GB 4789.15-2016相比GB 4789.15-2010,最大的區別可能就在於對平皿的培養方式。2016版的國標在5.2中要求:瓊脂凝固後,正置平板,置28℃±1℃培養箱中培養,觀察並記錄培養至第5d的結果。
其實針對這一條,需要注意兩點:
第一,是需要對平板進行觀察的,不能直接培養至第5天計數,因為黴菌的特殊性,在培養過程中會產生大量孢子,導致整個平板蔓延。因此,在培養後的第2天開始,就要對平板進行觀察,並計數典型菌落,而這樣的觀察在之後每一天都應該進行,直至培養第5天。
第二,就是正置培養。這一點是16版國標與舊版最大的區別,10版之前的國標都是倒置培養的。而進行正置培養,很多朋友可能都會遇到平板被黴菌汙染的問題,這怎麼解決呢?
汙染原因與解決措施
一、培養箱環境汙染
henduoshiyanshipeiyangmeijuncaiyongdeshizhuanyongdemeijunpeiyangxiang,suoyipeiyangxiangkongjianlihuiyoudaliangdemeijunbaozi。erpingmindegaihedishiyouyidingfengxide,youqishibolipingminfengxihaishibijiaodade,zhengzhipeiyangzhong,baozihuixiangshangfeiyangtongguofengxiluodaopingbandepeiyangjishang,daozhiwuran。xixindishiyanyuankenengfaxian,wurandejunluodabufendoushizaipingminbianyuanshengchangde。yongyicixingsuliaopingminlaipeiyang,wurandegailvjiuhuixiaohenduo,yinweiyicixingsuliaopingmindegaihedizhijiandefengxixiangbizhixiashibijiaoxiaode。yincipeiyangxianghuanjingzhongdebaozikenenghuishizhuyaowuranyuan。
這樣一來,解決的方法就應該是對培養箱進行殺菌。可以用75%酒精和新潔爾滅兩種消毒劑對培養箱進行了全麵的消毒,消毒完最好不要馬上用,消毒完最好放個幾天在使用。
應(ying)該(gai)注(zhu)意(yi)的(de)是(shi),這(zhe)樣(yang)的(de)殺(sha)菌(jun)操(cao)作(zuo)也(ye)是(shi)需(xu)要(yao)經(jing)常(chang)進(jin)行(xing)的(de),因(yin)為(wei)黴(mei)菌(jun)的(de)孢(bao)子(zi)是(shi)十(shi)分(fen)難(nan)清(qing)除(chu)的(de),而(er)每(mei)次(ci)培(pei)養(yang)可(ke)能(neng)又(you)會(hui)引(yin)進(jin)新(xin)的(de)汙(wu)染(ran)源(yuan),可(ke)以(yi)考(kao)慮(lv)每(mei)周(zhou)進(jin)行(xing)兩(liang)次(ci),保(bao)證(zheng)培(pei)養(yang)環(huan)境(jing)無(wu)汙(wu)染(ran)源(yuan)。
二、平皿冷凝水汙染
正(zheng)置(zhi)培(pei)養(yang)過(guo)程(cheng)中(zhong),若(ruo)是(shi)平(ping)皿(min)的(de)上(shang)蓋(gai)有(you)泠(ling)凝(ning)水(shui),在(zai)培(pei)養(yang)過(guo)程(cheng)中(zhong)冷(leng)凝(ning)水(shui)滴(di)落(luo)到(dao)培(pei)養(yang)基(ji)上(shang),也(ye)極(ji)容(rong)易(yi)造(zao)成(cheng)菌(jun)落(luo)蔓(man)延(yan),平(ping)皿(min)汙(wu)染(ran)。因(yin)此(ci)在(zai)培(pei)養(yang)之(zhi)前(qian),一(yi)定(ding)要(yao)保(bao)證(zheng)平(ping)皿(min)幹(gan)燥(zao),可(ke)以(yi)把(ba)平(ping)皿(min)放(fang)在(zai)37℃的環境裏烘幹,烘幹之後再進行培養,就會避免這個原因造成的汙染。
三、操作環境和培養基的汙染
因yin為wei無wu菌jun室shi裏li可ke能neng也ye會hui因yin為wei滅mie菌jun效xiao果guo不bu理li想xiang造zao成cheng汙wu染ran。小xiao編bian之zhi前qian工gong作zuo的de實shi驗yan室shi,操cao作zuo台tai使shi用yong紫zi外wai線xian滅mie菌jun,經jing常chang就jiu會hui滅mie菌jun不bu徹che底di有you孢bao子zi汙wu染ran,尤you其qi是shi在zai進jin行xing過guo黴mei菌jun的de相xiang關guan檢jian測ce之zhi後hou。所suo以yi在zai進jin行xing過guo黴mei菌jun檢jian測ce之zhi後hou,適shi當dang的de增zeng長chang滅mie菌jun時shi間jian,可ke能neng會hui達da到dao比bi較jiao理li想xiang的de效xiao果guo。另ling外wai,為wei了le徹che底di解jie決jue無wu菌jun室shi空kong間jian孢bao子zi汙wu染ran的de問wen題ti,可ke以yi購gou買mai安an裝zhuang臭chou氧yang發fa生sheng器qi,通tong過guo紫zi外wai線xian+臭氧的雙重消毒模式,效果就十分理想了。
大家如果還是想驗證一下究竟是什麼原因造成的汙染,這裏提供一個簡單的驗證試驗:在正常檢測的環境中倒一組空白平皿,將這些平皿分為AB兩組,其中A組用封口膜將平皿封好,B組不封,均放置在培養箱中正置培養。若是A組B組均有黴菌生長,則需要考慮培養基汙染或者操作環境的汙染;若是A組不生長黴菌而B組生長,則需要考慮是培養箱內的環境汙染。通過這個小試驗,可以基本上確定汙染源,然後針對汙染源進行相應的處理。
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