的特性概述如下分離:H2S、尿素酶、葡萄糖、(產氣)運動、賴氨酸、脫羧酶、蔗糖、側金盞花醇、乳糖(2日)、KCN、丙二酸鹽、檸檬酸鹽、與水楊素皆為陰性;甲基紅為陽性。用抗血清鑒定其血清型或參照表二所列32個血清型的生物學特性進行試驗。其粘液酸鹽(mucate)和乙酸鹽(acetate)的反應是會有所幫助的。在這些反應中誌賀氏菌一般為陰性,而不產氣的大腸杆菌一般至少在此反應中的一項為陽性。
c.血清學性狀:
將犢牛肉浸汁瓊脂斜麵的24h培養物混懸於3mL0.85%生理鹽水中,使其濃度相當於 標準比濁管第5號,在潔淨的玻璃平皿上用蠟筆標記9個3x1cm的方塊.按照以下方案滴加混懸液,抗血清與生理鹽水。
方塊 混懸液 多價血清 生理鹽水
A A1 B C C1 C2 D A-D
用接種針攪勻每個方塊中的內容物,注意不要使方塊之間互相混亂。動搖平皿3-4min以促進其凝集作用。並按以下記取其凝集反應的程度:0=無凝集反應,1+=勉強可察覺的凝集反應,2+=呈50%清澈的凝集反應,3+=呈75%清澈的凝集反應,4+=有可見的絮片狀的凝集反應,混懸液完全清楚清澈透明。再以呈現明顯陽性(2+、3+、4+)的多價血清所屬的單價血清重新檢查其混懸液,如呈陰性反應,則將混懸液置蒸鍋中加熱30min以(yi)水(shui)解(jie)能(neng)起(qi)幹(gan)擾(rao)作(zuo)用(yong)的(de)莢(jia)膜(mo)抗(kang)原(yuan)。此(ci)時(shi)如(ru)與(yu)反(fan)應(ying)單(dan)價(jia)血(xue)清(qing)呈(cheng)陽(yang)性(xing),則(ze)再(zai)以(yi)多(duo)價(jia)血(xue)清(qing)檢(jian)查(zha)。由(you)於(yu)這(zhe)些(xie)係(xi)推(tui)測(ce)的(de)血(xue)清(qing)型(xing),故(gu)所(suo)有(you)可(ke)能(neng)與(yu)所(suo)用(yong)血(xue)清(qing)呈(cheng)陰(yin)性(xing)反(fan)應(ying)。
預防控製誌賀氏菌流行最好的措施是良好個人衛生和健康教育,水源和汙水的衛生處理能防止水源性誌賀氏菌的爆發。
對可疑的食品,包括在食用前用手處理過或經輕微加熱的食品、動物源性食品或消費者直接入口的產品,且其酸度範圍在pH5.5-6.5之間。一般來說,當食品中含有大腸菌群、大腸杆菌和沙門氏菌時,含有誌賀氏菌的可能性極大。
菌痢的防治除對急性菌痢、慢性菌痢和各種帶菌者進行“三早”措施(早期診斷、早期隔離和早期治療)以yi消xiao滅mie傳chuan染ran源yuan外wai,應ying采cai取qu以yi切qie斷duan傳chuan染ran途tu徑jing為wei主zhu的de綜zong合he性xing措cuo施shi。開kai展zhan愛ai國guo衛wei生sheng運yun動dong,抓zhua好hao食shi品pin加jia工gong飲yin食shi服fu務wu行xing業ye的de管guan理li,對dui從cong事shi食shi品pin加jia工gong人ren員yuan應ying定ding期qi作zuo帶dai菌jun者zhe檢jian查zha。
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