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色(se)譜(pu)柱(zhu)的(de)柱(zhu)效(xiao)能(neng)是(shi)評(ping)價(jia)色(se)譜(pu)性(xing)能(neng)的(de)一(yi)項(xiang)重(zhong)要(yao)指(zhi)標(biao)，混(hun)合(he)物(wu)能(neng)否(fou)在(zai)色(se)譜(pu)柱(zhu)中(zhong)得(de)到(dao)分(fen)離(li)，除(chu)取(qu)決(jue)於(yu)選(xuan)擇(ze)合(he)適(shi)的(de)固(gu)定(ding)相(xiang)外(wai)，還(hai)與(yu)色(se)譜(pu)操(cao)作(zuo)條(tiao)件(jian)及(ji)色譜柱的裝填狀況等因素有關。那麼，今天一起來看看液相色譜、氣相色譜柱的柱效是如何提高的？
在zai一yi定ding的de色se譜pu操cao作zuo條tiao件jian下xia，色se譜pu柱zhu的de柱zhu效xiao可ke用yong理li論lun塔ta板ban數shu或huo理li論lun塔ta板ban高gao度du來lai衡heng量liang。一yi般ban說shuo來lai塔ta板ban數shu愈yu多duo，或huo塔ta板ban高gao度du愈yu小xiao，色se譜pu柱zhu的de分fen離li效xiao能neng愈yu好hao。我wo們men來lai通tong過guo實shi驗yan告gao訴su大da家jia柱zhu效xiao是shi如ru何he進jin行xing評ping價jia的de。
如何對柱效進行評價？
1、實驗儀器與試劑
儀器：高效液相色譜儀（帶自動進樣器，或配置微量進樣器）、分析天平。
試劑：苯、萘、聯苯（均為分析純）、甲醇（色譜純）、純淨水。
2、實驗步驟
色譜條件：色譜柱：C18，4.6×150mm，5μm；流動相：甲醇-水（80：20，v/v）；
檢測波長：254nm；流速：1mL・min-1；柱溫：30℃；進樣量：10μL。
3、操作步驟
（1）分別精密配製含苯、萘、聯苯濃度均為約1mg・mL-1的3份對照品溶液各10mL。
（2）分別精密吸取上述對照品溶液各2mL置於10mL容量瓶中，加流動相稀釋，並定容至刻度，搖勻，得到含苯、萘、聯苯的混合對照品溶液。
（3）按照上述色譜條件操作，進樣，記錄色譜圖。
計算各色譜峰的理論塔板數及各峰間分離度。
如何提高HPLC柱效？
要提高液相色譜的效率可從以下幾方麵入手。以下介紹了幾種國際上流行的測量和計算柱效值的方法。
1、提高液相色譜柱柱效的方法
（1）降低移動相的流速，但會使分析時間延長。
（2）減少固定相的量，但色譜柱中樣品的負載量也隨之減小。
（3）減小固定相的顆粒度，但不能過分，過分後色譜柱的滲透率也會減小。
（4）選用低粘度的移動相，以利於快速傳質，但卻不利於多組份分析。
（5）適當提高柱溫，可降低移動相的粘度，但柱效和分離度也隨之降低。
（6）盡量減小停滯移動相的體積，但卻加快了移動相的流速。
congyishangjieshaokekanchu，zaisepufenxiguochengzhong，gezhongyinsushihuxianglianxihezhiyuede。zhiyoutongguoduizhuxiaozhidegenzongcesuan，duizijifenxifangfabuduandeyanjiuheshijian，cainengzhaodaozuijiadegongzuotiaojian。
2、對柱效值進行跟蹤測算應注意的問題
我wo們men也ye應ying記ji住zhu柱zhu效xiao值zhi並bing不bu足zu以yi預yu測ce在zai所suo有you條tiao件jian下xia的de柱zhu性xing能neng，對dui大da多duo數shu色se譜pu工gong作zuo者zhe來lai說shuo，柱zhu性xing能neng指zhi的de是shi色se譜pu柱zhu用yong於yu特te定ding分fen離li的de能neng力li，而er僅jin僅jin有you高gao柱zhu效xiao並bing不bu能neng保bao證zheng這zhe種zhong分fen離li能neng力li。
不管用什麼特定的測試方法，都會有幾個參數影響柱效的測定。這些參數包括：洗脫液的成分和粘度及其線流速，測定塔板數所用的溶質、溫度、柱長、填料裝填方式、顆粒度，還有所選用的測量和計算方法。而測量和計算方法對柱效值的確定起著極大的作用。
3、幾種測量和計算柱效值的方法
因為色譜峰是假定樣品濃度在移動相和固定相中呈正態分布而得到的樣品譜帶分布,故常常把色譜峰型看作正態曲線來計算理論塔板數。因此計算柱效（以理論塔板數n為單位）的公式習慣上定義為：
式中tR為色譜峰的保留時間;σ2是以時間為單位測量色譜峰的偏差;a是和峰高（從測峰寬的基線量起）有關的常數,ωb是峰寬,表示由色譜峰頂點與色譜峰兩側拐點處做切線與峰底基線相交兩點間的距離。
4、結論
假jia如ru一yi個ge色se譜pu峰feng真zhen是shi正zheng態tai峰feng型xing，那na麼me每mei種zhong計ji算suan方fang法fa都dou會hui得de到dao同tong樣yang的de結jie果guo。然ran而er即ji使shi一yi些xie比bi較jiao理li想xiang的de儀yi器qi和he傾qing向xiang於yu得de到dao對dui稱cheng峰feng型xing的de溶rong質zhi，由you於yu柱zhu內nei的de槽cao或huo空kong隙xi，也ye會hui出chu現xian非fei正zheng態tai峰feng型xing。所suo以yi不bu同tong的de計ji算suan方fang法fa將jiang會hui得de到dao相xiang差cha較jiao大da的den值。通常偏離正態模型的峰型表示為“前延”或“拖尾”。對於這些峰型，越在峰的高處測量，計算的理論塔板數值就越大（準確性越低）。
在許多情況下，色譜工作者需要能反映整個峰型（包括拖尾）的柱效值,同tong時shi為wei了le保bao證zheng定ding量liang的de重zhong複fu性xing，也ye需xu要yao色se譜pu峰feng很hen好hao的de對dui稱cheng性xing。這zhe時shi對dui色se譜pu峰feng非fei對dui稱cheng性xing最zui敏min感gan的de計ji算suan方fang法fa最zui適shi合he。如ru果guo目mu的de僅jin僅jin是shi要yao監jian測ce色se譜pu柱zhu從cong第di一yi次ci使shi用yong到dao使shi用yong壽shou命ming結jie束shu這zhe一yi過guo程cheng中zhong的de柱zhu效xiao，那na麼me以yi上shang任ren何he一yi種zhong方fang法fa都dou可ke以yi,應選擇最簡便的方法。
如何提高氣相色譜柱柱效？
在實際工作中，我們通過對載氣流速、進樣技術、氣化室溫度、色譜柱、柱溫、檢測器溫度這六個方麵的選擇，有效地提高了柱效率，使分析出的色譜峰峰形正常，無峰形擴張、拖尾、峰漏檢等不良現象出現，分離度高，從而提高了分析結果的準確性。
所為柱效就是在較短的時間內，用較短的柱子達到滿意的分析結果。為了提高色譜柱的柱效率，減少色譜峰擴張、拖尾及峰漏檢等現象，在實際工作中，我們從以下六個方麵入手，對柱操作條件的選擇進行了探討。
1、載氣流速的選擇
氣相色譜最常用的載氣是：氫氣、氮氣、氬氣、氦氣。
由速率理論可知，載氣流速慢有利於傳質，有利於組分的分離，但分析時間會加長；如ru果guo載zai氣qi流liu速su快kuai有you利li於yu加jia快kuai分fen析xi速su度du，減jian少shao分fen了le擴kuo散san，但dan分fen離li度du降jiang低di。有you時shi為wei了le縮suo短duan分fen析xi時shi間jian，加jia大da流liu量liang，但dan此ci時shi分fen離li效xiao果guo並bing不bu好hao。可ke見jian載zai氣qi流liu速su的de快kuai慢man都dou會hui降jiang低di柱zhu效xiao。經jing過guo長chang時shi間jian的de實shi驗yan，發fa現xian對dui於yu一yi般ban色se譜pu儀yi而er言yan，載zai氣qi流liu量liang為wei20-100ml/min。
目前我們分析液化氣用的是熱導檢測器，載氣用的是氫氣，其流量控製是30 ml/min。分析戊烷發泡劑用的是氫火焰離子化檢測器，載氣用的是氮氣、燃燒氣氫氣和氧氣，這三種氣體的體積比是氮氣：氫氣：氧氣為1：1：10，分析效果都是較好的。
2、進樣技術的選擇
在氣相色譜分析中，一般采用注射器或六通閥門進樣。在考慮進樣技術的時候，以注射器進樣為主來研究。
進樣量：如果在進樣過程中進樣量大會導致：分離度小；保留值變化難於定性；峰高和峰麵積與進樣量不成線性關係，不能定量。進樣量與氣化溫度、柱容量和儀器的線性響應範圍等因素有關。進樣量應控製在瞬間氣化，達到規定分離要求和線性響應的允許範圍內。
填充柱衝洗法的瞬間進樣量：液體樣品或固體樣品溶液一般為0.01～10μl，氣體樣品一般為0.11～10ml,在定量分析中,應注意進樣量讀數準確。
注射器裏空氣的排除：用yong微wei量liang注zhu射she器qi抽chou取qu液ye體ti樣yang品pin，隻zhi要yao重zhong複fu地di把ba液ye體ti抽chou入ru注zhu射she器qi又you迅xun速su把ba其qi排pai回hui樣yang品pin瓶ping，就jiu可ke以yi將jiang空kong氣qi排pai除chu。還hai有you一yi種zhong更geng好hao的de方fang法fa，那na就jiu是shi用yong計ji劃hua注zhu射she量liang的de約yue2倍的樣品置換注射器3～5次ci，每mei次ci取qu到dao樣yang品pin後hou，垂chui直zhi拿na起qi注zhu射she器qi，針zhen尖jian朝chao上shang，留liu在zai注zhu射she器qi裏li的de空kong氣qi都dou應ying當dang跑pao到dao針zhen管guan頂ding部bu，推tui進jin注zhu射she器qi塞sai子zi，空kong氣qi就jiu會hui全quan部bu被bei排pai掉diao。
保證進樣量的準確：用經置換過的注射器取約計劃進樣量2beizuoyoudeyangpin，chuizhinaqizhusheqi，zhenjianchaoshang，rangzhenchuanguoyicengshabu，zheyangkeyongshabuxishoucongzhenjianpaichudeyeti。tuijinzhusheqisaizi，zhidaoduchusuoxuyaodeshuzhi。yongshabucaganzhenjian。zhicizhunquedeyetitijiyijingcede，xuyaozaichouruoyukongqidaozhusheqili。ruguobushentuidongzhusai，kongqikeyibaohuyetishizhibubeipaizou。
進樣手法：雙手拿注射器。用一隻手(通常是左手)扶針插入墊片，注射大體積樣品(即氣體樣品)或柱前壓力極高時，要防止從氣相色譜儀注樣器來的壓力把注射器活塞彈出(即用右手的大拇指按壓住活塞頂部)。讓針尖穿過墊片盡可能深的進入進樣口，壓下注射器活塞停留1秒鍾，然後盡可能快而穩地抽出針尖（抽出的同時繼續壓住注射器活塞)。
進樣時間：進jin樣yang時shi間jian長chang短duan對dui柱zhu效xiao率lv影ying響xiang很hen大da。若ruo進jin樣yang時shi間jian過guo長chang，遇yu使shi色se譜pu區qu域yu加jia寬kuan而er降jiang低di柱zhu效xiao率lv。因yin此ci，對dui於yu衝chong洗xi法fa色se譜pu而er言yan，進jin樣yang時shi間jian越yue短duan越yue好hao，一yi般ban必bi須xu小xiao於yu1秒鍾。
3、氣化室溫度的選擇
氣化室溫度取決於樣品的化學和熱穩定性、沸程範圍、進(jin)樣(yang)口(kou)類(lei)型(xing)等(deng)。合(he)適(shi)的(de)氣(qi)化(hua)室(shi)溫(wen)度(du)即(ji)能(neng)保(bao)持(chi)樣(yang)品(pin)瞬(shun)間(jian)完(wan)全(quan)氣(qi)化(hua)，又(you)不(bu)引(yin)起(qi)樣(yang)品(pin)分(fen)解(jie)。溫(wen)度(du)過(guo)低(di)，氣(qi)化(hua)速(su)度(du)比(bi)較(jiao)慢(man)，使(shi)峰(feng)形(xing)不(bu)規(gui)則(ze)，出(chu)現(xian)平(ping)頭(tou)峰(feng)或(huo)伸(shen)舌(she)峰(feng)；溫度過高使出峰數目變化，產生前延峰，甚至樣品分解。為選擇合適的氣化室溫度，在多次的進樣中我們發現，氣化室溫度比柱溫高50-100℃或比樣品組分中最高沸點高50-70℃較為合適。溫度過高過低都會影響柱效。
網友支招：
一般柱效不好，先排除其他問題，都沒有問題的話就是柱子不行了。
如果柱子比較老，可以反過來小流速衝洗一下，我做過效果很好！（僅適用舊柱子啊，有點風險）。
把柱頭變色的填料挖掉，用同類新的填料填充好，效果很好。
正向衝洗色譜柱、反向衝洗色譜柱、超聲清洗色譜柱篩板、如果是柱內死體積增加則需更換新柱。
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如果柱子真的很老舊了，就反相衝洗試試，可能還能用一段時間，但不會太久。在然後就隻能換填料了，或換新的柱子。
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總結
第一柱子溫度能調高，第二可選柱子內徑小。
第三柱外體積小更妙，第四使用超純的矽膠。
第五氘燈要選能量高，第六采用中空透光燈。
第七改變有機相比率，第八流動相pH可鼓搗。
第九可把鍵合相選挑，第十改變有機添加劑。
十一改變流動相配比，十二縮短檢測響應時間。
文章來源：網絡
