1、標準品

　　標(biao)準(zhun)品(pin)是(shi)放(fang)射(she)免(mian)疫(yi)分(fen)析(xi)法(fa)定(ding)量(liang)的(de)依(yi)據(ju)，由(you)於(yu)以(yi)標(biao)準(zhun)品(pin)的(de)量(liang)用(yong)來(lai)表(biao)示(shi)被(bei)涮(shuan)物(wu)質(zhi)的(de)量(liang)，故(gu)標(biao)準(zhun)品(pin)與(yu)被(bei)測(ce)物(wu)質(zhi)應(ying)當(dang)化(hua)學(xue)結(jie)構(gou)一(yi)致(zhi)並(bing)具(ju)有(you)相(xiang)同(tong)免(mian)疫(yi)活(huo)性(xing)。標(biao)準(zhun)品(pin)作(zuo)為(wei)定(ding)量(liang)的(de)基(ji)準(zhun)。應(ying)要(yao)求(qiu)高(gao)度(du)純(chun)化(hua)。標(biao)準(zhun)品(pin)除(chu)含(han)量(liang)應(ying)具(ju)有(you)準(zhun)確(que)性(xing)外(wai)
，還(hai)應(ying)具(ju)備(bei)穩(wen)定(ding)性(xing)
，即(ji)在(zai)合(he)理(li)的(de)貯(zhu)存(cun)條(tiao)件(jian)下(xia)保(bao)持(chi)原(yuan)來(lai)的(de)特(te)性(xing)。

　　按實驗要求，將標準品用緩衝液配成含不同劑量的標準溶液
，用於製作標準曲線。

2
、標記物

　　標記抗原應具備：①比放射性高，以保證方法的靈敏度
；②免疫活性好；③所用的核素的半衰期盡可能長，標記一次可較長時間使用，這對來之不易的抗原尤其重要
；④標記簡便
、易防護。

　　要準確測量B與F的放射性，必須有足夠的放射性強度。所選用的標記抗原的量，在使用¹²⁵I時達5000～15000cpm。

3
、抗體

　　應選擇特異性高
、親和力強及滴度好的抗體
，用於放射免疫測定。

　　根據稀釋曲線，選擇適當的稀釋度，一般以結合率為50%作為抗血清的稀釋度。

4、B與F分離劑

　　以2%加膜活性炭溶液為例，2%加膜活性炭溶液的配製：

　　活性炭2g（杭州木材廠生產，森工牌732型）

　　右旋糖酐T₂₀0.2g

　　加0.1mol/L PB 至100ml

　　電磁攪拌1h

，然後置於變通冰箱冰箱待用。

5、緩衝液

　　放射免疫分析技術所用的緩衝液有多種
，要通過實驗選用抗體和抗原結合最高的緩衝液。

　　目前最常用的緩衝液有下列幾種：①磷酸鹽緩衝液；②醋酸鹽緩衝液；③巴比妥緩衝液；④Tris –HCl緩衝液；⑤硼酸緩衝淮。其中以磷酸鹽緩衝液應用最多。

　　在緩衝液中，除必須有弱酸及弱酸的鹽成分外，還應根據不同檢測項目加入下列物質：①保護蛋白：常用的有牛血清白蛋白或白明膠，濃度為0.1%～0.2%
，用以降低試管對抗原的非特異性吸附。②防腐劑：多采用0.1%疊氮鈉、0.01%柳硫汞、溶菌酶或抗菌素。③酶抑製劑：如測定心鈉素等肽類激素時，要加入適量的抑肽酶，用以抑製血漿內源性水解酶對待測物的降解；又如測定cAMP、cGMP時

，需加入EDTA·2Na
，抑製磷酸二酯酶的活性。④阻斷劑：在測定甲狀腺激素或測定某些甾體激素時，必須加阻斷劑，使和蛋白質相結合的激素，變為遊離型。常用的阻斷劑有8—苯胺—1—萘磺酸、柳硫汞、水楊酸鈉、三氯醋酸鈉等。⑤載體蛋白：采用二抗作B與F分離劑時，要向反應液中加入適量與第一抗體同種動物的正常血清。在測定不含有血漿蛋白的樣品時，用PEG沉澱劑分離B、F
，必須加適量γ球蛋白或正常人混合血清。

　　在神經肽的RIA時，常用PELH緩衝液，（按1000ml,pH7.6）：

　　0．1mol/l PB　　　　　　　　980.0ml

　　0.3mol/L EDTA·2Na　　　　　10.0ml

　　0.2%洗必泰溶液　　　　　　　10.0ml

　　溶菌酶　　　　　　　　　　　1.0g