大多數細胞都適合在pH值7.2-7.4範圍內生長,當然不同種類細胞對pH值的要求也不盡一致,同一種細胞在不同生長時期的最適pH值也有所不同。原代培養細胞對pH值要求較嚴,傳代培養細胞對pH值要求較寬。一般來講,細胞對偏酸環境的耐受性要強於偏堿環境。培養過程中,嚴格控製培養液的pH值,有利於細胞的生長。細胞生長越旺盛,代謝越活躍,pH值改變越迅速。代謝物的滯留使培養液變酸變黃,對細胞生長不利。因此,通常在培養液中均加入一定量的緩衝液,以保持pH值在一定範圍內的相對穩定。
平衡鹽溶液(Balanced Salt Solution,BSS)與細胞生長狀態下的pH值、滲透壓等環境狀態一致,具有維持滲透壓、控製酸堿平衡、供給細胞生存代謝所必需的能量和無機鹽成分等作用,可滿足體外實驗中,細胞生存並維持一定的代謝的基本需要。細胞在BSS中可生存幾個小時,且BSS配方簡單,成本低,因此成為配製各種組織細胞培養用液的基礎溶液,也是組織細胞體外短暫保存,分離、純化和洗滌等實驗操作的常用溶液。
磷酸鹽緩衝液(PBS) 是最常用的平衡鹽溶液(BSS)之一。由磷酸一氫鹽和磷酸二氫鹽的混合溶液組成,其中磷酸一氫鹽是呈堿性的,而磷酸二氫鹽是呈酸性的。當微生物分泌酸性物質時會與磷酸一氫鹽反應生成磷酸二氫鹽;當分泌堿性物質時則與磷酸二氫鹽反應生成磷酸一氫鹽。這樣就使整個體係維持在一個PH較穩定的範圍。由於磷酸緩衝液近中性,恰在生理性pH範圍緩衝力最強,且成本相對較低,成為生命科學領域應用最廣、最普及的無機鹽緩衝液,也是免疫學、細胞生物學和分子生物學實驗室必備的常用緩衝液之一。
0.85%生理鹽水 能neng保bao持chi細xi胞bao內nei衛wei的de滲shen透tou壓ya一yi致zhi,避bi免mian細xi菌jun的de細xi胞bao壁bi被bei破po壞huai而er影ying響xiang細xi菌jun的de生sheng長chang和he繁fan殖zhi。避bi免mian細xi胞bao破po裂lie,它ta可ke以yi使shi細xi胞bao在zai一yi個ge液ye體ti環huan境jing中zhong,維wei持chi正zheng常chang生sheng理li學xue平ping衡heng。避bi免mian操cao作zuo過guo程cheng中zhong微wei生sheng物wu失shi水shui或huo吸xi水shui過guo多duo,導dao致zhi死si亡wang。菌jun落luo總zong數shu要yao求qiu不bu太tai高gao,但dan是shi生sheng理li鹽yan水shui對dui於yu滲shen透tou壓ya的de維wei持chi還hai是shi有you一yi定ding作zuo用yong的de,特te別bie是shi對dui於yu那na些xie“半死半活”細菌的檢出很重要。但生理鹽水也不是在任何情況下都適用的,檢測鹽份較高的樣品時(如烤鰻、醬油等),不適合采用生理鹽水,這種情況下用蒸餾水更合適。磷酸鹽緩衝稀釋液是SN(出口食品行業檢驗標準)檢測菌落總數時推薦時,在GB中(zhong)倒(dao)沒(mei)明(ming)確(que)提(ti)出(chu)這(zhe)個(ge),而(er)是(shi)一(yi)般(ban)性(xing)推(tui)薦(jian)生(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)。由(you)於(yu)磷(lin)酸(suan)鹽(yan)緩(huan)衝(chong)稀(xi)釋(shi)液(ye)配(pei)製(zhi)較(jiao)為(wei)複(fu)雜(za),所(suo)以(yi)在(zai)正(zheng)常(chang)情(qing)況(kuang)下(xia)檢(jian)測(ce)一(yi)般(ban)樣(yang)品(pin)用(yong)生(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui),當(dang)樣(yang)品(pin)鹽(yan)份(fen)較(jiao)高(gao)時(shi)用(yong)蒸(zheng)餾(liu)水(shui)。
無菌水通常是滅菌後的蒸餾水。做黴菌和酵母檢驗的稀釋液,用的就是蒸餾水。GB 4789.15-1994使shi用yong過guo高gao鹽yan查zha氏shi培pei養yang基ji,樣yang品pin稀xi釋shi再zai使shi用yong生sheng理li鹽yan水shui,容rong易yi搞gao亂luan鹽yan濃nong度du。所suo以yi,標biao準zhun製zhi定ding者zhe叫jiao選xuan擇ze了le蒸zheng餾liu水shui。實shi際ji上shang,蒸zheng餾liu水shui無wu論lun對dui於yu單dan細xi胞bao的de原yuan核he生sheng物wu還hai是shi真zhen核he生sheng物wu,都dou是shi有you害hai的de。從congGB/T 4789.15-2003開kai始shi,刪shan除chu了le這zhe種zhong培pei養yang基ji。但dan是shi沒mei有you改gai變bian蒸zheng餾liu水shui。在zai具ju體ti工gong作zuo中zhong,還hai是shi盡jin量liang不bu要yao使shi用yong蒸zheng餾liu水shui來lai稀xi釋shi樣yang品pin為wei好hao。因yin為wei通tong常chang一yi份fen樣yang品pin常chang常chang需xu要yao同tong時shi檢jian驗yan細xi菌jun和he真zhen菌jun,不bu可ke能neng單dan獨du稱cheng量liang,之zhi後hou分fen別bie稀xi釋shi的de。
蛋白腖是動植物蛋白經酶水解後的月示、腖、肽(tai)及(ji)氨(an)基(ji)酸(suan)等(deng)複(fu)雜(za)的(de)混(hun)合(he)物(wu),吸(xi)濕(shi)性(xing)很(hen)強(qiang),易(yi)溶(rong)於(yu)水(shui),係(xi)兩(liang)性(xing)電(dian)解(jie)質(zhi),有(you)一(yi)定(ding)緩(huan)衝(chong)作(zuo)用(yong)。有(you)學(xue)者(zhe)自(zi)己(ji)做(zuo)實(shi)驗(yan)時(shi)候(hou)用(yong)蛋(dan)白(bai)腖(dong)水(shui)代(dai)替(ti)磷(lin)酸(suan)鹽(yan)或(huo)者(zhe)生(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)稀(xi)釋(shi),目(mu)的(de)是(shi)讓(rang)樣(yang)品(pin)中(zhong)菌(jun)種(zhong)在(zai)稀(xi)釋(shi)過(guo)程(cheng)中(zhong)保(bao)持(chi)活(huo)性(xing),免(mian)於(yu)死(si)亡(wang),但(dan)是(shi)稀(xi)釋(shi)時(shi)間(jian)一(yi)定(ding)要(yao)控(kong)製(zhi)在(zai)15分鍾之內。
手機版








