液相色譜總有氣泡怎麼辦?總結起來可以分類7種原因,這裏整理了7種故障原因及解決方法,一旦遇到這些故障可以對照進行解決。
情況一:
溶劑混合時,由於兩種液體熱力學體積的變化,會產生氣泡;混合時放熱或者吸熱易產生氣泡,比如:甲jia醇chun和he水shui混hun合he屬shu於yu放fang熱re,乙yi腈jing和he水shui混hun合he屬shu於yu吸xi熱re。通tong常chang用yong量liang筒tong混hun合he後hou明ming顯xian看kan到dao體ti積ji的de增zeng減jian,而er且qie有you許xu多duo小xiao氣qi泡pao產chan生sheng,掛gua在zai瓶ping壁bi上shang,或huo者zhe晃huang一yi下xia可ke以yi看kan到dao許xu多duo小xiao氣qi泡pao存cun在zai液ye體ti中zhong。
解決辦法:對溶劑過濾,超聲脫氣(常用),尤you其qi是shi乙yi腈jing和he水shui混hun合he後hou,超chao聲sheng脫tuo氣qi時shi間jian要yao長chang一yi些xie,也ye可ke以yi通tong過guo其qi他ta方fang法fa脫tuo氣qi,例li如ru安an裝zhuang在zai線xian脫tuo氣qi機ji,充chong氮dan脫tuo氣qi等deng。處chu理li好hao的de液ye體ti在zai使shi用yong過guo程cheng中zhong應ying該gai保bao持chi室shi內nei溫wen度du恒heng定ding。
情況二:
rongjilvtouwuran,daozhibengzaixiyeguochengzhongxilibujunyunerqiangzhixiyecongerchanshengweixiaodezhenkongqipao。cishihuiguanchadaojinyeguanbishangfenbuxuduohenxiaodeqipao,youdezaidongyoudetingliuzaiguanbishang,huozheganjiaoliusubishedingzhixiao,yaliyebuwen。
解決辦法:先觀察現象確認,再排除。用5%-10%的稀硝酸浸泡過夜(怕超聲的濾頭)或者超聲處理數小時(可以超聲的濾頭),ranhouyongchunshuijinpaoguoyehuozhechaoshengchuli,zhuyihuanshuiduochulijici,xidiaosuandecanliu,zuihouyongyoujixiangjiachunjinpaochulihuozhechaoshengjike。ruoshangshuchuliweiguo,xugenghuanxinderongjilvtou。
情況三:
流動相放好後,沒有排氣,就開始運行泵,易產生氣泡。
解決辦法:放好流動相後,打開旁通閥,用注射器慢慢吸液,觀察進液管無氣泡後再吸10ml將流路中的空氣驅趕幹淨,旋緊旁通閥後再運行泵,或者是打開旁通閥大流速排液,觀察進液管無氣泡後,再排氣2min將流路中的空氣驅趕幹淨,旋緊旁通閥後再運行泵。
情況四:
單向閥或者泵頭內部汙染。(泵的壓力波動一般在100psi以上就要考慮了)泵beng頭tou是shi壓ya力li變bian化hua最zui劇ju烈lie的de地di方fang,也ye是shi最zui易yi產chan生sheng氣qi泡pao的de地di方fang,泵beng頭tou靠kao負fu壓ya而er吸xi液ye,而er負fu壓ya必bi然ran使shi流liu動dong相xiang中zhong的de小xiao氣qi泡pao長chang大da,當dang泵beng腔qiang變bian正zheng壓ya時shi,已yi長chang大da的de氣qi泡pao未wei必bi能neng全quan部bu變bian小xiao流liu入ru後hou續xu液ye路lu,則ze泵beng腔qiang內nei將jiang積ji存cun氣qi泡pao,從cong而er影ying響xiang吸xi液ye精jing度du。
解決辦法:小(xiao)心(xin)拆(chai)下(xia)泵(beng)頭(tou),用(yong)甲(jia)醇(chun)超(chao)聲(sheng)清(qing)洗(xi)單(dan)向(xiang)閥(fa)以(yi)及(ji)內(nei)部(bu)密(mi)封(feng)圈(quan)和(he)泵(beng)頭(tou)整(zheng)體(ti),用(yong)棉(mian)花(hua)沾(zhan)甲(jia)醇(chun)擦(ca)拭(shi)柱(zhu)塞(sai)杆(gan)。必(bi)要(yao)時(shi)更(geng)換(huan)單(dan)向(xiang)閥(fa),密(mi)封(feng)圈(quan),柱(zhu)塞(sai)杆(gan)等(deng)。
情況五:
進樣時帶入氣泡,吸樣時帶到進樣針中氣泡。
解決辦法:在進樣前,注意排出進樣針裏的空氣,將進樣針頭垂直向上,用手指墊上濾紙摁住針頭處,往上推,氣泡很容易就上去了,排出即可。
情況六:
色譜柱進氣泡。
解決辦法:用純甲醇低流速(0.2-0.3ml/min)長時間衝洗反相色譜柱,隨後可逐步加大流速,最大加到1ml/min,直至色譜柱壓力穩定。或者更換色譜柱。
情況七:
流(liu)通(tong)池(chi)是(shi)易(yi)積(ji)存(cun)氣(qi)泡(pao)的(de)地(di)方(fang),其(qi)對(dui)基(ji)線(xian)影(ying)響(xiang)較(jiao)大(da),流(liu)動(dong)相(xiang)流(liu)入(ru)色(se)譜(pu)柱(zhu)後(hou),壓(ya)力(li)越(yue)來(lai)越(yue)小(xiao),微(wei)小(xiao)氣(qi)泡(pao)將(jiang)逐(zhu)漸(jian)長(chang)大(da),而(er)流(liu)通(tong)池(chi)截(jie)麵(mian)積(ji)相(xiang)對(dui)較(jiao)大(da),則(ze)氣(qi)泡(pao)在(zai)池(chi)內(nei)易(yi)長(chang)大(da),在(zai)無(wu)外(wai)壓(ya)的(de)情(qing)況(kuang)下(xia),很(hen)難(nan)縮(suo)小(xiao)到(dao)管(guan)路(lu)內(nei)徑(jing)以(yi)下(xia)流(liu)出(chu)流(liu)通(tong)池(chi),從(cong)而(er)存(cun)在(zai)了(le)池(chi)內(nei),導(dao)致(zhi)基(ji)線(xian)很(hen)亂(luan)。
解決辦法:在廢液出口處加反壓調節器(壓力一般在150psi左右),為流通池提供一個背壓;其次是用手指堵廢液管出液端,眼看泵柱壓上升(約2-3s),鬆(song)開(kai),且(qie)同(tong)時(shi)看(kan)檢(jian)測(ce)器(qi)顯(xian)示(shi)屏(ping)上(shang)吸(xi)光(guang)度(du)值(zhi)的(de)變(bian)化(hua)。如(ru)果(guo)池(chi)內(nei)有(you)氣(qi)泡(pao),則(ze)手(shou)指(zhi)堵(du)廢(fei)液(ye)管(guan),吸(xi)光(guang)度(du)值(zhi)將(jiang)劇(ju)烈(lie)變(bian)化(hua),當(dang)手(shou)鬆(song)開(kai)後(hou)吸(xi)光(guang)度(du)值(zhi)再(zai)次(ci)大(da)步(bu)上(shang)升(sheng),證(zheng)明(ming)池(chi)內(nei)有(you)氣(qi)泡(pao)但(dan)沒(mei)有(you)排(pai)掉(diao),當(dang)手(shou)指(zhi)堵(du)住(zhu)和(he)鬆(song)開(kai)廢(fei)液(ye)管(guan)時(shi),吸(xi)光(guang)度(du)值(zhi)基(ji)本(ben)不(bu)變(bian)時(shi),證(zheng)明(ming)排(pai)汽(qi)泡(pao)成(cheng)功(gong),再(zai)觀(guan)察(cha)基(ji)線(xian)將(jiang)穩(wen)定(ding)(此過程需要重複10-20次)。
液相色譜係統存有氣泡的原因不止7種,如果發生存在氣泡的情況,不妨先分析這7種原因,如還是不能解決可以聯係儀器設備的售後工程師協助解決。
文章(文字)來源:網絡。
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