手機版
紫外分光光度計
紫外分光光度計是廣泛應用於生物、醫(yi)學(xue)等(deng)多(duo)個(ge)科(ke)學(xue)研(yan)究(jiu)領(ling)域(yu)的(de)儀(yi)器(qi)之(zhi)一(yi)。紫(zi)外(wai)分(fen)光(guang)光(guang)度(du)計(ji)儀(yi)器(qi)分(fen)析(xi)法(fa)是(shi)利(li)用(yong)物(wu)質(zhi)分(fen)子(zi)吸(xi)收(shou)紫(zi)外(wai)可(ke)見(jian)光(guang)譜(pu)區(qu)輻(fu)射(she)的(de)一(yi)種(zhong)儀(yi)器(qi)分(fen)析(xi)方(fang)法(fa)。其(qi)基(ji)本(ben)原(yuan)理(li)依(yi)據(ju)朗(lang)伯(bo)・比爾定律――光被透明介質吸收的比例與入射光的強度無關，光的吸收與吸收層厚度、溶液濃度、光吸收率成正比，可用下式表示：A=k×b×c
（A為吸光度；k為摩爾吸光係數；b為光程，即盛放溶液的液槽的透光厚度；c為溶液濃度。）
儀器結構
紫外分光光度計由光源、單色器、吸收池、檢測器和信號顯示係統五大部分組成。
光源：是提供符合要求的入射光的裝置，有熱輻射光源和氣體放電光源兩類。熱輻射光源用於可見光區，一般為鎢燈和鹵鎢燈，波長範圍是350nm～1000nm；氣體放電光源用於紫外光區，一般為氫燈和氘燈，連續波長範圍是180nm～360nm。單色器：功能是將光源產生的複合光分解為單色光和分出所需的單色光束，它是分光光度計的心髒部分。吸收池：又you稱cheng比bi色se皿min，供gong盛sheng放fang試shi液ye進jin行xing吸xi光guang度du測ce量liang之zhi用yong，其qi底di及ji兩liang側ce為wei毛mao玻bo璃li，另ling兩liang麵mian為wei光guang學xue透tou光guang麵mian，為wei減jian少shao光guang的de反fan射she損sun失shi，吸xi收shou池chi的de光guang學xue麵mian必bi須xu完wan全quan垂chui直zhi於yu光guang束shu方fang向xiang。根gen據ju材cai質zhi可ke分fen為wei玻bo璃li池chi和he石shi英ying池chi兩liang種zhong，前qian者zhe用yong於yu可ke見jian光guang光guang區qu測ce定ding，後hou者zhe用yong於yu紫zi外wai光guang區qu。檢jian測ce器qi：shijiangguangxinhaozhuanbianweidianxinhaodezhuangzhi，celiangxiguangdushi，bingfeizhijieceliangtouguoxishouchideguangqiangdu，ershijiangguangqiangduzhuanhuanweidianliuxinhaojinxingceshi，zhezhongguangdianzhuanhuanqijianchengweijianceqi。xinhaoxianshixitong：是將檢測器輸出的信號放大，並顯示出來的裝置。
優勢與局限性
優勢可重複使用樣品；可以快速進行測量；儀器使用操作簡單；數據分析操作簡單；產品成本、操作成本低。
局(ju)限(xian)性(xing)雜(za)散(san)光(guang)。波(bo)長(chang)選(xuan)擇(ze)器(qi)並(bing)不(bu)完(wan)美(mei)，來(lai)自(zi)寬(kuan)波(bo)長(chang)範(fan)圍(wei)的(de)少(shao)量(liang)光(guang)仍(reng)可(ke)能(neng)從(cong)光(guang)源(yuan)傳(chuan)輸(shu)，這(zhe)可(ke)能(neng)會(hui)導(dao)致(zhi)嚴(yan)重(zhong)的(de)測(ce)量(liang)錯(cuo)誤(wu)。光(guang)散(san)射(she)。這(zhe)通(tong)常(chang)是(shi)由(you)液(ye)體(ti)樣(yang)品(pin)中(zhong)的(de)懸(xuan)浮(fu)固(gu)體(ti)引(yin)起(qi)的(de)，這(zhe)可(ke)能(neng)會(hui)導(dao)致(zhi)嚴(yan)重(zhong)的(de)測(ce)量(liang)誤(wu)差(cha)。比(bi)色(se)皿(min)或(huo)樣(yang)品(pin)中(zhong)存(cun)在(zai)的(de)氣(qi)泡(pao)會(hui)散(san)射(she)光(guang)，導(dao)致(zhi)無(wu)法(fa)重(zhong)現(xian)結(jie)果(guo)。來(lai)自(zi)多(duo)個(ge)吸(xi)收(shou)物(wu)種(zhong)的(de)幹(gan)擾(rao)。為(wei)了(le)進(jin)行(xing)適(shi)當(dang)的(de)定(ding)量(liang)分(fen)析(xi)，應(ying)將(jiang)每(mei)種(zhong)化(hua)學(xue)物(wu)質(zhi)從(cong)樣(yang)品(pin)中(zhong)分(fen)離(li)出(chu)來(lai)並(bing)單(dan)獨(du)檢(jian)查(zha)。組(zu)件(jian)的(de)偏(pian)差(cha)。任(ren)何(he)儀(yi)器(qi)組(zu)件(jian)未(wei)對(dui)準(zhun)定(ding)位(wei)，尤(you)其(qi)是(shi)固(gu)定(ding)樣(yang)品(pin)的(de)比(bi)色(se)皿(min)，都(dou)可(ke)能(neng)產(chan)生(sheng)不(bu)可(ke)重(zhong)複(fu)和(he)不(bu)準(zhun)確(que)的(de)結(jie)果(guo)。
操作步驟
STEP 1：開機預熱
在儀器測試之前一定要進行預熱，預熱的時間應該大於20min。檢查樣品室中是否有遮光物，有則取出。
STEP 2：光源選擇電源打開後，鎢燈會亮起。若在波長200nm～290nm之間工作，則光源切換至氘燈；在波長290nm～360nm之間工作，則要同時點亮氘燈和鎢燈。
STEP 3：波長選擇輸入所需波長。
STEP 4：設備校準沒有開機自動校準功能的設備需按說明書手動校準。
STEP 5：開始測量按START鍵(jian)開(kai)始(shi)測(ce)量(liang)，通(tong)常(chang)使(shi)用(yong)裝(zhuang)有(you)蒸(zheng)餾(liu)水(shui)的(de)吸(xi)收(shou)池(chi)調(tiao)零(ling)後(hou)放(fang)入(ru)樣(yang)品(pin)和(he)參(can)比(bi)樣(yang)進(jin)行(xing)測(ce)試(shi)，並(bing)記(ji)錄(lu)測(ce)試(shi)結(jie)果(guo)。測(ce)定(ding)前(qian)要(yao)經(jing)過(guo)預(yu)實(shi)驗(yan)確(que)定(ding)合(he)適(shi)的(de)樣(yang)品(pin)濃(nong)度(du)，讓(rang)反(fan)應(ying)後(hou)的(de)待(dai)測(ce)溶(rong)液(ye)的(de)光(guang)吸(xi)收(shou)值(zhi)位(wei)於(yu)0.3～0.7之間。否則，待測數據不能正確反映實際變化。如果不同樣品之間濃度差異較大，則在測定時應先測定低濃度樣品（淺色），再定測高濃度樣品（深色）。
STEP 6：數據處理定量測試時通常需要先測定若幹個已知濃度的待測物標準樣品，根據其吸光值與濃度繪製標準曲線。STEP 7：關guan機ji測ce量liang完wan畢bi後hou取qu出chu吸xi收shou池chi，清qing洗xi並bing晾liang幹gan後hou入ru盒he保bao存cun。關guan閉bi電dian源yuan，拔ba下xia電dian源yuan插cha頭tou，在zai樣yang品pin室shi內nei放fang入ru幹gan燥zao劑ji，蓋gai上shang樣yang品pin室shi蓋gai，罩zhao上shang防fang塵chen罩zhao。
常見問題與解決措施
問題1：接通電源後，光源不亮
原因：①保險管燒壞；②光源燈泡損壞。措施：①更換保險管；②檢查氘燈和鎢燈是否損壞，若損壞則及時更換燈泡。
問題2：吸光值出現負數原因：沒做空白對照，樣品吸光值小於空白參比液。措施：先做空白對照。
問題3：基線某段噪音很高原因：濾光片受潮發黴，導致光能量損失嚴重。措施：更換濾光片。
問題4：吸光值信號上下擺動原因：開關觸點因長期氧化導致接觸不良。措施：用金屬活化劑清洗按鍵觸點。
問題5：數字顯示不能歸零，同時圖線記錄基線位置偏高原因：①信號處理板可能發生故障；②光電倍增管等老化，性能降低；③前置放大板出現故障，引起反饋量增大。措施：①開kai機ji通tong電dian，先xian做zuo記ji錄lu故gu障zhang曲qu線xian，與yu原yuan始shi記ji錄lu的de標biao準zhun曲qu線xian對dui照zhao，找zhao出chu異yi同tong點dian，並bing做zuo定ding性xing定ding能neng分fen析xi。然ran後hou用yong一yi隻zhi同tong型xing號hao規gui格ge的de新xin光guang電dian倍bei增zeng管guan替ti換huan機ji上shang的de光guang電dian管guan，再zai開kai機ji實shi驗yan，若ruo結jie果guo記ji錄lu出chu來lai的de圖tu線xian並bing沒mei有you什shen麼me變bian化hua，則ze證zheng明ming光guang電dian倍bei增zeng管guan沒mei有you老lao化hua變bian質zhi。②jinyibujianzhaxinhaochulibangeyuanqijianshifousunhuai，duiyingxianglingminduyouguandedianweiqijinxingjiance，kanshujushifouzhengchang。ruodouzhengchangzeshuomingxinhaochulibanmeiyouguzhang。③對(dui)以(yi)上(shang)部(bu)件(jian)檢(jian)查(zha)都(dou)沒(mei)有(you)問(wen)題(ti)，那(na)麼(me)故(gu)障(zhang)很(hen)可(ke)能(neng)發(fa)生(sheng)在(zai)前(qian)置(zhi)級(ji)放(fang)大(da)板(ban)。應(ying)采(cai)用(yong)模(mo)擬(ni)測(ce)試(shi)對(dui)前(qian)置(zhi)放(fang)大(da)板(ban)進(jin)行(xing)測(ce)量(liang)，先(xian)利(li)用(yong)直(zhi)流(liu)穩(wen)壓(ya)電(dian)源(yuan)，把(ba)各(ge)供(gong)電(dian)電(dian)源(yuan)加(jia)上(shang)，使(shi)其(qi)電(dian)路(lu)單(dan)獨(du)工(gong)作(zuo)，把(ba)信(xin)號(hao)發(fa)生(sheng)器(qi)發(fa)出(chu)的(de)信(xin)號(hao)加(jia)到(dao)輸(shu)入(ru)端(duan)，再(zai)用(yong)示(shi)波(bo)器(qi)接(jie)在(zai)輸(shu)出(chu)端(duan)測(ce)量(liang)輸(shu)出(chu)信(xin)號(hao)。將(jiang)輸(shu)入(ru)信(xin)號(hao)與(yu)輸(shu)出(chu)信(xin)號(hao)對(dui)比(bi)，若(ruo)結(jie)果(guo)波(bo)形(xing)相(xiang)同(tong)，說(shuo)明(ming)電(dian)路(lu)沒(mei)有(you)故(gu)障(zhang)。用(yong)相(xiang)同(tong)方(fang)法(fa)對(dui)另(ling)一(yi)個(ge)帶(dai)驅(qu)動(dong)器(qi)的(de)開(kai)關(guan)管(guan)進(jin)行(xing)測(ce)量(liang)，輸(shu)入(ru)端(duan)加(jia)入(ru)信(xin)號(hao)後(hou)，示(shi)波(bo)器(qi)若(ruo)沒(mei)有(you)測(ce)出(chu)輸(shu)出(chu)端(duan)信(xin)號(hao)，則(ze)判(pan)斷(duan)開(kai)關(guan)管(guan)是(shi)損(sun)壞(huai)的(de)，應(ying)換(huan)上(shang)同(tong)一(yi)型(xing)號(hao)規(gui)格(ge)的(de)新(xin)開(kai)關(guan)管(guan)。
注意事項
開機前將樣品室內的幹燥劑取出，儀器自檢過程中禁止打開樣品室蓋。比色皿內溶液以皿高的2/3～4/5為(wei)宜(yi)，不(bu)可(ke)過(guo)滿(man)以(yi)防(fang)液(ye)體(ti)溢(yi)出(chu)腐(fu)蝕(shi)儀(yi)器(qi)。測(ce)定(ding)時(shi)應(ying)保(bao)持(chi)比(bi)色(se)皿(min)清(qing)潔(jie)，池(chi)壁(bi)上(shang)液(ye)滴(di)應(ying)用(yong)擦(ca)鏡(jing)紙(zhi)擦(ca)幹(gan)，切(qie)勿(wu)用(yong)手(shou)捏(nie)透(tou)光(guang)麵(mian)。測(ce)定(ding)紫(zi)外(wai)波(bo)長(chang)時(shi)，需(xu)選(xuan)用(yong)石(shi)英(ying)比(bi)色(se)皿(min)。測(ce)定(ding)時(shi)，禁(jin)止(zhi)將(jiang)試(shi)劑(ji)或(huo)液(ye)體(ti)物(wu)質(zhi)放(fang)在(zai)儀(yi)器(qi)的(de)表(biao)麵(mian)上(shang)，如(ru)有(you)溶(rong)液(ye)溢(yi)出(chu)或(huo)其(qi)它(ta)原(yuan)因(yin)將(jiang)樣(yang)品(pin)槽(cao)弄(nong)髒(zang)，要(yao)盡(jin)可(ke)能(neng)及(ji)時(shi)清(qing)理(li)幹(gan)淨(jing)。實(shi)驗(yan)結(jie)束(shu)後(hou)將(jiang)比(bi)色(se)皿(min)中(zhong)的(de)溶(rong)液(ye)倒(dao)盡(jin)，然(ran)後(hou)用(yong)蒸(zheng)餾(liu)水(shui)或(huo)有(you)機(ji)溶(rong)劑(ji)衝(chong)洗(xi)比(bi)色(se)皿(min)至(zhi)幹(gan)淨(jing)，倒(dao)立(li)晾(liang)幹(gan)。關(guan)掉(diao)電(dian)源(yuan)，再(zai)將(jiang)幹(gan)燥(zao)劑(ji)放(fang)入(ru)樣(yang)品(pin)室(shi)內(nei)，並(bing)蓋(gai)上(shang)防(fang)塵(chen)罩(zhao)，做(zuo)好(hao)使(shi)用(yong)登(deng)記(ji)。
