Molecular Formula: C22H12N4Na4O13S4
Molecular Weight::760.6
CAS Number: 6226-79-5
λ : 520 nm (water)
麗春紅(Ponceau S)也稱猩紅,可以用於PVDF膜、硝酸纖維素膜(nitrocellulose membrane)和醋酸纖維素膜(cellulose acetate membrane)上(shang)的(de)蛋(dan)白(bai)的(de)檢(jian)測(ce)。麗(li)春(chun)紅(hong)帶(dai)負(fu)電(dian)荷(he),可(ke)以(yi)與(yu)帶(dai)正(zheng)電(dian)荷(he)的(de)氨(an)基(ji)酸(suan)殘(can)基(ji)結(jie)合(he),同(tong)時(shi)麗(li)春(chun)紅(hong)也(ye)可(ke)以(yi)與(yu)蛋(dan)白(bai)的(de)非(fei)極(ji)性(xing)區(qu)相(xiang)結(jie)合(he),從(cong)而(er)形(xing)成(cheng)紅(hong)色(se)的(de)條(tiao)帶(dai)。麗(li)春(chun)紅(hong)染(ran)色(se)的(de)靈(ling)敏(min)度(du)不(bu)及(ji)考馬斯亮藍染色。
麗春紅對蛋白的染色是可逆的,染色後可以用蒸餾水,PBS或其它適當溶液洗去。因此,蛋白質N端測序時將SDS-PAGE膠上的蛋白轉移到PVDF膜,用麗春紅染色後將目的條帶切下用於測序。
注意:麗春紅染色液不適用於尼龍膜上的蛋白的檢測。
使用說明
將PVDF膜、硝酸纖維素膜或醋酸纖維素膜浸沒在麗春紅染色液中,搖動5-10分鍾或更長時間;取出印跡膜,用蒸餾水,PBS或其它適當溶液漂洗2-3次,可出現清晰條帶,記錄結果;用蒸餾水,PBS或其它適當溶液漂洗2-3次,每次3-5分鍾,去除麗春紅,進行後續的WB檢測。
補充:麗春紅染色液也可以直接用來染PAGE膠,不過,在染色之前最好用甲醇-乙酸溶液浸泡一下PAGE膠,起到固定蛋白的作用。
麗春紅染色液的配製
常用的麗春紅染色液有兩種:一種用乙酸配製,另外一種用三氯乙酸(TVA)和5-磺基水楊酸(5-Sulfosalicylic acid)配製。配製方法如下:
一、用乙酸配製成分:0.1%(w/v)麗春紅,5%(v/v)乙酸,ddH2O。
4 ℃保存,不要凍上。也可以配成“0.2%(w/v)麗春紅,3%(v/v)乙酸,ddH2O”。
二、用三氯乙酸和5-磺基水楊酸成分:2% (w/v)麗春紅,30%的三氯乙酸,30%的5-磺基水楊酸。
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