以矽膠為基質的反相色譜柱的pH範圍為2~9，流動相超過其pH範圍將會導致矽膠基質流失和鍵合相碳鏈斷裂

，使柱效下降，壽命變短。

二
、去除樣品和流動相彙總的固體顆粒
樣(yang)品(pin)和(he)流(liu)動(dong)相(xiang)中(zhong)含(han)有(you)固(gu)體(ti)顆(ke)粒(li)物(wu)質(zhi)會(hui)堵(du)塞(sai)色(se)譜(pu)柱(zhu)篩(shai)板(ban)
，不(bu)僅(jin)會(hui)引(yin)起(qi)柱(zhu)壓(ya)的(de)升(sheng)高(gao)，而(er)且(qie)也(ye)會(hui)引(yin)起(qi)柱(zhu)效(xiao)下(xia)降(jiang)。因(yin)此(ci)，建(jian)議(yi)使(shi)用(yong)超(chao)純(chun)水(shui)和(he)色(se)譜(pu)純(chun)試(shi)劑(ji)，在(zai)分(fen)析(xi)前(qian)對(dui)樣(yang)品(pin)進(jin)行(xing)針(zhen)筒(tong)過(guo)濾(lv)
，流(liu)動(dong)相(xiang)過(guo)0.45um濾膜。

三、使用保護柱或在線過濾器
保(bao)護(hu)柱(zhu)和(he)在(zai)線(xian)過(guo)濾(lv)器(qi)上(shang)都(dou)有(you)篩(shai)板(ban)，其(qi)孔(kong)徑(jing)與(yu)色(se)譜(pu)柱(zhu)篩(shai)板(ban)孔(kong)徑(jing)相(xiang)同(tong)，因(yin)此(ci)可(ke)以(yi)阻(zu)止(zhi)固(gu)體(ti)顆(ke)粒(li)物(wu)質(zhi)到(dao)達(da)色(se)譜(pu)柱(zhu)
，有(you)效(xiao)防(fang)止(zhi)色(se)譜(pu)柱(zhu)篩(shai)板(ban)的(de)堵(du)塞(sai)。由(you)於(yu)柱(zhu)壓(ya)升(sheng)高(gao)在(zai)分(fen)析(xi)故(gu)障(zhang)中(zhong)占(zhan)很(hen)大(da)比(bi)例(li)，因(yin)此(ci)除(chu)對(dui)樣(yang)品(pin)和(he)流(liu)動(dong)相(xiang)進(jin)行(xing)過(guo)濾(lv)外(wai)

，建(jian)議(yi)您(nin)在(zai)色(se)譜(pu)柱(zhu)進(jin)樣(yang)端(duan)加(jia)上(shang)保(bao)護(hu)柱(zhu)或(huo)在(zai)線(xian)過(guo)濾(lv)器(qi)。

四、正確使用緩衝鹽
緩衝鹽使用不當會使其在流動相（含有機溶劑）中析出，堵塞填料基質上的微孔和顆粒間的空隙，使填料板結
，柱壓上升；同時阻礙了基質上的鍵合的碳鏈自由舒展
，使用色譜柱的保留能力下降，柱效降低。

建議使用前要過濾，使用後要衝洗。具體方法如下：
1
、等度條件：使用緩衝鹽前和使用後需要過濾流動相1.0ml/min流速衝洗60min.
2

、梯度條件：用含有緩衝鹽的流動相跑梯度之前
，用與初始流動相組成相同的過濾流動相似1.0ml/min流速衝洗60min；分析完成後，再用該過濾流動以1.0ml/min衝洗色譜柱120min。含緩衝鹽流動相的梯度設定應盡量平緩，以避免梯度過程中緩衝鹽析出。

五、柱清洗方法：
1
、未使用緩衝鹽：每天分析完成後
，用純甲醇或純乙腈反向衝洗色譜柱60min。
2、使用過緩衝鹽：分析完成後
，先後用上述方法除去緩衝鹽，然後再用純甲醇或乙腈反向衝洗色譜柱60min。