細(xi)菌(jun)培(pei)養(yang)是(shi)一(yi)種(zhong)用(yong)人(ren)工(gong)方(fang)法(fa)使(shi)細(xi)菌(jun)生(sheng)長(chang)繁(fan)殖(zhi)的(de)技(ji)術(shu)。細(xi)菌(jun)在(zai)自(zi)然(ran)界(jie)中(zhong)分(fen)布(bu)極(ji)廣(guang)，數(shu)量(liang)大(da)，種(zhong)類(lei)多(duo)，它(ta)可(ke)以(yi)造(zao)福(fu)人(ren)類(lei)，也(ye)可(ke)以(yi)成(cheng)為(wei)致(zhi)病(bing)的(de)原(yuan)因(yin)。大(da)多(duo)數(shu)細(xi)菌(jun)可(ke)用(yong)人(ren)工(gong)方(fang)法(fa)培(pei)養(yang)

，即(ji)將(jiang)其(qi)接(jie)種(zhong)於(yu)培(pei)養(yang)基(ji)上(shang)，使(shi)其(qi)生(sheng)長(chang)繁(fan)殖(zhi)。培(pei)養(yang)出(chu)來(lai)的(de)細(xi)菌(jun)用(yong)於(yu)研(yan)究(jiu)、鑒定和應用。細菌培養是一個複雜的技術。

一、培養條件編輯培養時應根據細菌種類和目的等選擇培養方法
、培養基
，製定培養條件（溫度、pH值、時間，對氧的需求與否等）。一般操作步驟為先將標本接種於固體培養基上，做分離培養。再進一步對所得單個菌落進行形態、生化及血清學反應鑒定。培養基常用牛肉湯、蛋白腖

、氯化鈉、葡萄糖
、血液等和某些細菌所需的特殊物質配製成液體
、半固體、固體等。一般細菌可在有氧條件下
，37℃中放18～24小時生長。厭氧菌則需在無氧環境中放2～3天後生長。個別細菌如結核菌要培養1個月之久。

二、注意點

由於細菌無處不在，因此從製備培養基時開始，整個培養過程必須按無菌操作要求進行，否則外界細菌汙染標本，會導致錯誤結果；而培養的致病菌一旦汙染環境，就會引起交叉感染。

以疾病診斷為目的進行的培養，要選擇合適的標本（血
、尿、便
、膿液
、分泌物等），並應結合臨床情況解釋所得結果。

三
、具體培養步驟

以光合細菌培養方法為例。光合細菌培養的方法，按次序分為容器、工具的消毒，培養基的製備
，接種和培養管理四個步驟。

（一）容器、工具的消毒。

（二）培養基的製備

1．培養用水

如果培養的光合細菌是淡水種，菌種培養可用蒸餾水
，生產培養可用消毒的自來水（或井水）配pei製zhi。如ru果guo培pei養yang的de光guang合he細xi菌jun是shi海hai水shui種zhong
，則ze用yong天tian然ran海hai水shui配pei製zhi培pei養yang基ji，注zhu意yi在zai海hai水shui中zhong加jia入ru磷lin元yuan素su時shi，不bu能neng用yong磷lin酸suan氫qing二er鉀jia，應ying用yong磷lin酸suan二er氫qing鉀jia，不bu然ran會hui產chan生sheng大da量liang沉chen澱dian。

2．滅(mie)菌(jun)和(he)消(xiao)毒(du)菌(jun)種(zhong)培(pei)養(yang)用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)應(ying)連(lian)同(tong)培(pei)養(yang)容(rong)器(qi)用(yong)高(gao)壓(ya)蒸(zheng)氣(qi)滅(mie)菌(jun)鍋(guo)滅(mie)菌(jun)。小(xiao)型(xing)生(sheng)產(chan)性(xing)培(pei)養(yang)可(ke)把(ba)配(pei)好(hao)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)用(yong)普(pu)通(tong)鋁(lv)鍋(guo)或(huo)大(da)型(xing)三(san)角(jiao)燒(shao)瓶(ping)煮(zhu)沸(fei)消(xiao)毒(du)。大(da)型(xing)生(sheng)產(chan)性(xing)培(pei)養(yang)則(ze)把(ba)經(jing)沉(chen)澱(dian)砂(sha)濾(lv)後(hou)的(de)水(shui)用(yong)漂(piao)白(bai)粉(fen)（或漂白液）消毒後使用。

3．培pei養yang基ji配pei製zhi根gen據ju所suo培pei養yang種zhong類lei的de營ying養yang需xu要yao選xuan擇ze合he適shi的de培pei養yang基ji配pei方fang。按an培pei養yang基ji配pei方fang把ba所suo需xu物wu質zhi稱cheng量liang
，逐zhu一yi溶rong解jie，混hun合he
，配pei成cheng培pei養yang基ji。也ye可ke先xian配pei成cheng母mu液ye，使shi用yong時shi按an比bi例li加jia入ru一yi定ding的de量liang即ji可ke。

（三）接種培養基配好後

，應立即進行接種。光合細菌生產性培養的按種量比較高，一般為20%～50%，即菌種母液量和新配培養液雖之比為1∶4～1∶1
，不應低於20%
，尤其是微氣培養，接種量更應高些，否則光合細菌在培養液中很難占絕對優勢
，影響培養的最終產量和質量。

（四）培養管理光合細菌的培養過程中，管理工作包括日常管理操作和測試，生長情況的觀察
、檢查以及出現問題的分析處理等三個方麵。

4、日常管理和測試

（1）攪拌和充氣：光guang合he細xi菌jun培pei養yang過guo程cheng中zhong必bi須xu充chong氣qi或huo攪jiao拌ban，作zuo用yong是shi幫bang助zhu沉chen澱dian的de光guang合he細xi菌jun上shang浮fu獲huo得de光guang照zhao，保bao持chi菌jun細xi胞bao的de良liang好hao生sheng長chang。小xiao型xing厭yan氣qi培pei養yang常chang用yong人ren工gong搖yao動dong培pei養yang容rong器qi的de方fang法fa使shi菌jun細xi胞bao上shang浮fu
，每mei天tian至zhi少shao搖yao動dong三san次ci，定ding時shi進jin行xing。大da型xing厭yan氣qi培pei養yang則ze用yong機ji械xie攪jiao拌ban器qi或huo使shi用yong小xiao水shui泵beng使shi水shui緩huan慢man循xun環huan運yun轉zhuan
，保bao持chi菌jun體ti懸xuan浮fu。微wei氣qi培pei養yang是shi通tong過guo充chong氣qi幫bang助zhu菌jun體ti上shang浮fu
，因yin為wei培pei養yang液ye中zhong溶rong解jie氧yang含han量liang增zeng加jia
，光guang合he細xi菌jun繁fan殖zhi受shou到dao抑yi製zhi
，產chan量liang下xia降jiang

，所suo以yi必bi須xu嚴yan格ge控kong製zhi充chong氣qi量liang。一yi般ban采cai用yong定ding時shi斷duan續xu充chong氣qi，充chong氣qi量liang控kong製zhi在zai1～1.5升/（升·h）之間，溶解氧量保持在1×10-6以下。

（2）調節光照度：培(pei)養(yang)光(guang)合(he)細(xi)菌(jun)需(xu)要(yao)連(lian)續(xu)進(jin)行(xing)照(zhao)明(ming)。在(zai)日(ri)常(chang)管(guan)理(li)工(gong)作(zuo)中(zhong)，應(ying)根(gen)據(ju)需(xu)要(yao)經(jing)常(chang)調(tiao)整(zheng)光(guang)照(zhao)度(du)。白(bai)天(tian)可(ke)利(li)用(yong)太(tai)陽(yang)光(guang)培(pei)養(yang)，晚(wan)上(shang)則(ze)需(xu)要(yao)人(ren)工(gong)光(guang)源(yuan)照(zhao)明(ming)
，或(huo)完(wan)全(quan)利(li)用(yong)人(ren)工(gong)光(guang)源(yuan)培(pei)養(yang)。人(ren)工(gong)光(guang)源(yuan)一(yi)般(ban)使(shi)用(yong)碘(dian)鎢(wu)燈(deng)或(huo)白(bai)熾(chi)燈(deng)泡(pao)。不(bu)同(tong)的(de)培(pei)養(yang)方(fang)式(shi)所(suo)要(yao)求(qiu)的(de)光(guang)照(zhao)強(qiang)度(du)有(you)所(suo)不(bu)同(tong)。一(yi)般(ban)培(pei)養(yang)光(guang)照(zhao)強(qiang)度(du)應(ying)控(kong)製(zhi)在(zai)2000～5000lx之間。如果光合細菌生長繁殖快，細胞密度高，則光照強度應提高到5000～10000lx。光照強度可通過調整培養容器與光源的距離或使用可控電源箱調節。

（3）調節溫度：光合細菌對溫度的適應範圍很廣
，一船在23～39℃defanweineijunnengzhengchangshengchangfanzhi，kebubitiaozhengwendu。zaichangwenxiapeiyangyeketongguotiaozheng，jiangwendukongzhizaiguanghexijunshengchangfanzhizuishiyidefanweinei，shiguanghexijungenghaodishengchang。

（4）酸堿度的測定和調整：在培養光合細菌的過程中
，必須注意酸堿度的變化。由於光合細菌的大量繁殖，菌液的pH值上升，這意味著光合細菌正處於指數生長期。但當pH值超過最適範圍甚至生長的適應範圍時

，光合細菌的生長達到頂點，隨後生長下降。如果能及時調整菌液的酸堿度，使pH值zhi保bao持chi在zai最zui適shi範fan圍wei

，則ze光guang合he細xi菌jun能neng繼ji續xu生sheng長chang繁fan殖zhi。為wei了le延yan長chang光guang合he細xi菌jun的de指zhi數shu生sheng長chang期qi，提ti高gao培pei養yang基ji的de利li用yong率lv和he單dan位wei水shui體ti的de產chan量liang
，測ce定ding和he調tiao整zhengPH值是非常重要的。一船采用加酸的辦法來降低菌液的酸堿度，醋酸、乳酸和鹽酸部可使用，最常用的是醋酸。在日常的管理工作中

，必須每天或隔天測定菌液的pH值
，當pH值上升超出最適範圍
，即加酸調整。如果在培養過程中不測定、調整酸堿度，當光合細菌的生長達到一定密度後pH值也上升到9以上
，細菌生長受阻，此時應采收或再擴大培養。在培養過程中不調整PH值
，獲得的最終產量低。

5、培pei養yang成cheng敗bai的de標biao準zhun編bian輯ji生sheng長chang情qing況kuang的de觀guan察cha和he檢jian查zha光guang合he細xi菌jun生sheng長chang情qing況kuang的de好hao壞huai是shi培pei養yang成cheng敗bai的de標biao準zhun。在zai培pei養yang過guo程cheng中zhong，可ke以yi通tong過guo觀guan察cha菌jun液ye的de顏yan色se及ji其qi變bian化hua來lai了le解jie光guang合he細xi菌jun生sheng長chang繁fan殖zhi的de大da體ti情qing況kuang，菌jun液ye的de顏yan色se是shi否fou正zheng常chang，接jie種zhong後hou顏yan色se是shi否fou由you淺qian變bian深shen，均jun反fan映ying光guang合he細xi菌jun是shi否fou正zheng常chang生sheng長chang繁fan殖zhi以yi及ji繁fan殖zhi速su度du的de快kuai慢man。必bi要yao時shi可ke通tong過guo顯xian微wei鏡jing檢jian查zha，了le解jie情qing況kuang。

6、問題的分析和處理編輯通過日常管理
、檢測

、jianzha
，lejieguanghexijundeshengchangqingkuang
，jiukeyijiehedangshihuanjingtiaojiandebianhuajinxingfenxi，zhaochuyingxiangguanghexijunshengchangfanzhideyuanyin
，caiquxiangyingdecuoshi。yingxiangguanghexijunshengchangdeyuanyinhenduo
，neiyinshijunzhongshifouyouliang，waiyinshiguangzhao
、溫度、營養
、敵害和厭氣程度等。溫度、光照和pH值都能影響著光合細菌的生長，而且溫度、光照和pH值之間是互相製約的
，溫度與光照的強弱是對立統一的
，所以光合細菌生長的最適條件應是互應的，即溫度高，光照應弱

；溫度低
，光照應強。如果是溫度高，光照強，pH值就會迅速升高，培養基產生沉澱，抑製光台細菌的生長；如果溫度低，光照弱，光合細菌得不到最佳能源，生長速度也慢。

經試驗得出光合細菌生長的最適條件是：
①溫度15～20℃時，光照30000～50000lx，培養基pH值為7.0
；
②溫度25～30℃時，光照為3000～5000lx，培養基的pH值為7.0。