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51.通常我們在分析天然藥物成分的時候結構複雜，無法考察組分的PKa值，哪我們如何去選擇最合適的流動相或者是拖尾該怎麼改善呢？
答：如果天然產物中沒有易電離的極性基團，就不需要用緩衝鹽調節pH。如果，天然產物中既有酸性基團，也有堿性基團，譬如，有pKa=6.2的羧基和pKa=9.0的氨基的兩性物質，建議將pH用磷酸鹽緩衝鹽控製在2.4（如果是，諸如月旭的Ultimate LP-C18這樣的耐酸色譜柱，還可以調得更低）。
如果pH控製在6.2～9.0之間，兩個基團都處於離子態，保留能力最差，是最不可取的。如果不清楚複雜物質中含有什麼基團，也請將pH調到2.4或更低。因為pH調低，起碼抑製了酸性基團的電離而處於中性分子狀態，而增加酸性基團這個部分在反相色譜中的保留能力；另外，低pH還抑製了矽醇基的活性，有利於獲取對稱的峰形。
情況不明時候，為什麼不建議調高pH呢？一方麵一般色譜柱都不能承受pH=9以上的條件；即使是像月旭的X-timate係列一樣能耐12.5的柱子，調高pH和調低pH相比，還有一個矽醇基活性大的劣勢。
52.記得以前拿到C18柱(zhu)，會(hui)用(yong)甲(jia)醇(chun)從(cong)小(xiao)流(liu)量(liang)到(dao)大(da)流(liu)量(liang)慢(man)慢(man)活(huo)化(hua)，這(zhe)樣(yang)做(zuo)的(de)目(mu)的(de)是(shi)什(shen)麼(me)呢(ne)？是(shi)先(xian)用(yong)溶(rong)劑(ji)活(huo)化(hua)嗎(ma)？然(ran)後(hou)再(zai)用(yong)樣(yang)品(pin)？還(hai)有(you)測(ce)定(ding)短(duan)肽(tai)總(zong)是(shi)衝(chong)出(chu)來(lai)，該(gai)怎(zen)麼(me)解(jie)決(jue)呢(ne)？就(jiu)是(shi)和(he)溶(rong)劑(ji)峰(feng)出(chu)在(zai)一(yi)起(qi)，或(huo)者(zhe)出(chu)在(zai)溶(rong)劑(ji)峰(feng)之(zhi)前(qian)。
答：C18柱(zhu)，會(hui)用(yong)甲(jia)醇(chun)從(cong)小(xiao)流(liu)量(liang)到(dao)大(da)流(liu)量(liang)慢(man)慢(man)活(huo)化(hua)，因(yin)為(wei)，色(se)譜(pu)柱(zhu)到(dao)達(da)用(yong)戶(hu)手(shou)中(zhong)時(shi)，時(shi)間(jian)長(chang)短(duan)不(bu)一(yi)，在(zai)存(cun)儲(chu)和(he)運(yun)輸(shu)的(de)過(guo)程(cheng)中(zhong)，可(ke)能(neng)存(cun)儲(chu)液(ye)有(you)些(xie)揮(hui)發(fa)，低(di)流(liu)速(su)的(de)甲(jia)醇(chun)可(ke)以(yi)很(hen)好(hao)的(de)浸(jin)潤(run)固(gu)定(ding)相(xiang)，使(shi)鍵(jian)合(he)相(xiang)很(hen)好(hao)的(de)伸(shen)展(zhan)，用(yong)溶(rong)劑(ji)平(ping)衡(heng)好(hao)係(xi)統(tong)後(hou)，可(ke)以(yi)采(cai)取(qu)多(duo)次(ci)進(jin)樣(yang)或(huo)者(zhe)加(jia)大(da)進(jin)樣(yang)量(liang)的(de)方(fang)式(shi)以(yi)更(geng)快(kuai)的(de)獲(huo)得(de)重(zhong)現(xian)的(de)色(se)譜(pu)圖(tu)，這(zhe)樣(yang)用(yong)樣(yang)品(pin)將(jiang)色(se)譜(pu)柱(zhu)中(zhong)的(de)活(huo)化(hua)點(dian)飽(bao)和(he)，就(jiu)不(bu)會(hui)出(chu)現(xian)異(yi)常(chang)色(se)譜(pu)現(xian)象(xiang)的(de)情(qing)況(kuang)。
53.C18柱如果之前曾有些天一直保存在酸性環境中，會對柱子有什麼損壞嗎？pH在2左右。
答：pH=2左右容易使鍵合在矽膠基質上的固定相水解流失，包括：C18和(he)封(feng)尾(wei)試(shi)劑(ji)的(de)水(shui)解(jie)，封(feng)尾(wei)試(shi)劑(ji)相(xiang)對(dui)更(geng)容(rong)易(yi)水(shui)解(jie)。不(bu)知(zhi)道(dao)你(ni)保(bao)存(cun)的(de)酸(suan)性(xing)環(huan)境(jing)是(shi)不(bu)是(shi)含(han)有(you)緩(huan)衝(chong)鹽(yan)，如(ru)果(guo)，不(bu)含(han)緩(huan)衝(chong)鹽(yan)，隻(zhi)是(shi)短(duan)期(qi)幾(ji)天(tian)保(bao)存(cun)在(zai)酸(suan)性(xing)流(liu)動(dong)相(xiang)中(zhong)，也(ye)不(bu)必(bi)過(guo)份(fen)擔(dan)心(xin)，最(zui)多(duo)相(xiang)當(dang)於(yu)這(zhe)幾(ji)天(tian)一(yi)直(zhi)在(zai)使(shi)用(yong)這(zhe)根(gen)色(se)譜(pu)柱(zhu)，因(yin)此(ci)減(jian)少(shao)幾(ji)天(tian)的(de)使(shi)用(yong)壽(shou)命(ming)吧(ba)；有緩衝鹽就麻煩一點，保存期間水分揮發可能會導致緩衝鹽結晶在柱內析出，對柱子損傷很大。
54.色譜柱的安裝有什麼技巧嗎？隻要保證不漏就行了嗎？還有所謂的死體積怎麼測定呢？
答：sepuzhuanzhuangjiqiaobuduo，zhiyaojietouhezhutoupipei，queshiningjinbuloujiukeyile，danyeyaozhuyibuyaoningdetaijinyizhiyusunshangluowen。suoweisitijijiushiwanquanbubaoliudewuzhichufengshicongjinyangdaoliuguosepuzhudezongtiji，yibanyongjixingfeichangqiangdeniaomidingdechufenglaiceding。sitijibaokuozhutiji（色譜柱內溶劑能占據的空腔體積）和柱外體積兩部分。
你從廠商這裏買到色譜柱，柱體積已經是固定了，你能盡量避免減少的是柱外體積。進樣器內死體積、毛細管長度、maoxiguanhesepuzhulianjiejincouyufou，baohuzhuhuozaixianlvqichanshengdesitijidaxiao，douduizhegeyouyingxiang。yangpinzaizhunei，chukuosanwai，haiyouhetianliaozuoyongyinqidezufenfenli；但樣品在柱外，那就隻有擴散這個使柱效下降的因素了。所以，要取得好的分離效率，柱外體積應該是越小越好。
fengyoushihouqianyan，youshihoutuowei，yibanbushisepuzhudewenti，yinggaishiyangpinhesepuzhutianliaodezuoyongwenti，keyishuoruguosepuzhuleixingxuanzemeiwenti，guanjianjiushiseputiaojiandexuanze。baokuojinyangliang、樣品溶劑、流動相組成（包括：添加劑）、流動相pHyijizhuwen，douduifengxingyouyingxiang。lingwai，cedingfenziliangjiaodadeduotai，yongyangpinlaohuapinghengsepuzhuhenzhongyao，fenziliangyuedadewuzhi，xuyaopinghengshijianyuechang。ruguozhuzimeipinghenghao，fengxingyekenenghuibuzhengchang。suoyizuihaobanijutidecedingtiaojianyelieyixia，yebianyuyouzhenduixingdefenxiyuanyin。
55.測(ce)定(ding)多(duo)肽(tai)樣(yang)品(pin)時(shi)，十(shi)幾(ji)肽(tai)或(huo)者(zhe)二(er)十(shi)幾(ji)肽(tai)時(shi)，有(you)時(shi)峰(feng)前(qian)延(yan)的(de)比(bi)較(jiao)厲(li)害(hai)，有(you)時(shi)峰(feng)拖(tuo)尾(wei)比(bi)較(jiao)厲(li)害(hai)，這(zhe)是(shi)什(shen)麼(me)原(yuan)因(yin)呢(ne)？是(shi)樣(yang)品(pin)的(de)問(wen)題(ti)還(hai)是(shi)柱(zhu)子(zi)的(de)問(wen)題(ti)？
答：峰feng有you時shi候hou前qian延yan，有you時shi候hou拖tuo尾wei，一yi般ban不bu是shi色se譜pu柱zhu的de問wen題ti，應ying該gai是shi樣yang品pin和he色se譜pu柱zhu填tian料liao的de作zuo用yong問wen題ti，可ke以yi說shuo如ru果guo色se譜pu柱zhu類lei型xing選xuan擇ze沒mei問wen題ti，關guan鍵jian就jiu是shi色se譜pu條tiao件jian的de選xuan擇ze，包bao括kuo：進樣量、樣品溶劑、流動相組成（包括：添加劑）、流動相pHyijizhuwen，douduifengxingyouyingxiang，lingwai，cedingfenziliangjiaodadeduotai，yongyangpinlaohuapinghengsepuzhuhenzhongyao，fenziliangyuedadewuzhi，xuyaopinghengshijianyuechang。ruguozhuzimeipinghenghao，fengxingyekenenghuibuzhengchang。suoyizuihaobanijutidecedingtiaojianyelieyixia，yebianyuyouzhenduixingdefenxiyuanyin。
56.柱子的平衡時間跟填料關係大嗎？哪種最快，哪種最慢？因為我在做離子交換柱的時候平衡是相當的慢!
答：根據色譜速率理論，粒徑越小，柱效越高，而且當粒徑小到亞2微米左右時，線速度的提高，其分離度就不再降低，從而，改變了許久以來人們不得不在 “速度和分離度之間取舍”的局麵。
57.關於配置流動相，有機相我們可以甲醇乙腈同時用，這個是基於什麼考慮的？是不是根據甲醇乙腈選擇性不同、樣品在這個兩者的溶解度的差異以及調節洗流動相脫能力來考慮的？
答：甲醇和乙腈同時用，可以獲得單純的甲醇或者乙腈不一樣的選擇性，而且洗脫能力也會改變，根據多元流動相的強度因素Sab.....=Saψa+Sbψb=...Sa和Sb純溶劑a和b的溶劑強度因素；ψa、ψb分別為a和b的體積分數，所以，在藥典中有很多體係都使用甲醇乙腈體係。
58.三乙胺磷酸鹽緩衝液作流動相，柱壓一天比一天高，該怎麼樣解決？
答：把柱子再生下，再生的方法搜一下有很多反衝對絕大部分色譜柱都是可行的，效果不錯。
59.新出廠液相色譜柱，保護溶劑一般是什麼？怎樣進行平衡清洗比較好，一般要平衡多長時間比較好？
答：柱子類型不同，保存溶劑也會不一樣吧，具體要看說明書的說明。對於反相柱，一般用甲醇（乙腈）保存，也有用80%左右甲醇濃度的甲醇/水保存的。一般用流動相平衡衝洗10～20個柱體積即可。（注意：柱體積不等於空柱管體積，4.6×250mm的色譜柱空柱管體積是4.15mL，而柱體積隻有約2.5mL）
60.據說液相色譜柱柱壓達到一定高度就不能使用了，請問一般達到多高，用甲醇和乙腈是不是不一樣？
答：柱壓不是色譜柱不能使用的唯一因素，分離度才是最重要的。柱壓隻要沒高到儀器不能承受的地步，例如，超過300bar，就(jiu)可(ke)以(yi)一(yi)直(zhi)使(shi)用(yong)。甲(jia)醇(chun)的(de)粘(zhan)度(du)比(bi)乙(yi)腈(jing)高(gao)，同(tong)樣(yang)狀(zhuang)況(kuang)的(de)柱(zhu)子(zi)，如(ru)果(guo)用(yong)甲(jia)醇(chun)做(zuo)流(liu)動(dong)相(xiang)，柱(zhu)壓(ya)可(ke)能(neng)超(chao)了(le)，換(huan)用(yong)乙(yi)腈(jing)會(hui)使(shi)柱(zhu)壓(ya)下(xia)降(jiang)不(bu)少(shao)，儀(yi)器(qi)還(hai)能(neng)承(cheng)受(shou)。不(bu)過(guo)盡(jin)管(guan)柱(zhu)壓(ya)還(hai)沒(mei)上(shang)升(sheng)到(dao)接(jie)近(jin)400Bar的限定，如果，發現柱壓上升速度較快，也需要及早對柱子進行清洗維護，從根本上排除導致柱壓上升的源頭。
61.柱塞板可不可拆下用超聲波清洗，會有什麼不良後果？
答：bujianyijiangzhushaibanchaixiaqingxi，yinwei，chaixiachengyadezhushaibanhuidaozhizhuchuangfashengbianhua，yingxiangsepuxingneng。yinggaiduiwurandesepuzhuxianjinxingqingxiweihu，weihumeiyouxiaoguo，zaibachaixizhushaibanzuoweizuihoudeshouduan。
62.一般正常使用一個C18柱能用多長時間？
答：柱壽命一般不按時間計算，按持續進樣針數比較科學。一般正常使用維護，不超過pH和溫度等範圍，C18柱能達到500～2000針進樣的壽命，視樣品幹淨程度的不同而不同。
63.超高壓快速高分離度色譜柱是不是未來液相色譜柱普及應用的一個發展趨勢？
答：這(zhe)是(shi)個(ge)大(da)話(hua)題(ti)，今(jin)後(hou)使(shi)用(yong)，會(hui)越(yue)來(lai)越(yue)多(duo)是(shi)肯(ken)定(ding)的(de)，但(dan)是(shi)否(fou)會(hui)替(ti)代(dai)普(pu)通(tong)壓(ya)力(li)的(de)液(ye)相(xiang)還(hai)有(you)爭(zheng)議(yi)。超(chao)高(gao)壓(ya)也(ye)有(you)使(shi)用(yong)上(shang)的(de)不(bu)便(bian)，譬(pi)如(ru)容(rong)易(yi)堵(du)，對(dui)設(she)備(bei)硬(ying)件(jian)要(yao)求(qiu)高(gao)等(deng)。有(you)機(ji)會(hui)我(wo)再(zai)談(tan)談(tan)超(chao)高(gao)壓(ya)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)方(fang)麵(mian)詳(xiang)細(xi)的(de)一(yi)些(xie)情(qing)況(kuang)。
64.如果液相色譜譜圖基線漂移很大是不是柱子的問題？波長越小的越大，270nm的還不怎麼能看出來，230nm的就非常厲害了，有可能是什麼原因造成的？
答：有可能是你的流動相的問題，230可能已經快到你流動相的截止波長了，當然，紫外吸收強，基線漂移厲害。
65.我們有一台waters1525sepuyi，zuijinjixianzongshichengxianbolangxinghenyouguilv，bochangyuexiaoyuemingxian，tiduxituoshixiangshangpiaoyierqiehouyiduanshijianchengxianbolangxing，henyingxiangfenxi，woxiangwenyixia，shibushizhuzideyuanyin，yongdeshiC18上海安普的？
答：應該是流動相組成變引起吸收本底變化造成的，特別是在波長小的時候，乙腈的截止波長低於200nm，danjiachunheshuixiangduibijiaogao，zaidibochangshi，jiachunheshuiyouyidingdebendixishou。tidujinxingshi，suizhebutongbendidezufenhanliangdebianhua，jixianyehuiyouxiangyingdebodong。
66.我是做農藥殘留分析的，用的是UV2487檢測器，想問一下，C18色譜柱用什麼緩衝液比較好，我以前做三聚氰胺是用檸檬酸，辛烷磺酸鈉，也用農藥檢測行不行？還有用HLB柱能不能去除蔬菜和水果中的雜質？
答：C18色譜柱用用磷酸鹽，醋酸鹽就比較好啊，離子對試劑不是個好東東，你要慎用。我們做三聚氰胺用三氯乙酸。
67.液相色譜柱一般使用壽命多長？不同類型的色譜柱是否壽命也不一樣？液相色譜柱與氣相的柱子有何區別呢？
答：液相色譜柱一般使用壽命多長！我有一根柱子，用了大約1年(nian)半(ban)左(zuo)右(you)，發(fa)現(xian)同(tong)樣(yang)濃(nong)度(du)的(de)樣(yang)品(pin)它(ta)的(de)峰(feng)展(zhan)寬(kuan)了(le)。說(shuo)明(ming)柱(zhu)效(xiao)下(xia)降(jiang)。但(dan)是(shi)不(bu)影(ying)響(xiang)結(jie)果(guo)。因(yin)為(wei)峰(feng)麵(mian)積(ji)還(hai)是(shi)接(jie)近(jin)。所(suo)以(yi)做(zuo)色(se)譜(pu)之(zhi)前(qian)先(xian)做(zuo)下(xia)柱(zhu)子(zi)性(xing)能(neng)測(ce)試(shi)。第(di)一(yi)次(ci)的(de)圖(tu)譜(pu)要(yao)保(bao)留(liu)。 測試C18RP柱，一般用到萘作為柱子的柱效判斷。一般是18000片，對稱性（usp）0.95～1.05間。
68.①“水相”指的是什麼？純水？②我們實驗室的CN基柱保存在40%的乙腈裏麵，這個有不良後果嗎？
答：水相就是純水。CN基不適合保存在中等極性的溶劑中，除了可以低溫保存在極性較大的純水中外，還有可以保存在非極性溶劑如正己烷中。40%乙腈水，屬於中等極性溶劑，短期過夜保存可能問題不大，長期保存不太好，後果就是可能會發生柱床坍塌。
69.CN基柱應該怎樣維護才好呢？比如，做完實驗用什麼流動相衝柱子、短期用什麼溶劑保存、長期用什麼溶劑保存等。
答：CN可作正相柱，也可作反相柱用，除了保存溶劑有特殊要求外，其它維護辦法和一般正相和反相柱沒有多大區別。
70.我們是waters的分析儀，用其他家的柱子可不可以？
答：你用Waters的儀器，而開始也用的是Waters柱(zhu)子(zi)，如(ru)果(guo)是(shi)用(yong)不(bu)鏽(xiu)鋼(gang)接(jie)頭(tou)，匝(za)扣(kou)的(de)位(wei)置(zhi)就(jiu)固(gu)定(ding)了(le)。如(ru)果(guo)用(yong)其(qi)他(ta)家(jia)的(de)柱(zhu)子(zi)，可(ke)以(yi)把(ba)固(gu)定(ding)匝(za)扣(kou)位(wei)置(zhi)的(de)那(na)段(duan)剪(jian)掉(diao)，換(huan)一(yi)個(ge)新(xin)的(de)匝(za)扣(kou)就(jiu)可(ke)以(yi)重(zhong)新(xin)固(gu)定(ding)匝(za)扣(kou)位(wei)置(zhi)。當(dang)然(ran)，如(ru)果(guo)你(ni)已(yi)換(huan)成(cheng)peek接頭，問題就不會很大。
71.色譜柱的接頭，出口處用的是peek接頭，請問都用peek接頭不行麼，為什麼？
答：都用peek接頭我認為都可以的，當然，peek接頭的質量要過關。有人認為peek接頭不耐壓，估計是針對品質不好的產品說的。
72.我們的液相，為了節約成本我們自己填保護柱，用廢的同型號柱子填。但填完以後做標樣定量分析有所改變。請問其原因。
答：不bu建jian議yi自zi己ji填tian保bao護hu柱zhu柱zhu芯xin，填tian得de不bu好hao的de柱zhu芯xin會hui影ying響xiang分fen離li效xiao果guo，也ye會hui影ying響xiang定ding量liang分fen析xi結jie果guo。你ni不bu知zhi道dao廢fei柱zhu子zi裏li的de填tian料liao是shi不bu是shi受shou了le汙wu染ran，另ling外wai你ni填tian的de柱zhu芯xin肯ken定ding沒mei有you廠chang商shang填tian得de好hao，如ru果guo影ying響xiang到dao峰feng形xing，峰feng麵mian積ji積ji分fen結jie果guo有you所suo改gai變bian是shi可ke能neng的de。
73.請問怎麼測柱效？（柱子填料是Sino Chrom ODS-BP 5μm，規格4.6mm×200mm）
答：測定柱效不同公司不一樣，有用甲苯，也有用萘的。一般柱子裏麵有檢測報告，你按照報告裏的方法做一遍就可以。
74.我wo用yong苯ben試shi了le一yi下xia，峰feng性xing大da大da好hao，但dan是shi，不bu知zhi道dao理li論lun塔ta板ban數shu，不bu知zhi道dao怎zen麼me評ping價jia，感gan覺jiao不bu大da好hao，對dui稱cheng性xing不bu好hao，有you點dian前qian延yan，柱zhu子zi才cai用yong了le四si個ge月yue，是shi什shen麼me原yuan因yin呢ne？是shi不bu是shi塌ta陷xian了le呢ne？有you什shen麼me補bu救jiu的de辦ban法fa嗎ma？
答：用(yong)了(le)四(si)個(ge)月(yue)峰(feng)形(xing)拖(tuo)尾(wei)是(shi)很(hen)正(zheng)常(chang)的(de)，需(xu)要(yao)維(wei)護(hu)清(qing)洗(xi)一(yi)下(xia)色(se)譜(pu)柱(zhu)以(yi)清(qing)除(chu)引(yin)起(qi)拖(tuo)尾(wei)的(de)柱(zhu)頭(tou)汙(wu)染(ran)。如(ru)果(guo)柱(zhu)頭(tou)塌(ta)陷(xian)，則(ze)不(bu)好(hao)辦(ban)，從(cong)其(qi)它(ta)廢(fei)柱(zhu)子(zi)裏(li)取(qu)點(dian)填(tian)料(liao)填(tian)補(bu)塌(ta)陷(xian)，可(ke)以(yi)一(yi)試(shi)，但(dan)效(xiao)果(guo)不(bu)一(yi)定(ding)好(hao)。色(se)譜(pu)柱(zhu)是(shi)耗(hao)材(cai)，測(ce)定(ding)進(jin)樣(yang)針(zhen)數(shu)如(ru)果(guo)達(da)到(dao)500以上了，也算是物有所值，物盡其用了，報廢了也不可惜。
75.流(liu)動(dong)相(xiang)裏(li)之(zhi)前(qian)有(you)酸(suan)的(de)，做(zuo)完(wan)後(hou)單(dan)純(chun)用(yong)乙(yi)腈(jing)衝(chong)洗(xi)，能(neng)把(ba)酸(suan)衝(chong)洗(xi)幹(gan)淨(jing)嗎(ma)？之(zhi)前(qian)，他(ta)們(men)是(shi)這(zhe)樣(yang)衝(chong)的(de)，現(xian)在(zai)懷(huai)疑(yi)柱(zhu)子(zi)塌(ta)陷(xian)了(le)，會(hui)不(bu)會(hui)是(shi)長(chang)時(shi)間(jian)在(zai)酸(suan)性(xing)環(huan)境(jing)中(zhong)造(zao)成(cheng)的(de)呢(ne)？
答：流動相裏有酸，應該先用純水或80：20的水/乙腈溶劑衝洗吧。如果，一直在酸性環境，固定相容易流失，造成保留時間前移和其它色譜性能下降。
76.我前一段時間做三聚氰胺用C18色譜響應值很小，幾乎無法檢測，可是檢測標準就是用的C18，後來我用RP18結果響應值很好，不知道什麼原因，請問這兩個柱子不都是反相色譜柱麼？他倆之間有什麼不同？
答：RP18就是C18吧，不過C18柱之間也有區別，測定三聚氰胺一般要用極性比較大的水性C18柱。
77.磺化交聯的苯乙烯-二乙烯基共聚物為填充劑的色譜柱在儲存過程未注意放在冰箱中，導致發黴後，柱效急劇下降，能何種方法將此色譜柱修複好？
答：聚合物柱子因為不怕酸堿，就直接用強酸強堿清洗。如果是H型，用1M硫酸衝洗；如果是Ca型，可以先用1M硫酸衝洗，再用EDTA鈣鹽轉換回Ca型柱；如果是中性的聚合物反相柱，直接用1M的NaOH衝洗。
78.我有一個標準的穩定性檢測分析方法它是建立在某一供應商的碳18柱上我知道有另一個廠家生產同樣的碳18柱但價錢是它的一半如果我更換柱子會不會影響到分析方法。。。
答：要看這一分析方法的具體要求。如果方法中有說明“使用某一色譜柱或與其同樣的柱子，”那麼，就可以使用別的柱子來替換。但要注意，不能光看一個柱子標為碳18柱，或是其宣傳等價於某某柱，就認為該柱適用於所有方法。必須要驗證色譜柱的等價性。
womenxuyaokaozhashiyongxinzhuzishi，xitongshiyingxingshifoukeyitongguoyanzheng。ruguokeyihuodexitongshiyongxingceshizhongsuoyaoqiudebaoliuzhi，fenliduyijiqitacanshudeng，jiukeyishiyonggaizhu。tuijianshiyongxitongshiyongxingceshiyangpinyijiqitadedianxingyangpinlaijinxingkaozha，yibaozhengzazhihejiangjiewuzaizhengquedebaoliushijianchufengbinggeichuzhengquedenongduxiangying；並且在新柱子上獲得的分析結果要等價於在原柱子上的結果。
79.請問我做一種藥的分析查美國藥典規定使用100mm×40mm，8μm的色譜柱流速3mL/min可現在市場上已不容易找到這種規格的產品於是我按USP中色譜柱比較的數據庫的指引選了一款選擇性一致的等價色譜柱其規格是100mm×46mm，3μm的色譜柱當選用3mL/min的流速時發現柱壓超高請問我如何對方法進行調整以滿足USP的要求？
答：流速調整原則是流動相通過柱子的線速度一致，等價柱的截麵積大了，流速也應增加才能保持相同的線速度。新流速計算結果是：（4.6/4.0）2×3.0=4.0mL/min。但3mL/min流速都已導致柱壓太高，4.0mL/min明顯不行。好在USP還有個允許±50%的流速調整指導原則，這樣將流速調至2.0mL/min既符合USP規定，又能使柱壓降到可接受的範圍，但這種改變不能引起其它不好後果。
這個例子中，等度分析中，流速改變會引起塔板數和峰寬的改變，但不會影響峰的選擇性。3μm粒徑色譜柱柱效比8μm的高很多，可考慮縮短柱長以補償或部分補償流速降低造成的測定時間增加。所以，更佳選擇是50mm×4.6mm，3μm的柱子，2.0ml/min的流速運行，可以在符合USP規定的情況下，又得到更快速的測定分離。
80.最近我非常的沮喪，按照藥典上的色譜條件和方法做某藥物的分析，卻始終得不到滿意的結果。有人建議我對色譜條件，如進樣量、流動相pH和溫度等，進行微調以得到良好的峰形和分離效果，可按公司規定我不能這樣做，怎麼辦？
答：如果你心裏老有這個思維定勢“按規定，我不能......”，然後什麼也不敢做，那真是不好辦！隻zhi有you去qu做zuo了le，去qu試shi著zhe改gai變bian條tiao件jian看kan看kan得de到dao什shen麼me結jie果guo，你ni才cai能neng發fa現xian問wen題ti所suo在zai。如ru果guo改gai變bian條tiao件jian後hou，仍reng得de不bu到dao好hao結jie果guo，就jiu要yao去qu找zhao色se譜pu條tiao件jian以yi外wai的de原yuan因yin，如ru，色se譜pu柱zhu、色譜儀器以及樣品和製樣過程中的是否存在問題？不管通過微調你是否取得了好結果，你也有了向領導彙報問題和解決方案的依據。
而且，絕對不能調整藥典規定色譜條件的說法通常是不對的。美國藥典USPshuodeshiruguogaibianyaodianfangfaxuyaozhongxinzuofangfayanzheng，danfangfatiaozhenghuozhechengweitiaoyifuhexitongshiyingxingdeyaoqiushiyunxude，shibuxuyaozhongxinzuofangfayanzhengde。USP列了調整的幾條指導原則，如，±50%的流速調整，±10°C的溫度調節等等（詳見"Chapter621，Chromatography，”，UnitedStates Pharmacopeia No.31-NF 26，(2008).）。當然既然是指導原則，這些規定都不是絕對的，如溫度調整±10°C，對有些方法適用，對另外的方法則±5°C的調整都會有問題，我們應該依據具體情況作出明智的科學判斷。
81.請問下HibarRT250-4這個柱子很特殊麼？為什麼很多藥典中的藥物分離都用它做柱子，因為才開始做藥，不知道hi，bar的柱子特點是什麼？
答：HibarRT250-4是Merk的一個品牌，不是很了解。大概是共用柱頭，可更換的柱管。
82.在堿性條件下矽膠溶解，又生成矽羥基的機理是什麼？反應方程式如何寫？
答：二氧化矽溶解的反應式是：
SiO2+2OH-=Si032-+H2O或者表示成水解的形式：SiO2+H2O=Si032-+2H+
這(zhe)說(shuo)明(ming)矽(gui)膠(jiao)會(hui)在(zai)堿(jian)性(xing)條(tiao)件(jian)下(xia)溶(rong)解(jie)而(er)生(sheng)成(cheng)矽(gui)酸(suan)根(gen)，但(dan)，我(wo)們(men)這(zhe)裏(li)說(shuo)的(de)是(shi)矽(gui)膠(jiao)顆(ke)粒(li)表(biao)麵(mian)的(de)部(bu)分(fen)溶(rong)解(jie)，含(han)有(you)鍵(jian)合(he)固(gu)定(ding)相(xiang)的(de)矽(gui)膠(jiao)原(yuan)表(biao)麵(mian)溶(rong)解(jie)脫(tuo)落(luo)後(hou)，自(zi)然(ran)會(hui)生(sheng)成(cheng)新(xin)鮮(xian)的(de)矽(gui)膠(jiao)表(biao)麵(mian)，而(er)新(xin)鮮(xian)的(de)矽(gui)膠(jiao)表(biao)麵(mian)結(jie)構(gou)一(yi)般(ban)都(dou)是(shi)含(han)有(you)矽(gui)羥(qiang)基(ji)的(de)。矽(gui)膠(jiao)基(ji)本(ben)結(jie)構(gou)單(dan)元(yuan)是(shi)Si-O-Si鍵，在OH-離子的作用下，Si-O鍵斷裂，在表麵形成Si-O-H矽羥基的結構單元。
必須指出的是，在氨基柱的孔內，並沒有單獨加入OH-離子，偏堿小環境的形成是由於氨基易和水電離生成的氫陽離子結合造成的遊離OH-離子的過剩。從第一個方程式角度解釋，遊離的OH-離子用完，矽膠就不再繼續溶解；從第二個水解形式方程式角度解釋：當矽膠水解生成的H+離子足夠用來和氨基結合時，水解過程就會變慢或停止。
83.同樣都是C18柱子，液相色譜柱和SPE他們之間有什麼區別，能具體講一下麼？
答：HPLC柱子和SPE小柱的對比：
對比項目 HPLC SPE
柱管 不鏽鋼管 塑料管
粒徑（um） 3，5，10 40-300
顆粒形狀 球形 一般為無定形
柱效（塔板數） 20-25000 <100
分離機理 連續洗脫 數字式開關洗脫
售價（元） 1000-4000 10-40
使用方式 可重複使用 一次性使用
操作成本 較高 低
設備成本 高 低
※對於C18固定相，為了提高回收率，SPE裏用的C18填料一般載碳量相對更高。
84.我從上麵了解到RP18和C18的區別是極性強一些，能問一下他們在分析農藥是可不可以通用？C18適用於那些農藥的分析？我查材料看到苯醚甲環唑都是用C18分析的，可我用C18分析發現響應值很小，沒法分析能幫忙分析一下原因麼？
答：RP18和普通C18，肯定有其不同的適應性，農藥種類這麼多，可能大部分農藥兩者都能用，有些就不一定。你問的C18shiyongyunaxienongyao，yinggaicongxiangguannongyaofenxifangmiandeshujishoucezhongkeyizhadaojutishenmenongyaoyongshenmeseputiaojianheshi，qizhonglimiankendingyouxuanzeshenmeleixingzhuzi，wozhebianmeibanfayiyilieju。yexiangsepuzhong，60%以上的分析物可以用C18柱，我想也應該有60%以上的農藥可以用C18柱。
如ru果guo手shou冊ce或huo文wen獻xian中zhong查zha不bu到dao，你ni把ba農nong藥yao作zuo為wei普pu通tong分fen析xi物wu來lai對dui待dai，然ran後hou按an照zhao一yi般ban的de色se譜pu柱zhu選xuan擇ze和he方fang法fa建jian立li原yuan則ze來lai做zuo就jiu可ke以yi，選xuan擇ze決jue定ding因yin素su應ying該gai也ye是shi農nong藥yao分fen子zi的de結jie構gou。苯ben醚mi甲jia環huan唑zuo，應ying該gai含han有you極ji性xing基ji團tuan，可ke以yi試shi試shi極ji性xing強qiang的deC18柱。
85.我在用乙腈作流動相時，隻要那個乙腈比例稍高一點，比如，20%，即使，測量波長高於乙腈截止波長比較多，也會產生比較大的溶劑峰，這怎麼回事？
答：ruguochuxianrongjifeng，duinidefenxijieguomeirenheyingxiang，najiurangrongjifengzainaerhaole，huozheniyongguidingderongjirongjietiquyangpinhou，zaiyongliudongxiangxishiyixiayangpin，ruguo，xishihoujiancexiannengdadaodehua。
86.我在做一個模擬胃內容物中藥物反應試驗，需要動態測定某藥品含量變化。分析時碰到一個棘手問題，進樣量同樣用20μL，用對照品pin進jin樣yang時shi色se譜pu峰feng形xing不bu錯cuo，進jin樣yang品pin時shi卻que一yi直zhi不bu能neng得de到dao好hao的de峰feng形xing。後hou來lai分fen析xi是shi模mo擬ni胃wei內nei容rong物wu樣yang品pin的de酸suan度du過guo高gao的de因yin素su，可ke我wo通tong過guo稀xi釋shi的de方fang法fa讓rang樣yang品pin酸suan度du和he流liu動dong相xiang接jie近jin，雖sui然ran峰feng形xing沒mei問wen題ti了le，卻que發fa現xian因yin稀xi釋shi導dao致zhi分fen析xi物wu在zai樣yang品pin中zhong含han量liang下xia降jiang，低di於yu最zui低di檢jian測ce限xian了le，如ru何he是shi好hao呢ne？
答：xishihenfangbian，danlingmindugenggaodejianceqiburongyizhao，buguohaishiyougejiandandejiejuefangan。dangyongliudongxiangxishiyangpinshi，zhiyaoxishihouyangpinzhongyoujixianghanliangbiliudongxiangzhongdeyoujixiangbilidi10個百分點以上（如，流動相中甲醇含量是40%，則樣品中甲醇含量一定要低於30%），樣品流動會被色譜柱進口端延緩或阻擋，稱為“柱上富集”。由於“柱上富集”作用的存在，這種情況下進行大體積樣品進樣，可避免樣品溶劑組成和流動相一樣時進樣量過大產生的“峰展寬”。針對你提的這個實例，可用稀的NaOH溶液調節樣品pH和流動相匹配，並將樣品最終稀釋一倍。將進樣量提高一倍到40μL，就可達到最低檢測限的要求。
87.峰形後拖尾是什麼原因造成的？
答：
[柱物理損壞]
色譜柱有物理損壞是造成峰形拖尾的根源。唯一的解決方法就是更換新柱。
[柱內填料汙染]
流動相和樣品中的雜質是色譜柱主要汙染源。
流動相所用的各種溶劑至少是分析純，盡量使用色譜純試劑。流動相所用的水最好是超純水或全玻璃器皿雙蒸水。用前先用0.45μm溶劑微孔過濾（器）過(guo)濾(lv)，除(chu)去(qu)可(ke)能(neng)存(cun)在(zai)的(de)微(wei)粒(li)。流(liu)動(dong)相(xiang)建(jian)議(yi)現(xian)用(yong)現(xian)配(pei)，對(dui)於(yu)含(han)鹽(yan)的(de)溶(rong)液(ye)尤(you)其(qi)注(zhu)意(yi)長(chang)置(zhi)會(hui)產(chan)生(sheng)細(xi)菌(jun)或(huo)出(chu)現(xian)沉(chen)澱(dian)。此(ci)外(wai)還(hai)得(de)保(bao)證(zheng)儲(chu)存(cun)流(liu)動(dong)相(xiang)的(de)容(rong)器(qi)清(qing)潔(jie)。
複雜樣品可選用0.45μm溶劑微孔過濾（器）huoyangpinyuchulizhuduiyangpinjinxingyuchuli，quebaoyangpinzhongbuhanweilizazhi。ruoyangpinbubianchuli，yaoshiyongbaohuzhu。zhuneitianliaowuranshi，kejiangzhutouluosixiexia，yongzhuanyonggongjuwachuzhuneiqianduanbeiwurantianliao，zaiyixiangtongdetianliaozhongxintianru，xiufu，huoyinengrongjiewuranwudeliudongxiangansepuzhushiyongdexiangfanfangxiang，chongxisepuzhu（約20至30倍柱體積，或視具體情況而定；另外，此時不能接檢測器），將汙染物衝出色譜柱，再按色譜柱標明的使用方向使用。
[柱進口處有異物]
當斷定是柱進口處有異物時，可將柱頭螺絲卸下，取出濾帽並將其置於20%硝酸溶液中，用超聲波清洗約20分鍾，再置於超純水中，並用超聲波清洗約10分鍾，重新裝入色譜柱內即可。
[樣品濃度過高致使柱超載]
樣品在柱上超載能引起峰展寬，拖尾（或伸舌）。
適當減小進樣量或樣品濃度（需要時，可提高檢測器靈敏度）直至峰形和保留時間不再改變，便可消除這種不良影響。減小進樣量還能改善其分離度。正常情況下，樣品中每種化合物在150×4.6mm柱中進樣量保持在3～50μg範圍內，不會引起明顯超載。
[樣品溶劑不對]
選擇合適的樣品溶劑，以排除不必要的幹擾，最好選用流動相溶解樣品。
[柱外效應]
柱外效應（即，進樣閥、色譜柱及檢測器間的管路過長、直徑過粗、管路接頭不匹配、有死體積）是(shi)影(ying)響(xiang)色(se)譜(pu)柱(zhu)柱(zhu)效(xiao)的(de)主(zhu)要(yao)因(yin)素(su)之(zhi)一(yi)，所(suo)以(yi)，在(zai)可(ke)能(neng)的(de)條(tiao)件(jian)下(xia)，色(se)譜(pu)柱(zhu)的(de)兩(liang)端(duan)連(lian)接(jie)管(guan)路(lu)要(yao)盡(jin)可(ke)能(neng)短(duan)，連(lian)接(jie)管(guan)內(nei)徑(jing)盡(jin)可(ke)能(neng)細(xi)小(xiao)，切(qie)口(kou)務(wu)必(bi)平(ping)整(zheng)光(guang)滑(hua)，盡(jin)可(ke)能(neng)的(de)減(jian)小(xiao)死(si)體(ti)積(ji)，以(yi)防(fang)止(zhi)因(yin)樣(yang)品(pin)擴(kuo)散(san)造(zao)成(cheng)不(bu)能(neng)反(fan)映(ying)色(se)譜(pu)柱(zhu)真(zhen)實(shi)柱(zhu)效(xiao)等(deng)情(qing)況(kuang)發(fa)生(sheng)。
[緩衝不足或不合適]
在緩衝不好或離子強度過低的分離中，也會出現保留時間重現性差和峰形拖尾。增加緩衝濃度（與樣品大小相匹配）能改善此情況。
[矽醇基團作用]
仔細分析色譜柱內填料表麵性質可知：反fan相xiang色se譜pu柱zhu填tian料liao的de表biao麵mian大da約yue被bei鍵jian合he相xiang覆fu蓋gai了le一yi半ban，其qi餘yu的de就jiu是shi未wei被bei鍵jian合he的de矽gui醇chun基ji團tuan。所suo謂wei的de保bao留liu是shi指zhi樣yang品pin分fen子zi與yu鍵jian合he相xiang相xiang互hu作zuo用yong的de結jie果guo。但dan是shi，酸suan性xing或huo堿jian性xing化hua合he物wu與yu矽gui膠jiao表biao麵mian殘can存cun的de矽gui醇chun基ji團tuan或huo金jin屬shu雜za質zhi之zhi間jian相xiang互hu作zuo用yong而er引yin起qi雙shuang重zhong保bao留liu機ji理li，因yin此ci，發fa生sheng了le峰feng形xing拖tuo尾wei。
為了減小峰形拖尾，通常可在流動相加入25mM三乙胺（抑製劑）。三san乙yi胺an能neng與yu矽gui醇chun基ji團tuan發fa生sheng強qiang烈lie的de相xiang互hu作zuo用yong，從cong而er降jiang低di或huo阻zu斷duan樣yang品pin分fen子zi與yu矽gui醇chun基ji團tuan的de作zuo用yong，以yi保bao證zheng保bao留liu機ji理li正zheng常chang進jin行xing，並bing大da大da緩huan解jie了le峰feng形xing拖tuo尾wei。使shi用yong長chang鏈lian的de矽gui醇chun基ji抑yi製zhi劑ji，雖sui起qi效xiao較jiao慢man，但dan，持chi續xu力li較jiao三san乙yi胺an長chang。因yin為wei抑yi製zhi劑ji分fen子zi中zhong除chu了le胺an基ji與yu矽gui醇chun基ji團tuan發fa生sheng極ji性xing作zuo用yong外wai，大da分fen子zi中zhong非fei極ji性xing部bu分fen與yu固gu定ding相xiang也ye會hui發fa生sheng反fan相xiang作zuo用yong而er產chan生sheng保bao留liu現xian象xiang。如ru果guo，將jiang抑yi製zhi劑ji加jia至zhi樣yang品pin中zhong，效xiao果guo會hui顯xian著zhu。
[柱內金屬汙染]
柱內金屬汙染（Fe，Ni等）keyinqimouyinxiehuahewufengxingtuowei。jinshukeyoutianliaobenshendaijin，yekeyoufushixingliudongxianghuanmanrongjiezhujinkoudejinshulvpian，suiliudongxiangchenjidaozhutianliaozhong，liru，C18柱填料被金屬汙染後，造成酸性/堿性樣品拖尾，可用堿洗/酸洗後再鍵合的填料，得到的峰是尖銳且對稱的。
88.流動相與柱子如何才能做到匹配，達到最好的分離效果。目前我們實驗室有購買好的色譜柱，可是對樣品的分離效果不是很好。
答：butongtianliaodesepuzhudouyouzijidexuanzexing，xiangtongtianliaobutongchangjiayijixiangtongchangjiabutongpinpaizhijiandexuanzexingdoushibuyiyangde，yibanqingkuangxiagenjuwuzhidexingzhijiangfenlidedafangxiangru：zhengxiangfenxihuozhefanxiangfenxi，quedinghou，yibankeyigenjutiaojieseputiaojiannengdedaohaodesepufengxing，zhefangmiandeziliaoluntandangzhonghenduo，danshiyeyouxiesepuzhubuguanzenmetiaozhengseputiaojiandoubuxing，biaomianzhekuansepuzhudexuanzexingbushihegaiyangpindexuanze。
89.我用的是C18柱，後麵黑色的是我以前跑的圖，前麵是我現在跑的圖形，完全一樣的東西，隻是流動相不是一批配的（流動相的成分沒變），中間柱子別人用過了，峰型怎麼發生了這麼大的變化啊？可能的原因是什麼啊？是不是柱子出了問題啊？
答：從兩個圖對比很明顯可以看出是柱效嚴重下降，且伴有肩峰。不同時間配的流動相，如果成分和pH沒變的話，肯定不會造成這個結果。估計是別人用柱子過程中，造成了柱頭塌陷、柱頭汙染以及固定相流失等嚴重問題，如樣品太髒，流動相或樣品pH太高或太低，都會造成這個結果。
nikeyishizheyongsepuzhuqingxihezaishengdefangfafanchongweihuyixia，danbunengbaozhengyidingnenghuidaoyuanlaidexiaoguo。zaishengruguobuxing，kaolvwabuzhutoutianliao，shizaibuxing，zhuziyezhinengbaofei。jianyizhuzizuihaohaishizhuanmenyongyuyizhongfangfabijiaohao，xiangnizhezhongqingkuang，dougaobuqingbierenzenmeyongzhuzide，fenxijiejuewentijiuxiangdangnan。
90.柱子的柱效影響大嗎？一般柱子的柱效規定是多少的呀！理論塔板數一般要達到多少呢？主要有那些因素影響它。
答：柱zhu效xiao是shi柱zhu子zi性xing能neng好hao壞huai的de一yi個ge重zhong要yao體ti現xian指zhi標biao。柱zhu效xiao會hui影ying響xiang分fen離li度du，當dang然ran是shi峰feng形xing越yue尖jian銳rui，柱zhu效xiao越yue高gao，和he其qi它ta峰feng越yue容rong易yi分fen開kai。另ling外wai柱zhu效xiao高gao峰feng形xing尖jian銳rui，對dui峰feng麵mian積ji的de積ji分fen誤wu差cha就jiu小xiao，甚shen至zhi可ke以yi用yong峰feng高gao來lai定ding量liang。
一般C18柱，在測定甲苯等不易拖尾的小分子中性不電離物質時，5μm的填料，每米的柱效能達到80000以上的塔板數，就算合格吧。在實際分析物的測定時，一般藥典有規定最低柱效是2000～3000，一(yi)般(ban)新(xin)柱(zhu)子(zi)的(de)柱(zhu)效(xiao)都(dou)高(gao)於(yu)這(zhe)個(ge)數(shu)。但(dan)柱(zhu)子(zi)在(zai)使(shi)用(yong)後(hou)，由(you)於(yu)固(gu)定(ding)相(xiang)流(liu)失(shi)等(deng)原(yuan)因(yin)，柱(zhu)效(xiao)會(hui)逐(zhu)步(bu)下(xia)降(jiang)，當(dang)下(xia)降(jiang)到(dao)不(bu)符(fu)合(he)藥(yao)典(dian)最(zui)低(di)柱(zhu)效(xiao)要(yao)求(qiu)，或(huo)者(zhe)導(dao)致(zhi)分(fen)離(li)度(du)不(bu)夠(gou)時(shi)，色(se)譜(pu)柱(zhu)就(jiu)算(suan)壽(shou)命(ming)到(dao)了(le)。單(dan)從(cong)柱(zhu)效(xiao)逐(zhu)步(bu)下(xia)降(jiang)這(zhe)個(ge)角(jiao)度(du)看(kan)，柱(zhu)效(xiao)高(gao)的(de)色(se)譜(pu)柱(zhu)相(xiang)對(dui)使(shi)用(yong)壽(shou)命(ming)更(geng)長(chang)。
影響柱效的因素有粒徑、粒徑和孔徑分布、固定相鍵合密度、柱外體積和溫度等，柱子裝填緊密、柱床均勻一致也對提高柱效有好處。這些影響因素中，很多是和生產廠商有關，你這邊能做的是盡量減少柱外連接體積。
91.流動相中加入四氫呋喃對柱子有損害嗎?我現在分析一樣品流動相中用到20%的四氫呋喃才能把峰分到基線.但柱子隻能用一個星期分離效果就不好了.請問是四氫呋喃損壞了柱子嗎?
答：四氫呋喃（THF）是反相色譜中洗脫能力極強的溶劑，比甲醇和乙腈都強很多。在流動相中加入THF能改善某些難分離的物質對的分離度，但，THF不穩定，容易降解生成具有很強反應活性的過氧化物，能與分析物反應生成新化合物，導致拖尾、峰分裂和鬼峰產生。高反應活性的過氧化物還可以和填料固定相發生化學作用，THF對柱子有損傷這點是無疑的，而且這種損傷是隨時間累積的。THF保質期一般規定是6個月，放得越久，裏麵產生的過氧化物含量越大，你應該避免使用生產日期已很久的THF溶劑，而且最好將THF冷藏、幹燥和避光保存，使用前最好能檢測一下過氧化物的含量。
92.在用液相色譜同時分離多種組分時，怎麼通過條件色譜條件使各個峰達到比較理想的分離效果！
答：這是方法開發的大問題。方法開發建立，要做的就是：針對分析物和基體的情況不同，選擇色譜柱類型和分析條件，包括流動相溶劑類型、組成比例、pH值、溫度和流速等參數的確定。這方麵的問題，要講起來內容非常多。
93.是樣品過載問題,按藥典檢測方法檢驗一些藥品有關物質時,都要注入高濃度的供試液,這樣往往使得柱過載而峰變形,按老師的方法減小濃度和注入量均是不允許的,怎麼處理這問題?
答：yaodianfangfazhongzhurugaonongdugongshiyecedingyouguanwuzhi，tigaozhurunongdushiweilebazazhifengdexinhaozengqiang。youshihouweilebazazhifengxianxianchulai，zhufengyinguozaiyousuobianxing，ruzaiyunxufanweinei，yenengjieshou。danqiantishizazhifengheyangpinzhufengfenkai，ruguoyinguozaiershiliangfengmeiyoudedaoxuyaodefenlidu，zazhifengxinhaozaiqiangyeshiquleyiyi。worenweiyaodianguidingdetiaojianshiyunxuzaiyidingfanweineijinxingtiaojiede，yinweiyaodianmeiyouguidingjutishiyongsepuzhudepinpai，erbutongpinpaidezhuzi，shangyangliangshiyouchayide。duiseputiaojianweitiao，bingqudedaolehenhaodefenxijieguo，ruguoguidingbuyunxu，nanishouxianyaohuaiyizhegeguidingshifouheli，huozheshifouduiguidingdelijieyouwenti。
94.哪些原因會造成色譜峰變寬、峰高變低，有哪些解決辦法？
答：確實是這樣，如果其它色譜條件沒有改變，柱效下降是導致峰變寬的主要原因。對於易電離的極性物質，如果流動相pH選擇不合適，分析物既有中性分子態存在，又有離子態存在，峰也會變寬變矮。
sepuzhushiyonghouzhuxiaozhubuxiajiangshizhengchangxianxiang，ruturanjiangdizeshuyichang。zhuxiaoxiajiangyuanyinyouhenduo，danzhuxiaokuaisuxiajiangzeduobanshishiyongbudang，zaochengtianliaotexinghuozhuchuangjiegougaibiansuozhi。ruchaoguoshiyongpH範圍造成的固定相和矽膠基體的流失、柱床塌陷等；還有強保留物質吸附在填料表麵，形成非特異性吸附層，完全改變了原有固定相的表麵活性和分離性能，使柱效下降；另外進樣時的壓力脈衝，也會破壞柱床結構影響柱效。
95.我以前做蘇丹紅用的是安捷倫的SB-C18柱，峰形什麼都很好，最近發現4個標樣峰後都帶有一個小峰，一開始以為是標樣問題，後來換XDB-C18後標樣又正常了。可是用SB-C18柱做其他用正常，不知怎麼回事？還有，像這種C18柱如果壓力過高能不能反衝，該如何衝洗？一般做獸殘、農殘什麼的，而且感覺三聚氰胺做後壓力更易增高，且容易引發進樣器漏等問題，請問做完三聚氰胺需對係統做特殊清洗嗎？
答：用SB柱(zhu)，標(biao)樣(yang)後(hou)帶(dai)一(yi)小(xiao)峰(feng)，而(er)且(qie)是(shi)隻(zhi)對(dui)蘇(su)丹(dan)紅(hong)標(biao)樣(yang)測(ce)定(ding)時(shi)有(you)，估(gu)計(ji)和(he)蘇(su)丹(dan)紅(hong)標(biao)樣(yang)的(de)測(ce)定(ding)方(fang)法(fa)和(he)其(qi)它(ta)樣(yang)品(pin)測(ce)定(ding)方(fang)法(fa)不(bu)同(tong)有(you)關(guan)。最(zui)好(hao)能(neng)把(ba)譜(pu)圖(tu)貼(tie)上(shang)來(lai)看(kan)看(kan)，是(shi)什(shen)麼(me)樣(yang)的(de)小(xiao)峰(feng)？才(cai)能(neng)判(pan)斷(duan)是(shi)溶(rong)劑(ji)峰(feng)還(hai)是(shi)雜(za)質(zhi)峰(feng)。XDB柱和SB柱是有區別的，XDB鍵合度高，封尾良好，反相保留能力強；而SB柱，未進行封尾，對極性物質選擇性好。有可能你的蘇丹紅標樣分解了，有極性雜質生成，SB柱能把雜質分開，而XDB柱不能。
這zhe兩liang款kuan柱zhu子zi壓ya力li大da了le，可ke以yi反fan衝chong。有you正zheng常chang維wei護hu時shi的de反fan衝chong衝chong洗xi和he再zai生sheng時shi的de強qiang溶rong劑ji衝chong洗xi兩liang種zhong，衝chong洗xi方fang法fa在zai在zai線xian講jiang座zuo裏li也ye寫xie了le，你ni再zai回hui到dao本ben貼tie的de前qian麵mian看kan看kan就jiu可ke以yi了le。
三san聚ju氰qing胺an和he三san乙yi胺an類lei似si，本ben身shen容rong易yi和he矽gui醇chun基ji作zuo用yong而er吸xi附fu在zai填tian料liao表biao麵mian，另ling外wai三san聚ju氰qing胺an測ce定ding的de樣yang品pin基ji體ti含han蛋dan白bai類lei的de強qiang保bao留liu物wu質zhi較jiao多duo，容rong易yi汙wu染ran色se譜pu柱zhu柱zhu頭tou引yin起qi填tian料liao間jian隙xi堵du塞sai柱zhu壓ya升sheng高gao，最zui好hao每mei次ci做zuo完wan樣yang後hou，都dou用yong甲jia醇chun或huo乙yi腈jing反fan向xiang清qing洗xi維wei護hu一yi下xia。如ru有you蛋dan白bai類lei的de汙wu染ran，也ye定ding時shi用yong本ben講jiang座zuo中zhong提ti到dao的de清qing洗xi方fang法fa做zuo一yi下xia維wei護hu。
96.我是做農藥殘留分析的，不同的基質雜質含海量是不同的，我用C18分析時有可能一次就汙染了，我用高流速，和反向衝洗都解決不了，是不是這根柱子就廢了，有沒有其他的辦法？
答：gaoliusufanxiangchongxishiduide，guanjianniyongleshenmerongjichongxine？yongyuanlaideliudongxiangchongxikendingbuguanyong，yaoburanjiubuhuileijizaizhuzishangle。niyinggaiyongliudongxiangzhongdeqiangrongjiB衝洗，如果不行，就需要啟用再生的程序，當然再生時用的溶劑更強。
100％甲醇——100％乙晴——75％乙晴/25％異丙醇——100％異丙醇——100％二氯甲烷——100％正己烷。
用每種溶劑衝洗至少10個柱體積，對於250mm×4.6mm的分析柱，合適的衝洗流速是1～2mL/min。最後，用10柱體積的異丙醇過渡，然後回到原來的流動相體係。
zaishenghaibujiejuewenti，zuihouyizhaojiushiwabuzhutoutianliao，bazhutouwurandetianliaowadiao，yongganjingtianliaotianbujinqu。wabutianliao，pohuaiyuanyouzhuchuangjiegou，wabuhouzhuxiaoyebukenengyouxinzhushuiping，huoxunengzaiweichiyiduanshijian，danbuhuichangjiu。
97.還有溶劑中的金屬過濾頭生鏽了，會有什麼影響？會不會影響到柱子的壽命，金屬離子和柱子有沒有什麼反應？
答：我覺得你就把鏽當成顆粒物汙染的一種，會導致拖尾、柱壓上升等。溶解的金屬離子一般在反相柱上沒有什麼保留能力，馬上就會被衝出柱子，不會和固定相或者和矽膠基質反應。
98.如果在溶劑過濾時把水膜當成有機膜了溶解了而且這樣的溶劑又做有機相用了，造成C18柱壓由1000升到3000，流動相是乙腈和水，問一下這樣的柱子還能用麼？有沒有什麼補救方法？
答：溶解的膜作為了顆粒物堵塞篩板，引起柱壓上升，也隻有反衝一下，如果能把堵在篩板上的膜殘渣衝走，柱壓下降了就OK了；ruguo，canzhajinrulezhuzineibudetianliaojianxi，huinanchongyidian，yezhinengduochongyihuiba，shizaibuxing，niyoushebudebasepuzhubaofei，jiuzhiyouwabuzhutoutianliaohehuanshaibanle。
99.保護柱和預柱的作用是不是一樣的，如果不一樣有什麼區別麼？保留時間漂移多少為可以接受的範圍？
答：保護柱一般帶填料，相當於一根縮短了的色譜柱（一般是1～2cm長度），卡套裏可更換的柱芯，柱管、篩(shai)板(ban)和(he)填(tian)料(liao)都(dou)有(you)。保(bao)護(hu)柱(zhu)裏(li)的(de)柱(zhu)芯(xin)好(hao)像(xiang)是(shi)在(zai)前(qian)麵(mian)開(kai)路(lu)的(de)掃(sao)雷(lei)部(bu)隊(dui)，流(liu)動(dong)相(xiang)和(he)樣(yang)品(pin)裏(li)如(ru)有(you)什(shen)麼(me)損(sun)害(hai)柱(zhu)子(zi)的(de)汙(wu)染(ran)物(wu)，保(bao)護(hu)柱(zhu)就(jiu)自(zi)己(ji)承(cheng)受(shou)了(le)下(xia)來(lai)。
而er預yu柱zhu，現xian在zai一yi般ban指zhi的de就jiu是shi接jie在zai進jin樣yang器qi和he色se譜pu柱zhu之zhi前qian的de在zai線xian過guo濾lv器qi。在zai線xian過guo濾lv器qi和he保bao護hu柱zhu的de最zui大da區qu別bie是shi不bu帶dai填tian料liao，隻zhi有you可ke更geng換huan的de篩shai板ban。預yu柱zhu隻zhi能neng保bao護hu色se譜pu柱zhu免mian受shou顆ke粒li物wu質zhi的de汙wu染ran，而er不bu能neng阻zu擋dang溶rong解jie在zai流liu動dong相xiang中zhong的de強qiang保bao留liu物wu質zhi。
保留時間是液相色譜中一個很有用的診斷分離問題的工具。保留時間受流動相組成、溫度、pH、流速、固(gu)定(ding)相(xiang)流(liu)失(shi)和(he)柱(zhu)老(lao)化(hua)等(deng)很(hen)多(duo)因(yin)素(su)的(de)影(ying)響(xiang)，如(ru)果(guo)所(suo)有(you)這(zhe)些(xie)參(can)數(shu)保(bao)持(chi)不(bu)變(bian)，保(bao)留(liu)時(shi)間(jian)也(ye)保(bao)持(chi)恒(heng)定(ding)。但(dan)在(zai)實(shi)際(ji)操(cao)作(zuo)中(zhong)，不(bu)可(ke)能(neng)對(dui)每(mei)個(ge)色(se)譜(pu)參(can)數(shu)進(jin)行(xing)很(hen)完(wan)美(mei)的(de)控(kong)製(zhi)，如(ru)即(ji)便(bian)加(jia)了(le)柱(zhu)溫(wen)箱(xiang)，溫(wen)度(du)還(hai)是(shi)會(hui)有(you)波(bo)動(dong)；流動相組成會因組分揮發性不同而改變。
所以，保留時間有上下0.02～0.05min的變動是非常正常的，對某些方法有0.1minshangxiabiandongyeshuzhengchang。baoliushijianyoudadebianhua，yushizhexitonghefangfacunzaiwenti。liululiyouqipaocunzai，bengfayouxielou，huiyinliuliangjiangdierdaozhibaoliushijianzengjia。tiduhunhebilifaguzhangyeshibaoliushijianbianhuayuanyinzhiyi。
100.液相色譜柱與氣相的柱子有何區別呢？
