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液相色譜法（HPLC）是一種廣泛應用於分析化學領域的分離技術。在反相液相色譜中使用C8/C18柱時，選擇合適的流動相至關重要。本文將詳細討論在使用C8/C18柱時為何要避免高水相流動相，以及在高比例水性流動相下保留極性分析物的色譜柱選擇。
zhongsuozhouzhi，zaifanxiangyexiangsepuzhong，gudingxiangshifeijixingde，erliudongxiangshijixingde。womenruheshiliudongxiangchengjixingne？tongguotianjiashuizheyangdeshuixingzufen。raner，tianjiashuidebiliyouxianzhi，bunengshiyonghanshuiliangguogaodeliudongxiangjinxingfanxiangyexiangsepufenxi，ru90%、95%甚至100%。那麼，這是什麼原因呢？
首shou先xian，我wo們men需xu要yao了le解jie為wei什shen麼me要yao使shi用yong高gao含han水shui量liang的de流liu動dong相xiang。原yuan因yin可ke能neng是shi為wei了le保bao留liu高gao極ji性xing分fen子zi，如ru有you機ji酸suan。例li如ru抗kang壞huai血xue酸suan，這zhe些xie分fen子zi在zai性xing質zhi上shang是shi高gao極ji性xing的de，它ta們men在zai反fan相xiang液ye相xiang色se譜pu中zhong不bu會hui被bei充chong分fen保bao留liu，因yin為wei我wo們men的de固gu定ding相xiang是shi非fei極ji性xing的de，而er非fei極ji性xing固gu定ding相xiang不bu會hui保bao留liu這zhe些xie極ji性xing化hua合he物wu。因yin此ci，需xu要yao在zai流liu動dong相xiang中zhong添tian加jia高gao比bi例li的de水shui相xiang。這zhe是shi因yin為wei水shui是shi一yi種zhong極ji性xing溶rong劑ji，它ta能neng夠gou與yu極ji性xing較jiao強qiang的de分fen析xi物wu形xing成cheng氫qing鍵jian或huo離li子zi相xiang互hu作zuo用yong，從cong而er降jiang低di分fen析xi物wu在zai流liu動dong相xiang中zhong的de溶rong解jie度du，有you利li於yu分fen析xi物wu在zai色se譜pu柱zhu上shang的de保bao留liu和he分fen離li。
接下來，我們需要了解C8或C18固定相的性質。C8/C18是一種常用的反相液相色譜柱，其表麵鍵合有C8或C18烷基鏈，具有類似油脂的非極性特性。在反相色譜法中，分析物在流動相和固定相之間進行分配，以實現分離。由於C8/C18柱的固定相非極性，它們通常適用於分析非極性或弱極性分析物。然而，油水不能混合，類似油脂的非極性特性使得C8或C18固定相在高比例水相中不能被潤濕。當流動相中有一定比例的有機溶劑，如乙腈或甲醇（其性質為非極性）時，對C8或C18具有良好的潤濕性。而鍵合的固定相是位於矽膠孔內的，這意味流動相能夠潤濕C8或C18固定相的孔。這一點是非常重要的，否則它們將無法實現對目標分析物的保留。然而，如果使用100%的水相作為流動相，這會使C8或C18鍵jian合he固gu定ding相xiang幹gan涸he。因yin為wei水shui具ju有you較jiao高gao的de表biao麵mian張zhang力li，流liu經jing固gu定ding相xiang的de水shui分fen子zi不bu會hui進jin入ru孔kong內nei，而er隻zhi會hui通tong過guo孔kong之zhi間jian的de空kong間jian。這zhe樣yang一yi來lai，孔kong就jiu不bu會hui打da開kai，如ru果guo孔kong沒mei有you被bei潤run濕shi，那na麼me固gu定ding相xiang無wu法fa處chu於yu活huo躍yue狀zhuang態tai，不bu能neng與yu分fen析xi物wu發fa生sheng相xiang互hu作zuo用yong。這zhe就jiu是shi在zai反fan相xiang液ye相xiang色se譜pu中zhong使shi用yongC8/C18柱時要避免高水相流動相的原因。
當C8/C18固定相暴露在高水相流動相中時，由於表麵張力較高，C8/C18表麵會脫水，這種現象稱為固定相塌陷、鏈折疊或固定相打結，化合物無法正常地與固定相發生相互作用進行保留。
那麼，固定相塌陷會帶來哪些問題呢？固定相塌陷可能會導致保留減少、baoliushijiandebuzhongfudexianxiang。bingqieruguoxiangzaicicongganhezhuangtaihuifudaorunshizhuangtai，zhegefanxiangguochengjiangxuyaohenchangdeshijian。baoliudejianshaoshiyinweijianhegudingxiangdehuoxingbiaomiancunzaiyuguijiaokongzhong，erkongneimeiyoubeirunshi，huahewuyewufajinrukongneiyuqifashengxianghuzuoyong。yinci，baoliushijianhuijianshao。liru，ruguoshiyong90%的水和10%的甲醇作為流動相，保留時間為10分鍾。此時，如果隻使用100%的水，10分鍾的保留時間會急劇減少到3~4fenzhong。diergezhongyaodedianshibaoliushijiandezhongfuxinghuijiangdi，kenenghuisuizheshijiandetuiyierfashengbianhua。suoyi，ruguobaoliushijianbianhuahenda，kenengshiyinweiliudongxiangzhongshuihanliangjiaogao。
如果別無選擇，隻能使用水性或高比例水相的流動相，那麼在方法開發階段，需要注意選擇合適的色譜柱。
1.未封端色譜柱。未封端柱表麵存在較多的具有一定極性的遊離矽醇，遊離矽醇使固定相表麵能被潤濕，有利於極性分析物的保留。
2.短鏈烷基色譜柱：鍵合鏈之間存在遊離體積，矽醇的屏蔽作用很小，有利於極性分析物的分離。
3.極性嵌入烷基相色譜柱：在烷基鏈中嵌入極性基團，增強與極性分析物之間的相互作用，提高保留性能。
4.寬孔徑相色譜柱：以便水可以滲透到孔內使相濕潤，有利於極性分析物在高水相流動相下的保留。
綜上所述，在使用C8/C18sepuzhushi，yingbimiangaoshuixiangliudongxiang，yimianzaochenggudingxiangtaxiandengwenti。zhenduigaoshuixiangliudongxiangxiabaoliujixingfenxiwudexuqiu，keyixuanzeqitaleixingdesepuzhujinxingfenxi。 
