薄層分析法(TLC)
TLCfashijiancehuangqumeisuzuiweijingdiandefangfa,yeshiyiqianzuiweichangyongdefangfa,zhijinrengweiyixiejiancejigousuoyong,yeshiyizhongguobiaofangfa。qiyuanlishizhenduibutongdeshiyang,yongshiyidecuiqurongjijianghuangqumeisucongshiyangzhongcuiquchulai,jingzhucengxijinghuahou,zaizaibobanshangzhankaihoufenli。
利li用yong黃huang曲qu黴mei素su的de熒ying光guang特te性xing,根gen據ju熒ying光guang斑ban點dian的de強qiang弱ruo與yu標biao準zhun比bi較jiao確que定ding其qi含han量liang,對dui於yu一yi些xie組zu分fen很hen複fu雜za的de試shi樣yang要yao雙shuang向xiang展zhan開kai,才cai能neng獲huo得de較jiao高gao的de靈ling敏min度du。
TLC法設備簡單,檢測費用低,但操作繁瑣、費時,萃取和淨化效果不理想,靈敏度差,對操作人員的身體健康存在較大程度的危害。
液相色譜法(HPLC)
HPLC法fa是shi近jin年nian來lai發fa展zhan起qi來lai的de一yi種zhong檢jian測ce方fang法fa。其qi原yuan理li是shi在zai高gao效xiao液ye相xiang色se譜pu儀yi上shang添tian加jia柱zhu後hou衍yan生sheng係xi統tong分fen離li,再zai用yong熒ying光guang檢jian測ce器qi測ce定ding。與yu其qi配pei套tao的de柱zhu後hou衍yan生sheng係xi統tong有you碘dian衍yan生sheng化hua法fa、溴衍生化法及較為先進的電化學衍生化法和光化學衍生化法。當前,該方法大多用免疫親和柱來淨化、分離,其淨化效果優異。
該法能準確地分離不同種類的黃曲黴素(例如:AFB1、AFB2、AFG1和AFM1等),檢(jian)測(ce)速(su)度(du)快(kuai)且(qie)定(ding)性(xing)與(yu)定(ding)量(liang)準(zhun)確(que),檢(jian)測(ce)限(xian)低(di),可(ke)作(zuo)為(wei)仲(zhong)裁(cai)法(fa)使(shi)用(yong),但(dan)儀(yi)器(qi)設(she)備(bei)價(jia)格(ge)昂(ang)貴(gui),前(qian)處(chu)理(li)方(fang)法(fa)相(xiang)對(dui)繁(fan)瑣(suo),若(ruo)用(yong)到(dao)免(mian)疫(yi)親(qin)和(he)柱(zhu)則(ze)會(hui)使(shi)試(shi)樣(yang)檢(jian)測(ce)費(fei)用(yong)增(zeng)加(jia),對(dui)操(cao)作(zuo)人(ren)員(yuan)的(de)身(shen)體(ti)健(jian)康(kang)仍(reng)存(cun)在(zai)一(yi)定(ding)的(de)危(wei)害(hai)。
酶聯免疫法(ELISA)
ELISA法(fa)也(ye)是(shi)近(jin)年(nian)來(lai)研(yan)究(jiu)開(kai)發(fa)出(chu)來(lai)的(de)一(yi)種(zhong)較(jiao)為(wei)新(xin)穎(ying)的(de)方(fang)法(fa)。其(qi)原(yuan)理(li)是(shi)根(gen)據(ju)抗(kang)體(ti)和(he)抗(kang)原(yuan)之(zhi)間(jian)特(te)異(yi)性(xing)的(de)免(mian)疫(yi)學(xue)反(fan)應(ying),最(zui)後(hou)用(yong)測(ce)定(ding)酶(mei)活(huo)力(li)的(de)方(fang)法(fa)來(lai)增(zeng)加(jia)測(ce)定(ding)的(de)靈(ling)敏(min)度(du)。
該方法檢測速度快、對人體危害小、但重複性差、試劑壽命短、需低溫保存、假陽性概率較高、需要配置專門的酶標儀,且對一些富含鹽和脂肪的試樣需進行額外的處理。
毛細管電泳法(CE)
毛細管電泳(CE)也是一種新發展起來的分析黃曲黴素的方法。該方法與激光減弱熒光檢測器(LIF)連用可很好地提高靈敏度。
Wei等用毛細管電泳一激光減弱熒光檢測器測定AFB1、AFB2、AFG1和AFG1,取得了較為理想的分離效果,其中對AFB2的測定最為靈敏。但CE法的成本較高,操作複雜,不適宜在試樣檢測中廣泛應用。
熒光光度法(IAC/SFB)
IA C/SFB法也是一種常用的國標方法。該方法的原理是利用各種黃曲黴素的熒光特性差異用熒光光度計測定試樣中黃曲黴素的含量。
該(gai)方(fang)法(fa)對(dui)檢(jian)測(ce)人(ren)員(yuan)身(shen)體(ti)健(jian)康(kang)無(wu)危(wei)害(hai),檢(jian)測(ce)速(su)度(du)迅(xun)速(su),靈(ling)敏(min)度(du)高(gao),適(shi)用(yong)於(yu)大(da)量(liang)試(shi)樣(yang)檢(jian)測(ce),且(qie)定(ding)量(liang)準(zhun)確(que),但(dan)檢(jian)測(ce)費(fei)用(yong)較(jiao)高(gao),需(xu)要(yao)配(pei)置(zhi)專(zhuan)用(yong)設(she)備(bei),且(qie)不(bu)能(neng)對(dui)單(dan)一(yi)的(de)毒(du)素(su)進(jin)行(xing)檢(jian)測(ce)。
金標試紙法
金標試紙法,實際就是一種固相免疫分析法。其原理是利用抗體與抗原的特異性結合反應,可一步檢測黃曲黴素。
該法可在5~10 min內完成對試樣中黃曲黴素的定性測定,具有簡單、快速的特點,且無須其他儀器設備的配合,既可在實驗室中進行檢測,也可在現場進行實地測定,但是其檢測的準確度、精度有待進一步的研究。
生物傳感器法
生sheng物wu傳chuan感gan器qi是shi使shi用yong固gu定ding化hua技ji術shu將jiang具ju有you分fen子zi識shi別bie能neng力li的de生sheng物wu活huo性xing物wu質zhi與yu物wu理li化hua學xue換huan能neng器qi結jie合he,可ke以yi用yong來lai探tan測ce生sheng物wu體ti內nei外wai的de環huan境jing化hua學xue物wu質zhi或huo與yu之zhi起qi特te異yi性xing交jiao互hu作zuo用yong後hou產chan生sheng響xiang應ying的de一yi種zhong裝zhuang置zhi。其qi中zhong利li用yong分fen子zi間jian特te異yi親qin和he性xing製zhi備bei的de親qin和he型xing生sheng物wu傳chuan感gan器qi為wei免mian疫yi傳chuan感gan器qi口kou。
根據能量轉換器所傳導的物理或化學信號的不同,免疫傳感器可分為電化學免疫傳感器、光學免疫傳感器、壓電晶體免疫傳感器等。由於生物傳感器具有選擇性高、響應快、操作簡單、攜帶方便和適合於現場檢測等優點,因此各國科研工作者正積極探索研製新型生物傳感器用於檢測黃曲黴素。
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