隨(sui)著(zhe)食(shi)用(yong)菌(jun)產(chan)業(ye)的(de)蓬(peng)勃(bo)發(fa)展(zhan),菌(jun)種(zhong)需(xu)要(yao)量(liang)隨(sui)之(zhi)增(zeng)加(jia),而(er)現(xian)有(you)菌(jun)種(zhong)生(sheng)產(chan)單(dan)位(wei)明(ming)顯(xian)偏(pian)少(shao),許(xu)多(duo)菇(gu)農(nong)不(bu)得(de)不(bu)向(xiang)外(wai)引(yin)種(zhong)。長(chang)途(tu)購(gou)運(yun)菌(jun)種(zhong)不(bu)僅(jin)花(hua)費(fei)大(da),成(cheng)本(ben)高(gao)而(er)且(qie)菌(jun)種(zhong)因(yin)破(po)瓶(ping)而(er)易(yi)引(yin)起(qi)雜(za)菌(jun)汙(wu)染(ran),從(cong)而(er)嚴(yan)重(zhong)影(ying)響(xiang)栽(zai)培(pei)食(shi)用(yong)菌(jun)的(de)經(jing)濟(ji)效(xiao)益(yi)。菇(gu)農(nong)若(ruo)能(neng)掌(zhang)握(wo)菌(jun)種(zhong)生(sheng)產(chan)程(cheng)序(xu)和(he)製(zhi)種(zhong)技(ji)術(shu),實(shi)行(xing)自(zi)行(xing)製(zhi)種(zhong),逐(zhu)步(bu)發展成製種專業戶,也是一項很好的致富門路。 菌種生產程序,通常分為母種、原種和栽培種3個層次,也就是通常所說的一級、二級、三級菌種。其中母種的分離選育技術性強,要求精化;而原種和栽培種的製作則比較簡單。下麵介紹各級菌種的製作技術。
母種的分離選育
母種主要采用人工選擇、誘變育種、雜交育種和原生質融合等手段獲得。作為一般製種專業戶,可以采用人工選擇方式分離培育母種,具體步驟與操作方法如下。
1、采集種源 從野生成人工栽培群體中,選擇有代表性的優良菇體作為種源。種菇的標準是:八成熟,朵形圓正、肉質肥厚,無病蟲害。采集1--2朵符合上述標準的種菇編上號碼,作為分離母種的材料。從栽培室采集的應標有原菌株代號。
2、培養基配製 瓊脂培養基又叫PDA培養基,常用配方為:馬鈴薯200--250克,瓊脂15--20克,葡萄糖20--25克,清水1000毫升。也可以加硫酸鎂1--1.5克,維生素B1微量,磷酸二氫鉀2--3克。先將馬鈴薯洗淨去皮,切成薄片,置於鋁鍋內加水煮沸30分鍾,撈起後用4層紗布過濾,取汁。然後將瓊脂加入汁內,邊加熱邊攪拌,讓瓊脂充分溶化;再將葡萄糖等加入,稍煮幾分鍾後,同樣用4層紗布過濾,取其汁液。將汁液趁熱裝入玻璃試管內。裝至管長的1/5,管口用棉花塞緊,或將汁液裝入玻璃三角瓶內,裝量20毫升。然後置於高壓鍋內,在98--108千帕/厘米的壓力下滅菌30分鍾左右。滅菌後及時取出,趁熱將試管斜排於桌上,冷卻後即成為固體斜麵培養基。
3、母種分離方法 有孢子彈射、組織分離和基內分離3種方法。①孢(bao)子(zi)彈(dan)射(she)法(fa)。將(jiang)種(zhong)菇(gu)表(biao)麵(mian)消(xiao)毒(du),吸(xi)幹(gan)水(shui)分(fen)後(hou),將(jiang)菇(gu)體(ti)懸(xuan)掛(gua)於(yu)裝(zhuang)有(you)瓊(qiong)脂(zhi)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)三(san)角(jiao)瓶(ping)內(nei),讓(rang)菇(gu)體(ti)內(nei)的(de)袍(pao)子(zi)自(zi)然(ran)散(san)落(luo)在(zai)培(pei)養(yang)基(ji)上(shang)萌(meng)發(fa)菌(jun)絲(si)。也(ye)可(ke)以(yi)剪(jian)取(qu)一(yi)小(xiao)決(jue)菇(gu)體(ti),貼(tie)附(fu)在(zai)試(shi)管(guan)斜(xie)麵(mian)培(pei)養(yang)基(ji)表(biao)麵(mian),讓(rang)孢(bao)子(zi)散(san)落(luo)在(zai)培(pei)養(yang)基(ji)上(shang)萌(meng)發(fa)菌(jun)絲(si),即(ji)能(neng)獲(huo)得(de)母(mu)種(zhong);③組zu織zhi分fen離li法fa。將jiang消xiao毒du過guo的de種zhong菇gu,在zai接jie種zhong箱xiang內nei用yong手shou從cong菇gu柄bing處chu對dui半ban解jie開kai,或huo用yong刀dao片pian切qie開kai,使shi菇gu體ti形xing成cheng對dui開kai。在zai菌jun蓋gai和he菌jun柄bing交jiao界jie處chu或huo菌jun褶zhe處chu,用yong接jie種zhong刀dao切qie取qu一yi小xiao塊kuai菇gu體ti,然ran後hou縱zong切qie成cheng5毫米x10毫米的小薄片,用接種針挑取一塊薄片,接入斜麵培養基的中央,每支試管接種一小決薄片,待其萌發菌絲,即可得到母種;(3)基內分離法。選擇已長菇的木段,削去樹皮及表層木質部,用70%的酒精消毒後,鋸成1厘米厚的薄片,放入0.1%的升汞水中消毒1--2分鍾,再用滅菌水洗去殘液。然後再將小薄片劈成0.5--1厘米寬的小條,接入斜麵培養基中央,待長出菌絲後即得母種。也可以在已長菇的菌袋中,經消毒處理後,用接種針鉤取袋內色澤純、長勢旺的菌絲體,接種在試管斜麵培養基中央,待萌發菌絲後,同樣獲得菌種。
4、適溫培養 通過上述不同方式將菌種分離接種於試管後,要及時將試管移入已消毒的培養箱或培養室內培養,溫度控製在25℃左右,使分離獲得的孢子或菌絲在適溫下發育。一般孢子彈射3--4天後孢子萌發成菌落,10天後菌絲長滿管;組織分離接種後2--3天,菌絲即萌發,並在培養基上蔓延生長;菇木分離接種後,7天菌絲即恢複生長。
5、選育提純 通過上述方法得到的菌絲,不一定都是優質的,還需要選育提純。因此,在菌絲萌發後,要認真觀察,挑選色澤純、健壯、長勢正常、無間斷的菌絲,在接種箱內連同培養基鉤取菌絲,接入另備的試管培養基上。在23--25℃的恒溫條件下,培養7--10天,待菌絲長滿管後,再進行觀察,從中擇優取用,即為"母代"母種。
6、轉管擴接 母代母種可以轉管擴接成"子代"母種。采用同樣的斜麵培養基,每支可擴接30--50支子代母種。生產上供應的多為子代母種。它可以再次轉管擴接。一般每支可擴接成20--25支子代母種,但轉管次數不得超過5次。
7、出菇試驗 分離選育的母種,還必須進行出菇試驗。方法是:把母種接種於瓶或袋裝的木屑培養基上,根據各種菇耳種性對溫度的要求,進行適溫培養,直至出菇才證實可用於生產。
原種繁殖培養
將母種接在瓶或袋的木屑培養基上,通過培養,即成原種。其技術要求如下。
1、原種木屑培養基配方 雜木屑77.5%,麥麩20%,蔗糖1%,石膏粉1.2%,硫酸鎂0.3%.pH值(滅菌前)6.5--7,含水量調至60%.將上述原、輔料混合拌勻,裝入750毫升的玻璃菌種瓶內,裝料要求下鬆上緊。瓶口塞緊棉花,再用牛皮紙包住瓶頸與棉塞。然後置於高壓滅菌鍋內,在147千帕/平方厘米壓力下滅菌2--2.5小時。也可進行常壓滅菌,在100℃下保持10--11小時,達標後趁熱取出,讓其冷卻。
2、接入菌種 待料溫降至25℃以下時,在滅菌條件下,將試管種分割成若幹決,通過酒精燈火焰迅速接入原種培養基上,每支母種可按4--6瓶原種。
3、發菌培養 接種後及時將玻璃菌種瓶移入25℃菌種培養室內進行培養。空間相對濕度控製在70℃以上,避免強光照射。原種培養時間一般菇類需要40--50天,草菇、銀耳隻需15--20天即可。
4、去雜選優 原種培育過程中,要每天進行觀察,如發現有雜菌汙染的,應立即淘汰。
栽培種擴大培育
將原種再次擴接在同樣的木屑培養基上,在適溫條件下培養30--35天即為栽培種(又叫生產種),可用於生產栽培。栽培種可用750毫升菌種專用瓶,由於使用量大,所以通常多采用聚丙烯菌種袋。袋的規格有12厘米x24厘米、15厘米x28厘米、17厘米x33厘米等,可根據各種菇耳特性和當地習慣選擇使用。培養基滅菌采用常壓滅菌灶滅菌,要求滅菌溫度達100℃,保持8--10小時,達標後趁熱卸袋冷卻。待料溫降至25℃以下時,在無菌條件下接入選定品種的原種。每瓶原種可擴接成50--60瓶栽培種。菌種培育室要求幹淨,防強光,室溫掌握在23--25℃,並經常檢查,發現雜菌汙染應及時淘汰,不斷選優去劣。當菌絲長滿袋,尖端菌絲反轉上爬1--3厘米時,為適齡的栽培種。
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