檢(jian)測(ce)器(qi)的(de)作(zuo)用(yong)是(shi)將(jiang)色(se)譜(pu)柱(zhu)流(liu)出(chu)物(wu)中(zhong)樣(yang)品(pin)組(zu)成(cheng)和(he)含(han)量(liang)的(de)變(bian)化(hua)轉(zhuan)化(hua)為(wei)可(ke)供(gong)檢(jian)測(ce)的(de)信(xin)號(hao),從(cong)而(er)定(ding)性(xing)定(ding)量(liang)分(fen)析(xi)待(dai)測(ce)組(zu)分(fen)。對(dui)於(yu)大(da)部(bu)分(fen)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)操(cao)作(zuo)人員來說,基本都掌握了儀器分析原理和操作方法,但對於儀器內部各部件的類型和適用條件不是非常熟悉,往往是有什麼用什麼,一概而定,尤其是檢測器,不同的檢測器其使用範圍有所不同,如果不熟悉檢測器而一味按照既定的實驗方法,可能會引起不必要的誤差甚至是實驗失敗。因此需要掌握不同檢測器的原理。液相色譜常用的檢測器包括紫外檢測器、熒光檢測器、示差折光檢測器、蒸發光散射檢測器、化學發光檢測器、質譜檢測器等。
紫外檢測器(UVD)
是目前液相色譜中應用最廣泛的檢測器。自然界中大部分有機物和部分無機物都具有紫外吸收能力,UV檢測器根據化合物對紫外光的吸收能力,通過二極管將光信號轉變為電信號,從而進行分析。它ta有you兩liang個ge流liu通tong池chi,一yi個ge作zuo參can比bi,一yi個ge作zuo測ce量liang用yong,光guang源yuan發fa出chu的de紫zi外wai光guang照zhao射she到dao流liu通tong池chi上shang,若ruo兩liang流liu通tong池chi都dou通tong過guo純chun的de均jun勻yun溶rong劑ji,則ze它ta們men在zai紫zi外wai波bo長chang下xia幾ji乎hu無wu吸xi收shou,光guang電dian管guan上shang接jie受shou到dao的de輻fu射she強qiang度du相xiang等deng,無wu信xin號hao輸shu出chu。當dang組zu分fen進jin入ru測ce量liang池chi時shi,吸xi收shou一yi定ding的de紫zi外wai光guang,使shi兩liang光guang電dian管guan接jie受shou到dao的de輻fu射she強qiang度du不bu等deng,這zhe時shi有you信xin號hao輸shu出chu,輸shu出chu信xin號hao大da小xiao與yu組zu分fen濃nong度du有you關guan。
使用過紫外檢測器的人應該都會發現,很多標準方法中都是以254nm作為檢測波長的,那為什麼是這個波長呢?因為在液相色譜檢測器的發展過程中使用最久的是低壓汞燈,而汞的最大發射波長是253.7nm,也就是說在254nm波長下,燈能量最高,檢測靈敏度最好。但現階段,很多紫外檢測器采用的是氘燈,這時候254nm的檢測波長其實意義不大,氘燈的使用範圍一般是190-800nm,需(xu)要(yao)考(kao)慮(lv)化(hua)合(he)物(wu)的(de)最(zui)大(da)吸(xi)收(shou)波(bo)長(chang)並(bing)且(qie)避(bi)開(kai)流(liu)動(dong)相(xiang)的(de)吸(xi)收(shou)幹(gan)擾(rao)來(lai)選(xuan)擇(ze)合(he)適(shi)的(de)檢(jian)測(ce)波(bo)長(chang)。這(zhe)就(jiu)限(xian)製(zhi)了(le)其(qi)流(liu)動(dong)相(xiang)的(de)選(xuan)擇(ze)範(fan)圍(wei),一(yi)般(ban)檢(jian)測(ce)波(bo)長(chang)要(yao)避(bi)開(kai)溶(rong)劑(ji)截(jie)止(zhi)波(bo)長(chang)20nm以上。
熒光檢測器(FLD)
是目前液相色譜靈敏度最高的檢測器,應用廣泛,選擇性強。適用於能激發熒光的化合物。很多與生命科學有關的物質,如氨基酸、胺類、維生素、zaizuhuahewujimouxiedaixieyaowudoukeyiyongyingguangfajiance。yingguangjianceqizaishengwuyangpinhenliangfenxizhongjuyouzhongyaozuoyong,youqizaiyongyingguangyanshenghou,keyijiancehenweiliangdeanjisuanhetai。zaishiyanguochengzhongxuyaoyangetuoqi,yinweixitongzhongcanliudeyangqihuiyinfayingguangcuimiefanying,zaochengfengmianjidafuxiajiangshenzhibuchufeng。
示差折光檢測器(RID)
是一種通用型檢測器,利用物質的折光效應,對所有物質均有響應,隻要被測組分與洗脫液的折光指數有差別就可使用。生命科學中常遇到各類糖類化合物、脂肪烷烴等,沒有紫外吸收,一般常用示差折光檢測器。它的通用性比UVDguang,danlingminduyaodi,duiwendubianhuamingan,shisuoyoujianceqizhongduiwenduyaoqiuzuigaode。lingwai,butongdeliudongxiangbili,qimiduhuozhezheguangxishubutong,ruguoliudongxiangbilifashenggaibian,zehuiyinqijixiandechixubianhua,yincishichazheguangjianceqizhinengcaiyongdengduxituo,bunengcaiyongtiduxituo,zheyexianzhiletadeshiyong。
蒸發光散射檢測器(ELSD)
也(ye)是(shi)一(yi)種(zhong)通(tong)用(yong)型(xing)的(de)檢(jian)測(ce)器(qi),原(yuan)理(li)是(shi)利(li)用(yong)光(guang)散(san)射(she)效(xiao)應(ying),可(ke)檢(jian)測(ce)揮(hui)發(fa)性(xing)低(di)於(yu)流(liu)動(dong)相(xiang)的(de)任(ren)何(he)樣(yang)品(pin),通(tong)過(guo)霧(wu)化(hua)器(qi)去(qu)除(chu)溶(rong)劑(ji),讓(rang)化(hua)合(he)物(wu)形(xing)成(cheng)懸(xuan)浮(fu)顆(ke)粒(li),從(cong)而(er)形(xing)成(cheng)散(san)射(she)效(xiao)應(ying)。ELSD靈敏度比RID高(gao),對(dui)溫(wen)度(du)變(bian)化(hua)不(bu)敏(min)感(gan),基(ji)線(xian)穩(wen)定(ding),可(ke)用(yong)於(yu)梯(ti)度(du)洗(xi)脫(tuo),並(bing)且(qie)可(ke)在(zai)沒(mei)有(you)標(biao)準(zhun)品(pin)和(he)化(hua)合(he)物(wu)結(jie)構(gou)參(can)數(shu)未(wei)知(zhi)的(de)情(qing)況(kuang)下(xia)檢(jian)測(ce)未(wei)知(zhi)化(hua)合(he)物(wu),但(dan)不(bu)能(neng)使(shi)用(yong)不(bu)揮(hui)發(fa)的(de)鹽(yan)類(lei)溶(rong)劑(ji),而(er)要(yao)用(yong)醋(cu)酸(suan)銨(an)之(zhi)類(lei)的(de)揮(hui)發(fa)性(xing)緩(huan)衝(chong)鹽(yan)來(lai)代(dai)替(ti)。現在ELSD已被廣泛應用於碳水化合物、類脂、脂肪酸和氨基酸、藥物以及聚合物等的檢測。
化學發光檢測器(CD)
化學發光檢測器是近年來發展起來的一種快速、靈敏的新型檢測器,因其設備簡單、價廉、線性範圍寬等優點。其qi原yuan理li是shi基ji於yu某mou些xie物wu質zhi在zai常chang溫wen下xia進jin行xing化hua學xue反fan應ying,生sheng成cheng處chu於yu激ji發fa態tai勢shi反fan應ying中zhong間jian體ti或huo反fan應ying產chan物wu,當dang它ta們men從cong激ji發fa態tai返fan回hui基ji態tai時shi,就jiu發fa射she出chu光guang子zi。由(you)於(yu)物(wu)質(zhi)激(ji)發(fa)態(tai)的(de)能(neng)量(liang)是(shi)來(lai)自(zi)化(hua)學(xue)反(fan)應(ying),故(gu)叫(jiao)作(zuo)化(hua)學(xue)發(fa)光(guang)。當(dang)分(fen)離(li)組(zu)分(fen)從(cong)色(se)譜(pu)柱(zhu)中(zhong)洗(xi)脫(tuo)出(chu)來(lai)後(hou),立(li)即(ji)與(yu)適(shi)當(dang)的(de)化(hua)學(xue)發(fa)光(guang)試(shi)劑(ji)混(hun)合(he),引(yin)起(qi)化(hua)學(xue)反(fan)應(ying),導(dao)致(zhi)發(fa)光(guang)物(wu)質(zhi)產(chan)生(sheng)輻(fu)射(she),其(qi)光(guang)強(qiang)度(du)與(yu)該(gai)物(wu)質(zhi)的(de)濃(nong)度(du)成(cheng)正(zheng)比(bi)。該(gai)檢(jian)測(ce)器(qi)不(bu)需(xu)要(yao)光(guang)源(yuan),也(ye)不(bu)需(xu)要(yao)複(fu)雜(za)的(de)光(guang)學(xue)係(xi)統(tong),隻(zhi)要(yao)有(you)恒(heng)流(liu)泵(beng),將(jiang)化(hua)學(xue)發(fa)光(guang)試(shi)劑(ji)以(yi)一(yi)定(ding)的(de)流(liu)速(su)泵(beng)入(ru)混(hun)合(he)器(qi)中(zhong),使(shi)之(zhi)與(yu)柱(zhu)流(liu)出(chu)物(wu)迅(xun)速(su)而(er)又(you)均(jun)勻(yun)地(di)混(hun)合(he)產(chan)生(sheng)化(hua)學(xue)發(fa)光(guang),通(tong)過(guo)光(guang)電(dian)倍(bei)增(zeng)管(guan)將(jiang)光(guang)信(xin)號(hao)變(bian)成(cheng)電(dian)信(xin)號(hao),就(jiu)可(ke)進(jin)行(xing)檢(jian)測(ce)。這(zhe)種(zhong)檢(jian)測(ce)器(qi)的(de)最(zui)小(xiao)檢(jian)出(chu)量(liang)可(ke)10-12g。
質譜檢測器(MSD)
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