首(shou)先(xian),就(jiu)是(shi)方(fang)法(fa)的(de)適(shi)用(yong)性(xing),不(bu)同(tong)的(de)實(shi)驗(yan)方(fang)法(fa),選(xuan)擇(ze)不(bu)同(tong)的(de)試(shi)劑(ji)與(yu)耗(hao)材(cai),這(zhe)是(shi)選(xuan)擇(ze)的(de)前(qian)提(ti),其(qi)次(ci),就(jiu)要(yao)考(kao)慮(lv)質(zhi)量(liang)和(he)價(jia)格(ge),我(wo)們(men)後(hou)說(shuo)質(zhi)量(liang)與(yu)價(jia)格(ge),不(bu)是(shi)說(shuo)他(ta)們(men)不(bu)重(zhong)要(yao),而(er)這(zhe)是(shi)一(yi)個(ge)先(xian)後(hou)的(de)順(shun)序(xu),三(san)者(zhe)同(tong)樣(yang)重(zhong)要(yao),少(shao)考(kao)慮(lv)了(le)哪(na)一(yi)樣(yang)都(dou)將(jiang)是(shi)不(bu)明(ming)智(zhi)的(de)選(xuan)擇(ze)。
化學試劑的選用
+
化學試劑是進行化學研究、成分分析的相對標準物質,是科技進步的重要條件,廣泛用於物質的合成、分離、定性和定量分析。在工廠、學校、醫院和研究所的日常工作中,都離不開化學試劑。
首先,我們要了解實驗的化學試劑的分類。
國標試劑分類介紹
試劑級(RG,紅標簽):作為試劑的標準化學品。
基準試劑(JZ,綠標簽):作為基準物質,標定標準溶液。
優級純(GR,綠標簽):主成分含量很高、純度很高,適用於精確分析和研究工作,有的可作為基準物質。
分析純(AR,紅標簽):主成分含量很高、純度較高,幹擾雜質很低,適用於工業分析及化學實驗。
化學純(CP,藍標簽):主成分含量高、純度較高,存在幹擾雜質,適用於化學實驗和合成製備。
實驗純(LR,黃標簽):主成分含量高,純度較差,雜質含量不做選擇,隻適用於一般化學實驗和合成製備。
教學試劑:可以滿足學生教學目的,不至於造成化學反應現象偏差的一類試劑。
指定級(ZD):該類試劑是按照用戶要求的質量控製指標,為特定用戶訂做的化學試劑。
高純試劑(EP):包括超純、特純、高純、光(guang)譜(pu)純(chun),配(pei)製(zhi)標(biao)準(zhun)溶(rong)液(ye)。此(ci)類(lei)試(shi)劑(ji)質(zhi)量(liang)注(zhu)重(zhong)的(de)是(shi)在(zai)特(te)定(ding)方(fang)法(fa)分(fen)析(xi)過(guo)程(cheng)中(zhong)可(ke)能(neng)引(yin)起(qi)分(fen)析(xi)結(jie)果(guo)偏(pian)差(cha),並(bing)對(dui)成(cheng)分(fen)分(fen)析(xi)或(huo)含(han)量(liang)分(fen)析(xi)產(chan)生(sheng)幹(gan)擾(rao)的(de)雜(za)質(zhi)含(han)量(liang),但(dan)對(dui)主(zhu)含(han)量(liang)不(bu)做(zuo)很(hen)高(gao)要(yao)求(qiu)。
色譜純(GC):氣相色譜分析專用。質量指標注重幹擾氣相色譜峰的雜質。主成分含量高。
色譜純(LC):液相色譜分析標準物質。質量指標注重幹擾液相色譜峰的雜質。主成分含量高。
指示劑(ID):配製指示溶液用。質量指標為變色範圍和變色敏感程度。可替代CP,也適用於有機合成用。
生化試劑(BR):配製生物化學檢驗試液和生化合成。質量指標注重生物活性雜質。可替代指示劑,可用於有機合成。
生物染色劑(BS):配製微生物標本染色液。質量指標注重生物活性雜質。可替代指示劑,可用於有機合成。
光譜純(SP):用於光譜分析。分別適用於分光光度計標準品、原子吸收光譜標準品、原子發射光譜標準品。
合成試劑:就是在標明成分主含量的前提下,嚴格給出該產品的有關各種物理常數的一類化學試劑。
其次,我們必須考慮試劑的具體用途。
化學試劑的選用應以分析要求為主,包括分析任務、分析方法、對dui結jie果guo準zhun確que等deng為wei依yi據ju,來lai選xuan用yong不bu同tong等deng級ji的de試shi劑ji。如ru痕hen量liang分fen析xi要yao選xuan用yong高gao純chun或huo優you級ji純chun試shi劑ji,以yi降jiang低di空kong白bai值zhi和he避bi免mian雜za質zhi幹gan擾rao。在zai以yi大da量liang酸suan堿jian進jin行xing樣yang品pin處chu理li時shi,其qi酸suan堿jian也ye應ying選xuan擇ze優you級ji化hua學xue純chun。同tong時shi,對dui所suo用yong的de純chun水shui的de製zhi取qu方fang法fa和he玻bo璃li儀yi器qi的de洗xi滌di方fang式shi也ye應ying有you特te殊shu要yao求qiu。作zuo仲zhong裁cai分fen析xi也ye常chang選xuan用yong優you級ji純chun、分析純試劑。一般車間控製分析,選用分析純、化學純試劑。某些製備實驗、冷卻浴或加熱的藥品,可選用工業品。
butongfenxifangfaduishijiyoubutongyaoqiu。ruluohediding,zuihaoyongfenxichunshijihequlizishui,fouzeyinshijihoushuizhongdezazhijinshulizifengbizhishiji,shididingzhongdiannanyiguancha。
另一方麵,GC-MS,HPLC,UPLC和 LC-MS等deng應ying用yong,需xu要yao特te定ding的de或huo高gao度du純chun化hua的de溶rong劑ji級ji別bie,以yi滿man足zu痕hen量liang分fen析xi的de嚴yan格ge性xing能neng要yao求qiu。這zhe樣yang也ye保bao證zheng用yong戶hu得de到dao最zui高gao的de儀yi器qi靈ling敏min度du,同tong時shi避bi免mian因yin使shi用yong低di質zhi量liang溶rong劑ji導dao致zhi儀yi器qi中zhong有you殘can留liu引yin起qi的de停ting機ji清qing洗xi。使shi用yong高gao質zhi量liang溶rong劑ji的de好hao處chu還hai包bao括kuo減jian少shao重zhong複fu工gong作zuo、提高精密度和準確度、提高儀器性能、增zeng加jia重zhong現xian性xing以yi及ji減jian少shao儀yi器qi配pei件jian和he提ti高gao分fen析xi效xiao率lv等deng。盡jin管guan這zhe些xie高gao純chun度du溶rong劑ji的de成cheng本ben會hui比bi低di級ji別bie的de產chan品pin稍shao高gao,但dan這zhe些xie成cheng本ben可ke以yi從cong上shang述shu好hao處chu中zhong得de到dao抵di消xiao。
以下是幾種常見的實驗室化學試劑用途:
1、HPLC級高純液相色譜溶劑
低紫外吸收 非揮發性物質、遊離酸、遊離堿和水份含量低 可用於熒光檢測
極低的農殘背景值(≤5 pg/ml ),不揮發性組分極少 GC控製(ECD-PND檢測)質量可靠,穩定性高 適用於分析有機氯農藥、有機磷農藥、多氯聯苯 (PCBs)及其他用GC/ECD和GC/PND檢測的化合物 符合各種殺蟲劑殘留量分析的要求和對低揮發性雜質的要求
低紫外吸收、低紅外吸收 雜質含量低 適用於UV、IR光譜分析
最後,綜合考量質量與價格。
雖(sui)然(ran)化(hua)學(xue)試(shi)劑(ji)必(bi)須(xu)按(an)照(zhao)國(guo)家(jia)標(biao)準(zhun)進(jin)行(xing)檢(jian)驗(yan)合(he)格(ge)後(hou)才(cai)能(neng)出(chu)廠(chang)銷(xiao)售(shou),但(dan)不(bu)同(tong)廠(chang)家(jia)原(yuan)料(liao)和(he)工(gong)業(ye)生(sheng)產(chan)的(de)試(shi)劑(ji)在(zai)性(xing)能(neng)上(shang)有(you)時(shi)有(you)顯(xian)著(zhu)差(cha)異(yi)。甚(shen)至(zhi)同(tong)一(yi)廠(chang)家(jia),不(bu)同(tong)的(de)同(tong)一(yi)類(lei)試(shi)劑(ji),其(qi)性(xing)質(zhi)也(ye)很(hen)難(nan)完(wan)全(quan)一(yi)致(zhi),因(yin)此(ci),在(zai)某(mou)些(xie)要(yao)求(qiu)較(jiao)高(gao)的(de)分(fen)析(xi)中(zhong),不(bu)僅(jin)要(yao)考(kao)慮(lv)試(shi)劑(ji)的(de)等(deng)級(ji),還(hai)應(ying)注(zhu)意(yi)生(sheng)產(chan)廠(chang)家(jia)、生產批號等。
說完了實驗室試劑的選取辦法,接下來咱們再聊一聊如何選取實驗室耗材,因為實驗室耗材眾多,隻選取其中幾個常見的實驗室耗材。
固相萃取柱的選擇
+
關於萃取柱使用時的常見問題,一般有回收率低、重現性差、淨化效果不佳、流速過快過慢這幾大方麵,下麵我們一一說明:
原因分析:
(1)目標物在填料上保留不足
(2)目標洗脫不完全
(3)其他原因
2、重現性差的原因及對策
3、淨化效果不佳的對策
所以,選擇合適的萃取柱對檢測結果的準確性有著至關重要的作用。一般從兩方麵進行考量:吸xi附fu劑ji和he柱zhu規gui格ge。適shi宜yi的de吸xi附fu填tian料liao可ke以yi讓rang幹gan擾rao物wu質zhi與yu目mu標biao組zu分fen得de到dao良liang好hao的de分fen離li,並bing滿man足zu回hui收shou要yao求qiu。而er吸xi附fu劑ji所suo能neng吸xi附fu的de化hua合he物wu質zhi量liang是shi有you限xian的de,一yi旦dan樣yang品pin量liang過guo大da,則ze會hui出chu現xian“超載”,使得目標物直接“穿透”萃取柱不被保留。
根據基質性質選擇
選(xuan)擇(ze)出(chu)適(shi)宜(yi)的(de)吸(xi)附(fu)劑(ji)後(hou),還(hai)需(xu)要(yao)根(gen)據(ju)檢(jian)定(ding)所(suo)需(xu)的(de)樣(yang)品(pin)量(liang)選(xuan)擇(ze)合(he)適(shi)的(de)柱(zhu)規(gui)格(ge)。由(you)於(yu)萃(cui)取(qu)柱(zhu)的(de)吸(xi)附(fu)劑(ji)能(neng)吸(xi)附(fu)的(de)化(hua)合(he)物(wu)質(zhi)量(liang)是(shi)有(you)限(xian)的(de),一(yi)旦(dan)超(chao)過(guo)了(le)這(zhe)個(ge)數(shu)值(zhi),目(mu)標(biao)物(wu)就(jiu)不(bu)能(neng)被(bei)有(you)效(xiao)保(bao)留(liu),使(shi)得(de)洗(xi)脫(tuo)效(xiao)果(guo)大(da)打(da)折(zhe)扣(kou)。因(yin)此(ci),根(gen)據(ju)樣(yang)品(pin)中(zhong)的(de)組(zu)份(fen)量(liang)選(xuan)擇(ze)合(he)適(shi)的(de)柱(zhu)規(gui)格(ge),是(shi)很(hen)有(you)必(bi)要(yao)的(de)。
以下給出了萃取柱的上樣容量及洗脫參數,以供參考:
液相色譜柱的選擇
+
選擇色譜柱時應考慮不同色譜柱參數的影響,以下內容對色譜柱的參數進行分析。
HPLC色譜分離模式的選擇
在建立化合物的HPLC方法時,可以首先根據化合物的分子量大小,極性大小及PKa,選擇合適的分離模式,在適當的分離模式下去再去優化同類的色譜柱及流動相。化合物分子量<2000Da時,按下圖來選擇。
zaishijigongzuozhongsuoshejidehuahewujuedabufendoukeyishiyongfanxiangsepujinxingfenli,xiamianxianfenxifanxiangjianhexiangsepuzhuxingnengdeyingxiangyinsu,zhiyoulejieyingxiangsepuzhuxingnengdeyinsu,cainengjiehemubiaofenxiwudexingzhi、需要達到的分析效果及實驗室條件來選擇適合的色譜柱。
影響色譜柱性能的物理參數
1、矽膠純度
矽膠純度和殘留金屬離子濃度,矽膠的雜質會影響化合物的峰形,矽膠表麵的金屬含量高會影響堿性化合物的峰形,易發生拖尾。
2、色譜柱尺寸
填料床的長度和內徑,增加色譜柱長度,可以在一定程度上提高柱效,但也會升高壓力和導致峰展寬;寬(kuan)柱(zhu)徑(jing),提(ti)高(gao)載(zai)樣(yang)量(liang),但(dan)也(ye)會(hui)增(zeng)加(jia)橫(heng)向(xiang)擴(kuo)散(san),同(tong)樣(yang)會(hui)導(dao)致(zhi)峰(feng)展(zhan)寬(kuan)。窄(zhai)柱(zhu)徑(jing)可(ke)以(yi)節(jie)約(yue)溶(rong)劑(ji),可(ke)減(jian)少(shao)橫(heng)向(xiang)擴(kuo)散(san),但(dan)壓(ya)力(li)較(jiao)大(da),對(dui)係(xi)統(tong)要(yao)求(qiu)較(jiao)高(gao)。
3、顆粒形狀及粒徑
球形顆粒柱效高、重現性好、柱床結構均勻,不規則形柱床結構不均勻、流動相線速度不均勻,容易譜帶展寬;平均顆粒直徑,粒徑越小,柱效越高,柱壓也越高。粒徑分布越廣則柱效越低,壓力越大。
4、顆粒表麵積
顆粒外表麵和內部孔表麵的總和,以m2/g表biao示shi,相xiang對dui而er言yan高gao表biao麵mian積ji對dui樣yang品pin具ju有you較jiao強qiang的de保bao留liu能neng力li,更geng大da的de柱zhu容rong量liang和he分fen離li度du。而er低di表biao麵mian積ji能neng更geng快kuai達da到dao平ping衡heng狀zhuang態tai,更geng適shi合he梯ti度du洗xi脫tuo程cheng序xu。
5、孔徑
顆粒的孔或腔的平均尺寸,範圍是80~3000,大da孔kong徑jing的de填tian料liao顆ke粒li可ke以yi延yan長chang大da分fen子zi溶rong質zhi在zai填tian料liao表biao麵mian的de滯zhi留liu時shi間jian,改gai善shan分fen離li,所suo以yi大da孔kong徑jing填tian料liao適shi合he分fen離li大da分fen子zi化hua合he物wu或huo者zhe水shui動dong力li體ti積ji較jiao大da的de分fen子zi。
影響色譜柱性能的化學因素
1、鍵合類型及鍵合相
鍵合相分子與基體單點相連為單體鍵合,這種鍵合方式可以提高傳質速率,縮短柱平衡時間;聚ju合he體ti鍵jian合he為wei鍵jian合he相xiang分fen子zi與yu基ji體ti多duo點dian相xiang連lian,這zhe種zhong鍵jian合he方fang式shi可ke以yi增zeng加jia色se譜pu柱zhu穩wen定ding性xing,增zeng加jia載zai樣yang量liang。而er鍵jian合he相xiang不bu同tong會hui直zhi接jie影ying響xiang化hua合he物wu的de保bao留liu行xing為wei。
2、碳覆蓋率
高碳覆蓋率可以提高分辨率和重現性,但分析時間長。
3、封端
矽gui膠jiao鍵jian合he相xiang填tian料liao中zhong有you部bu分fen未wei封feng端duan的de殘can留liu矽gui羥qiang基ji,如ru圖tu封feng端duan可ke以yi減jian輕qing待dai測ce組zu分fen與yu矽gui膠jiao表biao麵mian殘can留liu的de酸suan性xing矽gui羥qiang基ji反fan應ying,改gai善shan保bao留liu和he峰feng行xing,這zhe對dui於yu堿jian性xing化hua合he物wu尤you其qi重zhong要yao。而er不bu同tong的de封feng端duan技ji術shu也ye會hui直zhi接jie影ying響xiang色se譜pu柱zhu的de效xiao能neng。
反相鍵合相色譜柱的選擇
1、重現國標文獻中方法
選擇色譜柱粒徑、比表麵積、基質表麵特性、鍵合類型等相似的色譜柱,或者利用USP網站及一些色譜柱選擇軟件,如“column selector for acd/chemsketch”來查詢相似係數,選擇相似係數高的色譜柱。
2、建立新化合物分離分析方法的色譜柱選擇
根據目標分析物的分子量大小、溶解性、Pka值,以及分離要求、儀器、成本等各方麵來選擇色譜柱。
(1) 根據分離目的選色譜柱,對映體分離常選擇手性柱,離子化色譜可選擇離子柱,蛋白多肽、DNA可選擇凝膠柱或離子交換柱,一般的小分子化合物可選擇普通反相柱,如C18、C8柱、苯基柱等等。
(2) 根據實際需求和設備選擇填料粒徑,普通HPLC一般選擇5μm或3.5μm粒徑的色譜柱,而UPLC則常使用1.7μm—3.5μm的色譜柱。
(3) 比表麵積,高比表麵積有助於分離,低比表麵積更適合梯度洗脫程序。
(4) 孔徑,大分子化合物適合大孔徑,在保證比表麵積的前提下,選擇孔徑大的。
(5) 鍵合相的選擇
-
直鏈烷基鍵合相C18和C8適合中等極性化合物,對於極性化合物可以選用矽羥基未封端或特殊封端的C18柱;或者鍵入極性基團的C18柱;
下表是常見的化學鍵合相及其運用範圍:
xianzaishangpinhuadeyexiangsepuzhulinlangmanmu,genjusepuzhudecanshukeyigeiwomentigongyigechubudexuanze,danyouyugegeyiqichangshangdetianliaojishuhejianhejishudouyouchayi,jishishiC18柱,同一品牌不同係列都有不同的功能,有能耐受低PH值的、耐受高溫、耐受純水相和適合堿性分離等等。所以在使用色譜柱之前需要好好閱讀產品說明手冊,才能找到滿意的分離條件。
樣品瓶和隔墊的選擇
+
樣品瓶質量的重要性
ruguobuyangekongzhigongcha,zidongjinyangqiyangpinpingdebiaoshichicunjibizhongkenengyousuobutong,zhehuiyingxiangyangpinpingzhongdeyangpinrongji,longqiduishaoliangyangpinlaishuofeichangzhongyao,womenyangedegongchakongzhiguanchuanyuzhenggezhizaoguochengzhong,congzuichushejidaozuihoudeguangdiansaomiaojianzhaguocheng,quebaomeiyigeyangpinpinghepinggaiguigedezhunquexing。
隔墊質量的重要性
防了防止汙染,避免針頭和儀器損壞,正確的隔墊選擇是至關重要的,在選擇時應該注意的問題:
1、溫度控製
在較高溫度下隔墊會發生降解而導致樣品汙染,橡膠隔墊僅在90℃以下穩定,因此不適用於高溫應用。通常以聚四氟乙烯和優質矽橡膠或者超純矽膠作為材料的隔墊是用於各種溫度的最佳選擇。
2、碎屑
當(dang)針(zhen)頭(tou)直(zhi)徑(jing)相(xiang)對(dui)隔(ge)墊(dian)太(tai)大(da)或(huo)隔(ge)墊(dian)材(cai)料(liao)不(bu)能(neng)承(cheng)受(shou)多(duo)次(ci)進(jin)樣(yang)時(shi)就(jiu)會(hui)產(chan)生(sheng)碎(sui)屑(xie),此(ci)時(shi),隔(ge)墊(dian)材(cai)料(liao)會(hui)脫(tuo)落(luo)進(jin)入(ru)樣(yang)品(pin)瓶(ping)並(bing)汙(wu)染(ran)樣(yang)品(pin)。以(yi)下(xia)是(shi)如(ru)何(he)防(fang)止(zhi)碎(sui)屑(xie)的(de)方(fang)法(fa):
a. 選擇一種PTFE內襯的隔墊以防止隔墊材料進入樣品中;
b. 確保針頭未損壞,考慮使用側孔針頭替代錐形針頭;
c. 使用預穿孔隔墊幾乎可以完全消除碎屑。
d. 對於高敏感性樣品,推薦使用聚四氟乙烯(PTFE)隔墊,因為PTFE層可作為一種耐化學腐蝕的屏障。
3、再密封性
再密封性是選擇隔墊需考慮的一個重要因素。PTFE/紅色橡膠隔墊不推薦用於多次進樣或需要儲存用於以後分析的樣品。當進樣之間需要較長時間或添加任何類型的標樣時,PTFE/矽橡膠/PTFE總是最佳選擇。
4、易刺穿性
通常,矽橡膠隔墊比紅色橡膠和丁基橡膠隔墊更易穿刺。預穿孔隔墊是最佳選擇,最易穿刺並能減少碎屑的可能。
5、瓶蓋和隔墊兼容性
6、隔墊與樣品和溶劑的兼容性
一次性針式過濾器
+
選擇不同種類的針式過濾器對流動相及樣品進行過濾達到澄清除菌、去除雜質顆粒的作用。對保護色譜係統及色譜柱具有重要意義。
針式濾器的選擇主要可以從以下三個方麵進行考量:外殼、規格,以及濾膜。
1、外殼
一般外殼為高壓聚丙烯(PP),耐高溫,不泄漏,不需換膜和清洗,省去繁雜費時的準備工作,是過濾HPLC、GC小量樣品首選產品。
2、規格
直徑:常用Φ13mm、Φ25mm、Φ33mm三種。即樣品量2-10ml選用Φ13μm,樣品量10-100ml選用Φ25μm,大於100ml選用Φ33μm。
孔徑:0.22μm、0.45μm
3、濾膜的特性及應用
(1)水係膜(混合纖維素酯CN-CA)
特性:孔徑均勻、孔隙率高、無介質脫落、質地薄、阻力小、濾速快、成本低,但不耐有機溶液及強酸強堿。
應用:飲用水、地表水、井水等除菌過濾溶液中微粒及油類不溶物的分析、水質汙染指數測定、氣體、油類、飲料、酒等微粒和細菌過濾。為前處理過濾中最為廣泛使用的濾膜之一。
(2)尼龍膜(聚酰胺NYLON)
特性:耐溫性能好、可耐121°C、飽和蒸汽高壓消毒30分鍾、最高工作溫度60°C,化學穩定性好,能耐稀酸稀堿等多種有機無機化合物、溶劑。
應用:適用於電子、微電子、半導體工業水過濾組織培養基、藥液、飲料、高純化學品、水及有機溶液流動相的過濾。
(3)PVDF膜(聚偏氟乙烯)
特性:膜機械強度高、抗張強度好、具有良好的耐熱性及化學穩定性、蛋白吸附極低、具較強的疏水性。
應用:氣體及蒸汽過濾、高溫液體過濾、組織培養基、添加劑等除菌過濾、溶劑和化學原料淨化過濾。
(4)PTFE(聚四氟乙烯)
特性:具有廣泛的化學兼容性、耐溫性好、抗強酸強堿、化學腐蝕性較強的溶劑及氧化劑。
應用:化工、醫藥、環保、電子、食品、能源等領域,幾乎能過濾所有的有機溶液。
手機版




