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色譜柱可分為填充柱和開管柱兩大類。多為金屬或玻璃製作。有直管形、盤管形、U形管等形狀。液相色譜通常均采用填充柱。色譜柱的分離效果取決於所選擇的固定相，以及色譜柱的製備和操作條件。
關於色譜柱的疑問小編搜羅了100個問答，希望能夠幫到你。1.wangshangduizhuzishifoukeyifanchongyizhiyouzhenglun，nashenmeyangdezhuzikeyifanchong，shenmebukeyi。fanchonghoushizhengzheyong，haishifanzheyong。jutidaogexinghaozhuzibujinshiODS柱，其他如，正向柱、氨基柱、離子交換柱等最好都有解釋。
答：yibandezhengxiangfanxiangzhuyinggaidounengfanchong，zhiyouliangduanshaibankongjingbuduichengdezhuzibunengfanchong，buguomuqianzheyangdezhuziyijingbijiaoshaojianle。fanchongshiweilebazhutoudewuranwuchongxidiao，fanchonghouhaishizhengzheyongbijiaohao，yimianzhuzideliangtoudoubeiwuran，womenyizhitichangdeshi：正向使用，反向衝洗。
2.我在做方法開發的時候,用乙腈和水作為流動相,在調整梯度的時候發現，剛開始用60%乙腈，RT為2.5分鍾，調到40%乙腈，RT沒有變化，30%也沒有變化，一直調到20%的時候，RT突然變到了約13分鍾，請問這是什麼原因？我用的是離子交柱。
答：離子交換柱的保留時間主要由洗脫液的離子強度和pH決(jue)定(ding)，你(ni)現(xian)在(zai)講(jiang)的(de)比(bi)較(jiao)簡(jian)單(dan)，需(xu)要(yao)把(ba)你(ni)的(de)方(fang)法(fa)說(shuo)的(de)詳(xiang)細(xi)一(yi)點(dian)才(cai)能(neng)做(zuo)具(ju)體(ti)的(de)分(fen)析(xi)。譬(pi)如(ru)，分(fen)析(xi)物(wu)是(shi)什(shen)麼(me)情(qing)況(kuang)，其(qi)含(han)有(you)極(ji)性(xing)電(dian)離(li)基(ji)團(tuan)和(he)非(fei)極(ji)性(xing)基(ji)團(tuan)是(shi)什(shen)麼(me)性(xing)質(zhi)？離(li)子(zi)交(jiao)換(huan)柱(zhu)是(shi)聚(ju)合(he)物(wu)基(ji)質(zhi)還(hai)是(shi)矽(gui)膠(jiao)基(ji)質(zhi)？水(shui)相(xiang)是(shi)什(shen)麼(me)緩(huan)衝(chong)鹽(yan)？
3.對於一根常用的C18柱，拿到一根新柱的時候應該怎樣進行活化及維護？為什麼要這樣做？
答：新(xin)柱(zhu)活(huo)化(hua)，實(shi)際(ji)上(shang)是(shi)一(yi)個(ge)平(ping)衡(heng)的(de)過(guo)程(cheng)，除(chu)了(le)用(yong)流(liu)動(dong)相(xiang)平(ping)衡(heng)外(wai)，有(you)時(shi)候(hou)還(hai)必(bi)須(xu)用(yong)所(suo)測(ce)樣(yang)品(pin)對(dui)新(xin)柱(zhu)進(jin)行(xing)平(ping)衡(heng)，特(te)別(bie)是(shi)測(ce)定(ding)分(fen)子(zi)量(liang)比(bi)較(jiao)高(gao)的(de)多(duo)肽(tai)，尤(you)其(qi)重(zhong)要(yao)。因(yin)為(wei)，分(fen)子(zi)量(liang)高(gao)的(de)物(wu)質(zhi)分(fen)子(zi)，擴(kuo)散(san)速(su)度(du)慢(man)，平(ping)衡(heng)所(suo)需(xu)時(shi)間(jian)也(ye)相(xiang)應(ying)較(jiao)長(chang)。具(ju)體(ti)平(ping)衡(heng)方(fang)式(shi)也(ye)很(hen)簡(jian)單(dan)，多(duo)進(jin)幾(ji)次(ci)樣(yang)品(pin)，直(zhi)到(dao)峰(feng)麵(mian)積(ji)和(he)保(bao)留(liu)時(shi)間(jian)穩(wen)定(ding)，再(zai)進(jin)行(xing)正(zheng)式(shi)進(jin)樣(yang)測(ce)定(ding)。
如果要加快平衡時間，把前麵用來平衡的進樣樣品濃度加大，或者不等洗脫完成，連續進樣多針。用待測物對新柱平衡，目的是：將矽膠基質填料表麵具有非特異性吸附的位點的吸附能力飽和掉。
4.測定多肽，一般采用什麼柱子？流動相是乙腈和水，還有微量的TFA。特別是像類似三肽的短肽，應該怎麼選擇柱子？
答：分子量不高的多肽一般選用常規C18柱就能測定，也有用離子交換柱、水性C18柱和Hilic親水作用柱的。
5.氨基柱在進酸性樣品時，很傷柱子，如使用一段時間後，柱效降低，峰形改變，如何恢複？
答：氨基柱測酸性樣品，應該是用氨基柱的HILICmoshi。suandecunzaikenenghuishilvedaifudianhedeanjiguannengtuanzhizihua，daozhishiyongyiduanshijianhouduiyumouxieleidefenxiwubaoliuxingzhiyousuogaibianhuobiaoxianzaizhuxiaoxiajiang。jianyi：用5～10倍的柱體積的含0.5～1.0％NH3的乙腈-水(50：50)溶液衝洗該柱（衝洗後當然要再用不含堿的流動相洗去多餘氨），之後，再進行分析這類酸性分析物時建議在流動相中略微添加少許氨如，0.1％。
6.色譜柱的技術都有哪些？比如，封尾等，這些技術在應用時都體現在哪裏？
答：sepuzhujishubaokuotianliaojishuhezhuangzhujishu，tianliaojishuzibudaiyan，tianliaodehaohuaiduisepuzhufenlixingnenghexuanzexingyoujuedingxingyingxiang。zhuangzhujishuyemeiyouxiangxiangzhongdezhemejiandan，butonggudingxiang、不同粒徑、不同柱管內徑和長度，裝柱工藝都有所不同，要裝出緊密、穩定、均一的柱床，更多是一門藝術，需要經驗積累。
7.色譜柱技術的差距在哪裏？
答：sepuzhujishubaokuotianliaojishuhezhuangzhujishu，tianliaojishuzibudaiyan，tianliaodehaohuaiduisepuzhufenlixingnenghexuanzexingyoujuedingxingyingxiang。zhuangzhujishuyemeiyouxiangxiangzhongdezhemejiandan，butonggudingxiang、不同粒徑、不同柱管內徑和長度，裝柱工藝都有所不同，要裝出緊密、穩定、均一的柱床，更多是一門藝術，需要經驗積累。
國內和國外相比，我認為色譜柱的差距在於：guoneigongsiyiqiandoubuhuizijikaifatianliao，yibanmaiguowaixianchengtianliaozhuangzhu，maidaodetianliaozhiliangkongzhiquanbuzaizijishouli。lingwai，yinwei，zhuangzhulishiduan，jingyanjileishao，zhuangzhugongyiyemeiyouwanquandadaoguowaishuiping。lingwai，duisepuzhuxingnenghenguanjiandejichucailiao——裸矽膠，國產的還不過關，在純度、粒徑和孔徑的均一性方麵和國外產品相比，差距很大。
8.柱zhu子zi在zai什shen麼me情qing況kuang下xia可ke以yi清qing洗xi一yi下xia篩shai板ban呢ne？原yuan來lai也ye討tao論lun過guo這zhe個ge問wen題ti，我wo也ye拆chai下xia來lai清qing洗xi過guo，但dan我wo看kan到dao柱zhu前qian段duan的de汙wu染ran更geng甚shen，於yu是shi就jiu用yong刀dao片pian刮gua了le刮gua，然ran後hou把ba清qing洗xi好hao的de篩shai板ban安an裝zhuang上shang去qu。問wen題ti解jie決jue了le，但dan使shi用yong壽shou命ming會hui不bu會hui減jian少shao呢ne？
答：柱(zhu)頭(tou)汙(wu)染(ran)了(le)，就(jiu)取(qu)出(chu)汙(wu)染(ran)的(de)，再(zai)裝(zhuang)一(yi)些(xie)填(tian)料(liao)。因(yin)為(wei)，加(jia)入(ru)你(ni)刮(gua)了(le)些(xie)填(tian)料(liao)，那(na)麼(me)微(wei)觀(guan)的(de)塔(ta)板(ban)數(shu)就(jiu)少(shao)了(le)。假(jia)入(ru)你(ni)刮(gua)得(de)不(bu)多(duo)，僅(jin)表(biao)麵(mian)，可(ke)能(neng)就(jiu)是(shi)一(yi)些(xie)髒(zang)物(wu)，所(suo)以(yi)，問(wen)題(ti)解(jie)決(jue)，但(dan)是(shi)，今(jin)後(hou)還(hai)會(hui)有(you)同(tong)樣(yang)問(wen)題(ti)，再(zai)掛(gua)，那(na)麼(me)不(bu)小(xiao)心(xin)刮(gua)，影(ying)響(xiang)柱(zhu)效(xiao)。建(jian)議(yi)還(hai)是(shi)裝(zhuang)一(yi)個(ge)預(yu)柱(zhu)。
9.如果柱子取下來放置一段時間，需要做什麼保護嗎？
答：對一般的反相柱，也就是洗幹淨後放到純甲醇（乙腈）或者是80%左右的甲醇（乙腈）水中，然後用堵頭塞緊柱兩頭，以免保存溶劑揮發，應該不需要做特殊的保護。
10.流動相中加入適量的四氫呋喃可以改善峰形的機理是什麼？
答：《高效液相色譜方法及應用》於世林編著的上麵說：甲醇為質子給予體、乙腈為質子接受體、四氫呋喃是偶極溶劑，應該除了極性影響，還有另外的影響因素，至於分離機理，還是比較複雜的，不能看成是個萬能方法。
11.關於色譜柱的填裝問題！我個人認為現在色譜柱的填裝一般有3種情況：
①國外生產填料並填裝完成成品賣到國內；
②國外生產填料，國內填裝銷售；
③國內生產填料，國內填裝銷售。
一般情況下，第1種情況賣的最貴，也質量最好！可是我就不明白了：如果是填料的生產很複雜的話，那麼填裝上國內也跟不上去嗎？為什麼換在國內填裝就會出現或多或少的一些小問題呢？
答：guoneitianzhuanghuichuxianzhiliangxiaowenti，heguoneimuqianpubianzuoshimeiyouguowaiyanjinyouguanba。ruguogongyijishushangmeiyouwenti，younengzhidingbingqieshizhixingyizhengtaoyangedeshengchanzhiliangguanlicuoshi，guoneitianzhuangheguowaitianzhuangbingwuqubie。
12.國產色譜柱在市場上占有比例如何啊？
答：國內色譜柱市場還沒有人進行過科學統計，連一年色譜柱銷售總量也眾說紛雲，更別說國內生產色譜柱所占份額了。我估計是占30%左右吧。
13.預柱或保護柱用還是不用的問題！原(yuan)來(lai)分(fen)析(xi)中(zhong)藥(yao)品(pin)種(zhong)時(shi)，我(wo)一(yi)直(zhi)都(dou)是(shi)用(yong)保(bao)護(hu)柱(zhu)。但(dan)來(lai)到(dao)新(xin)公(gong)司(si)後(hou)，發(fa)現(xian)大(da)家(jia)都(dou)沒(mei)有(you)使(shi)用(yong)，幾(ji)個(ge)實(shi)驗(yan)室(shi)連(lian)保(bao)護(hu)柱(zhu)都(dou)沒(mei)找(zhao)到(dao)一(yi)個(ge)，也(ye)就(jiu)是(shi)說(shuo)大(da)家(jia)從(cong)來(lai)都(dou)沒(mei)有(you)用(yong)過(guo)。後(hou)來(lai)問(wen)一(yi)個(ge)老(lao)員(yuan)工(gong)，說(shuo)是(shi)有(you)可(ke)能(neng)影(ying)響(xiang)藥(yao)品(pin)分(fen)析(xi)。我(wo)就(jiu)想(xiang)問(wen)：安裝保護柱後會影響樣品分析嗎？我們做的大多是頭孢類的抗生素。
答：應(ying)該(gai)這(zhe)樣(yang)說(shuo)，加(jia)上(shang)保(bao)護(hu)柱(zhu)，肯(ken)定(ding)有(you)利(li)於(yu)保(bao)護(hu)色(se)譜(pu)柱(zhu)不(bu)受(shou)一(yi)些(xie)顆(ke)粒(li)物(wu)質(zhi)的(de)堵(du)塞(sai)，肯(ken)定(ding)有(you)害(hai)於(yu)分(fen)離(li)度(du)和(he)柱(zhu)效(xiao)，因(yin)為(wei)保(bao)護(hu)柱(zhu)中(zhong)間(jian)有(you)著(zhe)死(si)體(ti)積(ji)的(de)存(cun)在(zai)但(dan)是(shi)如(ru)果(guo)保(bao)護(hu)柱(zhu)接(jie)得(de)好(hao)並(bing)且(qie)盡(jin)量(liang)控(kong)製(zhi)其(qi)匹(pi)配(pei)性(xing)和(he)經(jing)常(chang)更(geng)換(huan)，分(fen)離(li)度(du)和(he)柱(zhu)效(xiao)應(ying)該(gai)影(ying)響(xiang)並(bing)不(bu)大(da)。
頭孢類的抗生素也要看到底是原料藥還是製劑嘍，有些原料藥，可以根據色譜柱的損耗選擇添加預柱（中間是個篩板），製劑的話，如果有輔料嚴重幹擾或者流動相鹽分比較大，那還是最好配個保護柱。
14.用的是四元梯度泵：A：50%甲醇；B：50%水， 經常出現停或進氣泡這是什麼原因？
答：水/甲醇比例在55：45時，黏度和柱壓有個極大值。50：50jiejinlezhegejizhi，zhuyashibijiaogaode，dan，yingxiangzhuyazuidadehaishitianliaolijinghesepuzhuneijing，nizhegeshilizhongbuzhiyongdeshenmeguigedesepuzhu？xitongyaligao，kenenghuiyinrongjibengzhongdeguolvtougongyesudugenbushangerdaozhiqipaojinruxitong，tingjiyeyinggaishiyinweiqipaojinruyalixiajiangdeyuanyin，kekaolvgenghuanyetitonglianggengdadeguolvtou。
15.填料方法的前三種都是濕法嗎，能不能對四種填充方法做一個簡短的說明？
答：
資料顯示：在正常條件下，填料粒度＞20µm時，幹法填充製備柱較為合適；顆粒＜20µm時，濕法填充較為理想。填充方法一般有4種：
① 高壓勻漿法，多用於分析柱和小規模製備柱的填充；
② 徑向加壓法，Waters專利；
③ 軸向加壓法，主要用於裝填大直徑柱；
④幹法。柱填充的技術性很強，大多數實驗室使用已填充好的商品柱。為什麼以20μm為分界點？
16.想請您具體說明一下反衝色譜柱的方法，是不連檢測器嗎？
答：反衝就是將柱子反向連到係統中。因為，有汙染物反衝出來，當然不連檢測器，出液端直接接到廢液瓶就可以。
17.如果不使用不鏽鋼接頭，而改用peek頭，是否可以完全解決接頭匹配問題？
答：色譜柱接頭其實大都不是色譜柱廠商自己生產的，供貨商有多個，VICI，Upchurch，Parker等(deng)，他(ta)們(men)的(de)標(biao)準(zhun)相(xiang)互(hu)之(zhi)間(jian)不(bu)統(tong)一(yi)，那(na)色(se)譜(pu)柱(zhu)接(jie)頭(tou)的(de)標(biao)準(zhun)就(jiu)統(tong)一(yi)不(bu)起(qi)來(lai)。不(bu)過(guo)一(yi)般(ban)這(zhe)個(ge)問(wen)題(ti)也(ye)不(bu)難(nan)解(jie)決(jue)的(de)，換(huan)個(ge)接(jie)頭(tou)就(jiu)可(ke)以(yi)了(le)，而(er)且(qie)現(xian)在(zai)有(you)了(le)萬(wan)用(yong)接(jie)頭(tou)，可(ke)以(yi)配(pei)所(suo)有(you)不(bu)同(tong)類(lei)型(xing)的(de)柱(zhu)頭(tou)，不(bu)泄(xie)露(lu)，連(lian)接(jie)死(si)體(ti)積(ji)又(you)很(hen)小(xiao)。
18.有的廠商為避免堵塞，使用了較大孔徑（2～5μm）的前篩板，這種情況反衝會將填料衝出。那麼，你們在使用說明書中會說明前後篩板的孔徑嗎？
答：如果前後篩板孔徑不對稱，廠商肯定也會在說明書裏特別提到的。
19.我在做多肽藥物時遇到下列問題：
1）基線不穩定波動大，流動相 A ：
1％TF，A：水溶液，B：1％TFA乙腈溶液檢測波長210nm流速1.0mL/mL 什麼原因？怎麼解決？TFA有什麼作用？流動相中不加TFA見不到主峰，基線良好。
2）做完肽類樣品時怎麼衝洗C18比較好；
3）藥典上介紹測定分子量大於2000的樣品，選擇柱子填料的孔徑為30nm，30nm與10nm對結果有什麼區別？
答：應該是起“離子對”的作用吧。在做多肽類樣品的時候，300A孔徑的填料相對100A孔徑肯定要選擇性好點，也就是分離度相對比較好點。流動相加入TFA，在反相色譜分離多肽和蛋白質的實驗中，使用三氟乙酸(TFA)作為離子對試劑是常見的手段。流動相中的三氟乙酸通過與疏水鍵合相和殘留的極性表麵以多種模式相互作用，來改善峰形、克服峰展寬和拖尾問題。
※三氟乙酸優於其他離子修飾劑的原因是它容易揮發，可以方便地從製備樣品中除去。另一方麵，三氟乙酸的紫外最大吸收峰低於200nm ，對多肽在低波長處的檢測幹擾很小。
20.waters，Atlantis C18柱可以用較高比例的流動相，那麽用完後應該怎麽清洗？在什麽體係中保存比教合適？
答：反相柱都可以用下麵通用的方法清洗維護：
流動相中不含緩衝鹽：
分析完成後，用甲醇（或乙腈）：水＝90：10反向衝洗色譜柱45min
流動相中含有緩衝鹽：
分析完成後，先用甲醇（或乙腈）：水＝10：90反向衝洗45min，然後再用甲醇（或乙腈）：水＝90：10反向衝洗色譜柱45min；（注意：甲醇（或乙腈）：水＝10：90容易長菌，使用時間不可超過3天）；
水性柱保存體係也不特別：
短期保存在所用的流動相中（不含緩衝鹽），中長期保存在純甲醇（乙腈）或80%的甲醇（乙腈）/水中。
21.正相矽膠柱一般保存在什麼溶劑裏麵比較合適？
答：短期和長期都建議保存在正相測定所用的流動相中，一般是正己烷和極少量的異丙醇。
22.磷(lin)酸(suan)鹽(yan)緩(huan)衝(chong)鹽(yan)滲(shen)透(tou)力(li)強(qiang)，為(wei)什(shen)麼(me)，是(shi)因(yin)為(wei)與(yu)醋(cu)酸(suan)鹽(yan)，枸(gou)椽(chuan)酸(suan)鹽(yan)相(xiang)比(bi)，基(ji)團(tuan)小(xiao)嗎(ma)，使(shi)用(yong)磷(lin)酸(suan)鹽(yan)緩(huan)衝(chong)液(ye)與(yu)其(qi)它(ta)緩(huan)衝(chong)液(ye)相(xiang)比(bi)，會(hui)使(shi)色(se)譜(pu)柱(zhu)壽(shou)命(ming)縮(suo)短(duan)多(duo)少(shao)？
答：jingchangyonglinsuanyan，zaiqitatiaojianchabuduoyiyangdeqingkuangxia，zhuzishoumingkendingbibuyonglinsuanhuanchongyanxiangduiduanyixie。danyonglinsuanyanyeyoubukequdaideyoudianba，fouzebukenengxianzaidabufenrenhaizaiyong。
23.反(fan)相(xiang)離(li)子(zi)對(dui)色(se)譜(pu)法(fa)中(zhong)，離(li)子(zi)對(dui)是(shi)如(ru)何(he)起(qi)作(zuo)用(yong)的(de)，是(shi)離(li)子(zi)對(dui)試(shi)劑(ji)的(de)非(fei)極(ji)性(xing)端(duan)溶(rong)解(jie)在(zai)填(tian)料(liao)的(de)非(fei)極(ji)性(xing)端(duan)裏(li)，解(jie)離(li)端(duan)伸(shen)向(xiang)流(liu)動(dong)相(xiang)，對(dui)含(han)胺(an)化(hua)合(he)起(qi)離(li)子(zi)交(jiao)換(huan)作(zuo)用(yong)，還(hai)是(shi)樣(yang)品(pin)與(yu)離(li)子(zi)對(dui)生(sheng)成(cheng)緊(jin)密(mi)的(de)結(jie)合(he)物(wu)，離(li)子(zi)對(dui)試(shi)劑(ji)掩(yan)藏(zang)化(hua)合(he)物(wu)中(zhong)的(de)極(ji)性(xing)基(ji)團(tuan)，還(hai)是(shi)這(zhe)種(zhong)結(jie)合(he)物(wu)是(shi)在(zai)解(jie)離(li)與(yu)結(jie)合(he)的(de)動(dong)態(tai)平(ping)衡(heng)之(zhi)中(zhong)？
答：shouxianliziduishijidejieliduanhemubiaolizixingchenglizidihewu，jiangdiqijixing，zheyangjiunengjiaohaodezaizhuzishangbaoliu。zaizhe，genjushushuixiaoyinglilun，liziduishijideshushuiduanshihenrongyiheC18lianxianghuzuoyongde，zheyanggengrongyizaizhuzishangbaoliu，suoyiworenweiliziduishijizuoyongshihunhebaoliujizhi，jichuncuidefanxiangbaoliuheliziduibaoliujizhigongtongzuoyong。
24.四烷基季銨鹽（如，四丁基硫酸氫銨、四丁基溴化銨、四丁基氫氧化銨等）在水中電離後，也形成了類似N＋H(CH2CH3)3的結構N＋(CH2CH2CH2CH3)4，這種結構也能有效的與Si－O－產生較強的靜電作用，此類離子對用的比較少，但它的作用僅是掩藏Si－O－嗎(ma)，它(ta)對(dui)物(wu)質(zhi)的(de)保(bao)留(liu)性(xing)能(neng)有(you)何(he)影(ying)響(xiang)，實(shi)驗(yan)中(zhong)發(fa)現(xian)檢(jian)測(ce)胺(an)化(hua)物(wu)時(shi)，流(liu)動(dong)相(xiang)中(zhong)加(jia)入(ru)磷(lin)酸(suan)緩(huan)衝(chong)鹽(yan)有(you)增(zeng)加(jia)物(wu)質(zhi)保(bao)留(liu)的(de)趨(qu)勢(shi)，而(er)加(jia)入(ru)三(san)乙(yi)胺(an)則(ze)會(hui)降(jiang)低(di)物(wu)質(zhi)的(de)保(bao)留(liu)能(neng)力(li)？
答：前qian麵mian提ti到dao的de四si丁ding基ji氫qing氧yang化hua銨an等deng離li子zi對dui試shi劑ji確que實shi不bu如ru辛xin磺huang酸suan鈉na等deng極ji性xing基ji是shi陰yin離li子zi的de離li子zi對dui試shi劑ji用yong得de普pu遍bian，原yuan因yin是shi酸suan類lei極ji性xing物wu質zhi很hen容rong易yi通tong過guo降jiang低dipH值的方法提高在反相色譜中的保留能力，降低pH可抑製酸的電離，使酸處於中性狀態而與疏水碳鏈的作用力增強。而堿類分析物則受矽膠基質pH上限的嚴重影響（以前上限是8，後來抬到10，直到最近雜化矽膠才將pH上限提到12左右）。
銨an鹽yan類lei離li子zi對dui試shi劑ji確que實shi有you辛xin磺huang酸suan鈉na等deng所suo不bu具ju有you的de屏ping蔽bi矽gui醇chun基ji作zuo用yong，但dan其qi主zhu要yao作zuo用yong還hai是shi疏shu水shui端duan和he疏shu水shui固gu定ding相xiang結jie合he，外wai露lu的de陽yang離li子zi親qin水shui端duan和he酸suan陰yin離li子zi作zuo用yong，從cong而er提ti高gao其qi保bao留liu能neng力li。當dang然ran同tong樣yang還hai有you第di二er種zhong解jie釋shi機ji理li，離li子zi對dui試shi劑ji先xian和he分fen析xi物wu結jie合he，掩yan藏zang極ji性xing基ji，從cong而er提ti高gao極ji性xing分fen析xi物wu在zai反fan相xiang色se譜pu中zhong的de保bao留liu能neng力li。而er且qie丁ding基ji比bi辛xin基ji疏shu水shui性xing差cha，這zhe種zhong情qing況kuang下xia，認ren為wei後hou麵mian的de結jie合he機ji理li占zhan上shang風feng的de可ke能neng性xing更geng大da。
檢測胺類化合物，加入三乙胺預先和矽醇基結合，胺和矽醇基作用被三乙胺取代，保留下降是肯定的。
25.同一根色譜柱在分析完三聚氰胺後，再分析苯甲酸、山梨酸、糖精鈉時為什麼保留時間會提前？
答：色譜柱被強保留物質汙染後，保留時間提前和滯後的情況都有，具體要看汙染物的性質，還要看分析物、固(gu)定(ding)相(xiang)和(he)汙(wu)染(ran)物(wu)三(san)者(zhe)共(gong)同(tong)作(zuo)用(yong)的(de)情(qing)況(kuang)，情(qing)況(kuang)比(bi)較(jiao)複(fu)雜(za)，有(you)時(shi)候(hou)比(bi)較(jiao)難(nan)預(yu)測(ce)是(shi)提(ti)前(qian)還(hai)是(shi)滯(zhi)後(hou)。不(bu)過(guo)你(ni)平(ping)時(shi)維(wei)護(hu)的(de)時(shi)候(hou)，注(zhu)意(yi)在(zai)測(ce)定(ding)後(hou)將(jiang)汙(wu)染(ran)物(wu)用(yong)有(you)機(ji)溶(rong)劑(ji)反(fan)衝(chong)清(qing)洗(xi)，就(jiu)可(ke)以(yi)減(jian)輕(qing)或(huo)避(bi)免(mian)這(zhe)種(zhong)情(qing)況(kuang)的(de)出(chu)現(xian)。建(jian)議(yi)每(mei)個(ge)分(fen)析(xi)方(fang)法(fa)用(yong)專(zhuan)門(men)的(de)色(se)譜(pu)柱(zhu)，長(chang)遠(yuan)看(kan)，這(zhe)樣(yang)更(geng)節(jie)省(sheng)色(se)譜(pu)柱(zhu)的(de)費(fei)用(yong)。
26.HPLC柱前衍生和柱後衍生的相關問題？1）為什麼要衍生？2）衍生化的分類？3）進行衍生，適用的化合物有哪些？4）進行衍生化的要求有哪些？5）柱前衍生和柱後衍生的優缺點？
答：色譜技術中的化學衍生法係指在色譜過程中用特殊的化學試劑（一般稱為衍生化試劑或標記試劑）使樣品成分轉變相應的衍生物之後進行分離檢測或進行檢測的方法。
目的為：
1.將紫外—可見強吸收功能基團引入被檢測對象或將其轉變為熒光衍生物，以提高檢測靈敏度；2.提高對分析樣品的分離和選擇性。
從是否與HPLC係統聯機的角度，化學衍生法分為在線online）與離線∣Offline）兩種。從發生衍生化的場合，分為柱前衍生法pre-columnderivatization）與柱後衍生法（post-columnderivatization）兩種。目前，在HPLC中，以離線的柱前衍生法（簡稱柱前衍生法）與在線的柱後衍生法（簡稱柱後衍生法）使用居多。
27.多個樣品不好分離的時候，請問該怎麼通過選擇合適的柱子來提高分離度？
答：提高分離度可從三個主要影響因素來考慮，柱效、選擇性和保留因子。可通過減小填料粒徑和增加柱長提高柱效；選擇性和固定相選擇以及pH條件有關，通過選擇合適的色譜柱和合適的pH，可以提高選擇性；有時候適當延長出峰時間增加保留因子，也可提高分離度。
28.苯基柱，氰基柱該什麼時候考慮用？
答：苯基柱用於含苯環的芳香族化合物的測定時，具有較高的選擇性。CN柱可作為一個保留能力最弱的反相柱使用，也可作為一個活性降低的正相柱使用（保留時間比矽膠柱和氨基柱低很多）。
29.同樣類型柱子還有長度，粒徑等差異，這些該怎麼去選擇？
答：長度和粒徑都是用來改變柱效的，選擇原則是夠用就好。
30.我前幾天剛剛裝上一個新的C18柱，在進樣之前我用100%的de甲jia醇chun衝chong了le半ban個ge多duo小xiao時shi。剛gang才cai看kan到dao上shang麵mian寫xie的de要yao活huo化hua什shen麼me的de？不bu知zhi道dao我wo隻zhi衝chong洗xi半ban小xiao時shi就jiu開kai始shi用yong對dui柱zhu子zi有you沒mei有you影ying響xiang？對dui出chu峰feng什shen麼me的de有you沒mei有you影ying響xiang呢ne？
答：不bu是shi所suo有you的de測ce定ding，都dou需xu要yao對dui新xin柱zhu子zi用yong所suo測ce樣yang品pin老lao化hua。但dan先xian按an方fang法fa程cheng序xu進jin樣yang幾ji針zhen，觀guan察cha到dao峰feng麵mian積ji保bao留liu時shi間jian不bu再zai有you明ming顯xian變bian化hua，再zai開kai始shi正zheng式shi測ce定ding，這zhe是shi一yi個ge好hao習xi慣guan。按an你ni現xian在zai的de做zuo法fa，如ru果guo第di一yi針zhen和he第di二er針zhen的de峰feng麵mian積ji、保留時間沒有變化，就繼續做沒影響吧。
31.現在色譜柱和儀器的接口還沒有標準化嗎，除了檢測池的出入管較小外，色譜柱的接口與peek頭不匹配的有哪個型號的色譜柱，以後使用的時候需要注意一點。同時發現使用過金屬接頭的色譜柱再換成PEEK頭，常易漏液，這是因為金屬頭易使色譜柱接口變形嗎？
答：色譜柱接頭其實大都不是色譜柱廠商自己生產的，供貨商有多個，VICI，Upchurch，Parker等(deng)，他(ta)們(men)的(de)標(biao)準(zhun)相(xiang)互(hu)之(zhi)間(jian)不(bu)統(tong)一(yi)，那(na)色(se)譜(pu)柱(zhu)接(jie)頭(tou)的(de)標(biao)準(zhun)就(jiu)統(tong)一(yi)不(bu)起(qi)來(lai)。不(bu)過(guo)一(yi)般(ban)這(zhe)個(ge)問(wen)題(ti)也(ye)不(bu)難(nan)解(jie)決(jue)的(de)，換(huan)個(ge)接(jie)頭(tou)就(jiu)可(ke)以(yi)了(le)，而(er)且(qie)現(xian)在(zai)有(you)了(le)萬(wan)用(yong)接(jie)頭(tou)，可(ke)以(yi)配(pei)所(suo)有(you)不(bu)同(tong)類(lei)型(xing)的(de)柱(zhu)頭(tou)，不(bu)泄(xie)露(lu)，連(lian)接(jie)死(si)體(ti)積(ji)又(you)很(hen)小(xiao)。
32.普通的C18柱zhu能neng作zuo為wei正zheng相xiang色se譜pu柱zhu使shi用yong嗎ma？正zheng相xiang色se譜pu體ti係xi中zhong最zui常chang用yong也ye最zui普pu通tong的de是shi那na種zhong色se譜pu柱zhu。正zheng相xiang柱zhu在zai使shi用yong過guo程cheng中zhong與yu反fan向xiang柱zhu相xiang比bi有you什shen麼me需xu要yao注zhu意yi的de地di方fang？
答：普通C18柱作為正相柱使用，我還沒聽說過。正相色譜分離模式是指固定相的極性比流動相的極性大，反過來，流動相極性大就是反相。C18固定相屬於疏水性相對比較強的，疏水性強就是極性很弱，應該找不出極性比它更弱的流動相了。
正相體係常見的柱子有：矽膠柱、氨基柱、CN基柱和Diol二(er)醇(chun)基(ji)柱(zhu)，最(zui)普(pu)通(tong)的(de)應(ying)該(gai)就(jiu)是(shi)矽(gui)膠(jiao)柱(zhu)。正(zheng)相(xiang)柱(zhu)和(he)反(fan)相(xiang)柱(zhu)比(bi)，最(zui)需(xu)要(yao)注(zhu)意(yi)的(de)是(shi)水(shui)分(fen)，正(zheng)相(xiang)柱(zhu)對(dui)水(shui)分(fen)非(fei)常(chang)敏(min)感(gan)，流(liu)動(dong)相(xiang)中(zhong)水(shui)分(fen)含(han)量(liang)的(de)些(xie)微(wei)變(bian)化(hua)對(dui)保(bao)留(liu)時(shi)間(jian)影(ying)響(xiang)很(hen)大(da)，因(yin)此(ci)正(zheng)相(xiang)柱(zhu)測(ce)定(ding)前(qian)平(ping)衡(heng)時(shi)間(jian)需(xu)要(yao)幾(ji)個(ge)小(xiao)時(shi)甚(shen)至(zhi)更(geng)長(chang)。
33.色譜柱的柱頭類型與不鏽鋼毛細管接頭有6種連接方式（在講義裏麵提到），namewomenyonghuyibanshiyexiangsepuyishigudingmouyigechangjia，ershigenjuyangpinjiancexuyaogenghuanbutongleixingdesepuzhu，namezenmepanduanwosuogoumaidesepuzhushifouyubuxiugangmaoxiguanshifoupipeine，wozhiqianzhishizhidaoanjielunhewaters都dou有you規gui定ding他ta們men自zi己ji家jia的de柱zhu子zi與yu自zi己ji家jia的de儀yi器qi配pei套tao是shi最zui合he適shi的de，而er其qi他ta廠chang家jia的de色se譜pu柱zhu都dou很hen少shao提ti及ji，在zai不bu知zhi道dao的de情qing況kuang下xia，我wo們men該gai怎zen麼me選xuan擇ze？月yue旭xu的de色se譜pu柱zhu柱zhu頭tou類lei型xing屬shu於yu哪na一yi種zhong類lei型xing呢ne？
答：不(bu)鏽(xiu)鋼(gang)毛(mao)細(xi)管(guan)接(jie)頭(tou)有(you)個(ge)缺(que)點(dian)，用(yong)過(guo)一(yi)次(ci)後(hou)卡(ka)匝(za)位(wei)置(zhi)和(he)距(ju)離(li)毛(mao)細(xi)管(guan)末(mo)端(duan)的(de)長(chang)度(du)就(jiu)固(gu)定(ding)死(si)了(le)。如(ru)果(guo)下(xia)次(ci)用(yong)的(de)色(se)譜(pu)柱(zhu)的(de)柱(zhu)頭(tou)接(jie)口(kou)深(shen)度(du)和(he)原(yuan)來(lai)的(de)不(bu)同(tong)，就(jiu)容(rong)易(yi)產(chan)生(sheng)死(si)體(ti)積(ji)和(he)泄(xie)漏(lou)。產(chan)生(sheng)的(de)死(si)體(ti)積(ji)一(yi)般(ban)不(bu)大(da)，如(ru)果(guo)隻(zhi)引(yin)起(qi)柱(zhu)效(xiao)的(de)稍(shao)微(wei)下(xia)降(jiang)而(er)沒(mei)引(yin)起(qi)拖(tuo)尾(wei)，這(zhe)個(ge)問(wen)題(ti)就(jiu)容(rong)易(yi)被(bei)忽(hu)略(lve)。引(yin)起(qi)大(da)家(jia)關(guan)注(zhu)的(de)是(shi)泄(xie)漏(lou)，如(ru)果(guo)用(yong)了(le)新(xin)柱(zhu)子(zi)，發(fa)現(xian)和(he)毛(mao)細(xi)管(guan)的(de)接(jie)口(kou)處(chu)有(you)泄(xie)漏(lou)，就(jiu)可(ke)以(yi)判(pan)斷(duan)是(shi)接(jie)頭(tou)的(de)匹(pi)配(pei)問(wen)題(ti)。最(zui)好(hao)的(de)判(pan)斷(duan)方(fang)法(fa)還(hai)是(shi)：詢問一下廠商色譜柱柱頭的類型和柱頭接口的深度，然後和毛細管接頭的規格比較。
如果用peek接頭，發生問題的情況就大大減少，因為，peek接頭卡匝位置是不固定的。
接頭與色譜柱的匹配，並沒有在實際色譜應用中造成很大的問題，有很多人都沒有關注到這個問題。一方麵原因是使用peek接頭的情況很普遍，另外，如果發現不匹配，換個毛細管接頭還是非常方便的。
34.相對於氣相色譜，液相的優勢在哪裏？做防腐劑分析時，流動相加入乙酸銨才可以出峰，原理是什麼？
答：液相和氣相相比的優勢有很多,我認為主要在於應用範圍更廣。氣相隻限於容易氣化的低分子量物質的分析測定，對象大部分是基礎化工原材料；而任何能溶解於某溶劑的物質都能用液相分析，適用對象是分子量從幾十到幾萬的廣大範圍。在製藥、化工、環保、食(shi)品(pin)和(he)刑(xing)偵(zhen)等(deng)諸(zhu)多(duo)重(zhong)要(yao)領(ling)域(yu)，液(ye)相(xiang)都(dou)已(yi)成(cheng)為(wei)主(zhu)導(dao)的(de)分(fen)析(xi)分(fen)離(li)工(gong)具(ju)。也(ye)有(you)兩(liang)者(zhe)都(dou)能(neng)應(ying)用(yong)的(de)交(jiao)叉(cha)情(qing)況(kuang)，但(dan)液(ye)相(xiang)的(de)製(zhi)樣(yang)更(geng)簡(jian)單(dan)。液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)的(de)出(chu)現(xian)克(ke)服(fu)了(le)氣(qi)相(xiang)色(se)譜(pu)不(bu)能(neng)直(zhi)接(jie)用(yong)於(yu)難(nan)揮(hui)發(fa)、熱不穩定及高分子化合物的弱點。
35.您提到“磷酸鹽緩衝鹽滲透力強，有加快矽膠溶解的副作用，它的存在會降低pH使用範圍。”，既然這樣，經常使用，柱子壽命是否也下降的快呀？
答：經jing常chang用yong磷lin酸suan鹽yan，在zai其qi它ta條tiao件jian差cha不bu多duo一yi樣yang的de情qing況kuang下xia，柱zhu子zi壽shou命ming肯ken定ding比bi不bu用yong磷lin酸suan緩huan衝chong鹽yan相xiang對dui短duan一yi些xie，但dan，用yong磷lin酸suan鹽yan也ye有you不bu可ke取qu代dai的de優you點dian吧ba，否fou則ze不bu可ke能neng現xian在zai大da部bu分fen人ren還hai在zai用yong。
36.CN柱(zhu)的(de)保(bao)存(cun)需(xu)要(yao)在(zai)低(di)溫(wen)條(tiao)件(jian)，但(dan)是(shi)，又(you)不(bu)能(neng)太(tai)低(di)，使(shi)固(gu)定(ding)相(xiang)凍(dong)結(jie)，怎(zen)麼(me)控(kong)製(zhi)這(zhe)個(ge)溫(wen)度(du)？怎(zen)麼(me)判(pan)斷(duan)固(gu)定(ding)相(xiang)是(shi)否(fou)被(bei)凍(dong)結(jie)？固(gu)定(ding)相(xiang)凍(dong)結(jie)後(hou)會(hui)是(shi)什(shen)麼(me)樣(yang)的(de)現(xian)象(xiang)？
答：所謂低溫儲存，就是放到陰涼處或者放到冰箱的冷藏室。儲存液隻要不是純水，冰點都比較低，純甲醇的冰點是零下90度以下了。
37.我(wo)們(men)測(ce)試(shi)樣(yang)品(pin)時(shi)，經(jing)常(chang)會(hui)關(guan)心(xin)柱(zhu)壓(ya)是(shi)否(fou)太(tai)高(gao)，但(dan)是(shi)在(zai)購(gou)買(mai)色(se)譜(pu)柱(zhu)時(shi)，並(bing)沒(mei)有(you)說(shuo)每(mei)一(yi)根(gen)色(se)譜(pu)柱(zhu)的(de)最(zui)大(da)使(shi)用(yong)壓(ya)力(li)是(shi)多(duo)少(shao)？針(zhen)對(dui)這(zhe)樣(yang)的(de)情(qing)況(kuang)，用(yong)戶(hu)怎(zen)麼(me)判(pan)斷(duan)柱(zhu)壓(ya)是(shi)否(fou)超(chao)過(guo)該(gai)柱(zhu)的(de)極(ji)限(xian)？
答：裝柱時的壓力比使用時高很多，所以柱壓對色譜柱本身在使用時沒有極限問題存在，倒是一般儀器有個40Mpa的上限。如果色譜分離度還能滿足分析方法要求，柱壓隻要儀器能承受就OK吧。
38.使用緩衝液不當，使矽膠溶解並重新形成粉末後，會出現什麼樣的異常情況？怎麼處理？
答：出現異常就是柱壓升高。xiaofenmozailiudongxiangbuduanchongxidaidongxia，zuihouhuijujizaizhuzichukouduan，chenjizaihoushaiban。chulifangfazhiyouchaixiahoushaibanjinxingqingxihuogenghuan，danzheyangzuohuiyingxiangdaozhuchuang，chulihouzhuxiaohuixiajiang。
39.今天才知道濾膜的材質分了這麼幾種：再生纖維素、聚四氟乙烯、硝酸纖維和醋酸纖維等，之前隻知道有有機係和水係之分？各種不同材質的濾膜適合於什麼樣的樣品？
答：
再生纖維素膜：具有蛋白質吸收低，適用於水溶性樣品和有機溶劑；
聚四氟乙烯：適用於所有有機溶劑，酸和鹽；
尼龍66：適用於絕大多數有機溶劑和水溶液，可用於強酸，70%的乙醇，二氯甲烷，不適用與二甲基甲酰胺；
醋酸纖維：不適用有機溶劑，特別適用水基溶液。
40.woyuanlaiyudaogezheyangdewenti，yizhibuzhidaoyuanyin。gangnazhuzizuo，seputiaojianshichengshude，jueduimeiwenti，danshigaitiaojianxiabaoliudewuzhibiandebubeibaoliu，biru，benlaibaoliushijian15分鍾卻怎麼調比例都是2～3分鍾就出峰了，維護後，下次再使用又正常了，什麼樣原因啊？
答：最大可能是發生相塌陷了。C18柱和高密鍵合封尾的C8柱，在高含水流動相下會發生相塌陷，後果就是保留能力大幅下降。用有機相比例較高的流動相衝洗後，又可恢複正常性能。
41.UPLC色譜柱可以反衝嗎？HPLC的色譜柱可以簡單反衝，但是，UPLC的色譜柱.也是一樣的嗎？如果壓力偏高，該怎麼辦？
答：如果兩端篩板孔徑對稱，UPLC柱應該也是可以反衝的。發現壓力偏高，當然也可以用反衝清洗的方法維護，UPLC柱和普通色譜柱比，隻是壓力高一點，不應該有什麼特殊吧。
42.常規LC的柱子粒度小，柱效高，現在有3.5μm的常規柱，不知道用3.5μm*250的壓力與4.6μm的壓力相差多少？
答：一般柱子4.6mm×250mm指的是其內徑和長度。粒徑才用μm的單位，但一般標的是5μm，也有3.5μm的。其它條件一樣，光粒徑是3.5μm和5μm的柱壓差別，理論上3.5μm柱子的柱壓是5μm柱子的(5/3.5)平方倍數，即，2.04倍，簡單說就是2倍。
43.因為，不知道流動相已走完，液相色譜柱空走了大概一晚上，請問這種情況下柱子還能用嗎？如果可以應該如何再生？
答：能用的！可(ke)能(neng)柱(zhu)子(zi)裏(li)會(hui)有(you)氣(qi)泡(pao)進(jin)去(qu)，但(dan)之(zhi)後(hou)，多(duo)用(yong)流(liu)動(dong)相(xiang)衝(chong)衝(chong)，看(kan)到(dao)基(ji)線(xian)穩(wen)定(ding)，就(jiu)沒(mei)問(wen)題(ti)了(le)。用(yong)色(se)譜(pu)柱(zhu)的(de)保(bao)存(cun)液(ye)低(di)流(liu)速(su)長(chang)時(shi)間(jian)衝(chong)洗(xi)，然(ran)後(hou)，再(zai)檢(jian)測(ce)一(yi)下(xia)柱(zhu)效(xiao)，看(kan)柱(zhu)子(zi)是(shi)否(fou)恢(hui)複(fu)，液(ye)相(xiang)最(zui)好(hao)設(she)置(zhi)一(yi)下(xia)最(zui)低(di)壓(ya)限(xian)，這(zhe)樣(yang)就(jiu)不(bu)怕(pa)流(liu)動(dong)相(xiang)走(zou)光(guang)而(er)會(hui)損(sun)傷(shang)色(se)譜(pu)柱(zhu)。
44.在(zai)梯(ti)度(du)洗(xi)脫(tuo)的(de)時(shi)候(hou)，如(ru)果(guo)整(zheng)個(ge)時(shi)間(jian)程(cheng)序(xu)越(yue)長(chang)，保(bao)留(liu)時(shi)間(jian)的(de)重(zhong)現(xian)性(xing)越(yue)差(cha)，尤(you)其(qi)是(shi)後(hou)出(chu)的(de)峰(feng)重(zhong)現(xian)性(xing)差(cha)更(geng)明(ming)顯(xian)，我(wo)猜(cai)估(gu)計(ji)是(shi)流(liu)量(liang)本(ben)身(shen)的(de)誤(wu)差(cha)引(yin)起(qi)的(de)，但(dan)是(shi)怎(zen)麼(me)盡(jin)量(liang)避(bi)免(mian)這(zhe)種(zhong)情(qing)況(kuang)的(de)出(chu)現(xian)，使(shi)保(bao)留(liu)時(shi)間(jian)重(zhong)現(xian)性(xing)更(geng)好(hao)？
答：這個要控製好環境溫度和柱溫，易揮發的流動相要適當密封，同時，保留時間的漂移與儀器的精度也有關係。
45.我對聚苯乙烯-二乙烯苯柱很有興趣，主要是它耐高溫、耐酸堿、但有關這方麵的文獻很少，但對於他的分離效能我一直心裏沒底，我的問題有三：
1）分離效果與ODS比較，是相當呢，還是更勝一籌，或是更差？
2）我原以為它是整體住，但看過資料後發現也是顆粒的比如，5μ，請問該類型的柱是否符合速率理論、是不是粒徑越小分離效果會幾何級的增加？
3）問什麼沒有1.7μ的這種柱出現呢？
答：聚合物基質色譜柱的優點你已經提到了，它的缺點有：對(dui)小(xiao)分(fen)子(zi)分(fen)離(li)的(de)柱(zhu)效(xiao)相(xiang)對(dui)矽(gui)膠(jiao)基(ji)質(zhi)色(se)譜(pu)柱(zhu)要(yao)低(di)，表(biao)麵(mian)衍(yan)生(sheng)化(hua)修(xiu)飾(shi)也(ye)沒(mei)有(you)在(zai)矽(gui)膠(jiao)表(biao)麵(mian)豐(feng)富(fu)，機(ji)械(xie)強(qiang)度(du)低(di)耐(nai)壓(ya)性(xing)不(bu)好(hao)，還(hai)有(you)碰(peng)到(dao)某(mou)些(xie)有(you)機(ji)溶(rong)劑(ji)會(hui)溶(rong)脹(zhang)等(deng)。。。
聚合物基質柱當然也符合速率理論！它(ta)柱(zhu)效(xiao)低(di)主(zhu)要(yao)是(shi)因(yin)為(wei)，分(fen)析(xi)物(wu)在(zai)聚(ju)合(he)物(wu)固(gu)定(ding)相(xiang)中(zhong)的(de)傳(chuan)質(zhi)速(su)度(du)比(bi)在(zai)矽(gui)膠(jiao)表(biao)麵(mian)固(gu)定(ding)相(xiang)中(zhong)慢(man)很(hen)多(duo)。不(bu)過(guo)粒(li)徑(jing)越(yue)小(xiao)柱(zhu)效(xiao)幾(ji)何(he)級(ji)增(zeng)加(jia)的(de)規(gui)律(lv)還(hai)是(shi)有(you)的(de)。1.7μm的矽膠基質填料也是最近幾年才商品化，1.7μm的(de)聚(ju)合(he)物(wu)基(ji)質(zhi)沒(mei)出(chu)來(lai)也(ye)正(zheng)常(chang)，或(huo)許(xu)永(yong)遠(yuan)都(dou)不(bu)出(chu)來(lai)了(le)，因(yin)為(wei)，聚(ju)合(he)物(wu)耐(nai)壓(ya)差(cha)，粒(li)徑(jing)做(zuo)這(zhe)麼(me)小(xiao)，它(ta)根(gen)本(ben)承(cheng)受(shou)不(bu)了(le)這(zhe)個(ge)高(gao)壓(ya)吧(ba)，但(dan)願(yuan)以(yi)後(hou)會(hui)有(you)能(neng)抗(kang)高(gao)壓(ya)的(de)聚(ju)合(he)物(wu)填(tian)料(liao)研(yan)究(jiu)出(chu)來(lai)。
46.我(wo)之(zhi)前(qian)有(you)了(le)解(jie)過(guo)手(shou)性(xing)色(se)譜(pu)柱(zhu)，之(zhi)前(qian)買(mai)過(guo)大(da)賽(sai)璐(lu)的(de)手(shou)性(xing)柱(zhu)，其(qi)手(shou)性(xing)柱(zhu)價(jia)格(ge)相(xiang)比(bi)普(pu)通(tong)反(fan)相(xiang)色(se)譜(pu)柱(zhu)，要(yao)高(gao)出(chu)很(hen)多(duo)倍(bei)，不(bu)知(zhi)道(dao)是(shi)本(ben)身(shen)柱(zhu)子(zi)裝(zhuang)填(tian)技(ji)術(shu)的(de)難(nan)度(du)大(da)還(hai)是(shi)其(qi)他(ta)什(shen)麼(me)原(yuan)因(yin)？它(ta)的(de)主(zhu)要(yao)技(ji)術(shu)關(guan)鍵(jian)在(zai)什(shen)麼(me)方(fang)麵(mian)？
答：手shou性xing柱zhu技ji術shu關guan鍵jian在zai於yu手shou性xing填tian料liao的de開kai發fa，大da賽sai璐lu公gong司si在zai手shou性xing填tian料liao的de生sheng產chan技ji術shu方fang麵mian申shen請qing了le專zhuan利li保bao護hu，別bie的de廠chang商shang不bu能neng生sheng產chan，導dao致zhi手shou性xing柱zhu價jia格ge居ju高gao不bu下xia。前qian幾ji年nian傳chuan說shuo該gai公gong司si的de專zhuan利li保bao護hu期qi限xian快kuai到dao了le，國guo際ji國guo內nei有you些xie公gong司si就jiu想xiang著zhe仿fang製zhi生sheng產chan。後hou來lai又you聽ting說shuo專zhuan利li還hai沒mei到dao期qi，情qing況kuang不bu明ming。
47.“樣品與離子對生成緊密的結合物，離子對試劑掩藏化合物中的極性基團”這句話是什麼意思？離子對怎麼樣掩蔽化合物中極性基團？不就是通過靜電引力的作用形成離子締合物，來降低其極性的嗎？
答：離子對色譜是解決強極性物質在反相色譜中保留能力不足的一個有效的途徑。有些堿性極性物質，即使用100%水相做流動相，且無論在色譜柱能承受的pH範圍內怎麼去調節pH，baoliunenglidoubugou。ruguoxuyaofenlidezufenzhongquanshikeyilizitaicunzaide，nahaikeyixuanzelizijiaohuansepujinxingfenli。burandehua，jiuzhiyouxuanzeliziduisepufangfale，jinguantayouliuchuandenameduofuzuoyongcunzai。
離子對試劑含親水基和疏水基，很像表麵活性劑，所以一開始離子對色譜也稱為“皂色譜”。liziduizuoyongdejiliyouliangzhongjieshi，nishangmiandouyijingtidaole。daodishinazhongjieshidui，shangwudinglun，shijishangyemeibiyaoqudinglun，fanzhengliangzhongjieshidoutongjiukeyile。zhuliudejieshiyeshinixiantidaodejili，xiamianshiyitugengzhiguan：
我個人認為，兩種機理都可能存在，要看離子對試劑、固(gu)定(ding)相(xiang)和(he)分(fen)析(xi)物(wu)這(zhe)三(san)者(zhe)本(ben)身(shen)情(qing)況(kuang)而(er)定(ding)。如(ru)果(guo)離(li)子(zi)對(dui)試(shi)劑(ji)的(de)疏(shu)水(shui)端(duan)和(he)固(gu)定(ding)相(xiang)之(zhi)間(jian)的(de)結(jie)合(he)力(li)相(xiang)對(dui)更(geng)強(qiang)，示(shi)意(yi)圖(tu)的(de)作(zuo)用(yong)機(ji)理(li)會(hui)占(zhan)上(shang)風(feng)。反(fan)之(zhi)，離(li)子(zi)對(dui)試(shi)劑(ji)親(qin)水(shui)端(duan)和(he)分(fen)析(xi)物(wu)導(dao)致(zhi)掩(yan)藏(zang)極(ji)性(xing)端(duan)的(de)作(zuo)用(yong)力(li)更(geng)強(qiang)，你(ni)後(hou)麵(mian)提(ti)到(dao)的(de)機(ji)理(li)更(geng)可(ke)能(neng)。總(zong)之(zhi)，要(yao)看(kan)你(ni)用(yong)的(de)什(shen)麼(me)離(li)子(zi)對(dui)試(shi)劑(ji)，是(shi)何(he)種(zhong)的(de)分(fen)析(xi)物(wu)等(deng)具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)不(bu)同(tong)而(er)不(bu)同(tong)吧(ba)。
48.我(wo)們(men)在(zai)用(yong)的(de)氨(an)基(ji)柱(zhu)時(shi)，有(you)時(shi)候(hou)峰(feng)型(xing)突(tu)然(ran)變(bian)寬(kuan)，有(you)拖(tuo)尾(wei)，用(yong)一(yi)段(duan)時(shi)間(jian)就(jiu)又(you)好(hao)了(le)，不(bu)明(ming)白(bai)是(shi)什(shen)麼(me)原(yuan)因(yin)造(zao)成(cheng)的(de)，如(ru)果(guo)要(yao)再(zai)生(sheng)氨(an)基(ji)柱(zhu)的(de)時(shi)候(hou)應(ying)該(gai)怎(zen)麼(me)做(zuo)呢(ne)？是(shi)像(xiang)您(nin)先(xian)前(qian)回(hui)答(da)的(de)問(wen)題(ti)中(zhong)提(ti)到(dao)的(de)，用(yong)一(yi)定(ding)比(bi)例(li)的(de)氨(an)水(shui)衝(chong)洗(xi)嗎(ma)？氨(an)基(ji)柱(zhu)可(ke)以(yi)直(zhi)接(jie)用(yong)純(chun)水(shui)衝(chong)洗(xi)嗎(ma)？記(ji)得(de)當(dang)時(shi)買(mai)的(de)氨(an)基(ji)柱(zhu)那(na)個(ge)使(shi)用(yong)說(shuo)明(ming)書(shu)上(shang)說(shuo)不(bu)能(neng)用(yong)純(chun)水(shui)衝(chong)？是(shi)這(zhe)樣(yang)的(de)嗎(ma)？如(ru)果(guo)可(ke)以(yi)衝(chong)的(de)話(hua)，一(yi)般(ban)衝(chong)多(duo)久(jiu)？
答：氨基柱的矽膠孔內的氨基濃度非常高（大約有1mol/L），在有水存在的時候，在孔內形成一個pH=10左右甚至超過10的很強的堿性小環境，並會導致矽膠基體慢慢溶解。不過矽膠基體的溶解會生成酸性的矽醇基，又會降低孔內的pH值(zhi)，延(yan)緩(huan)矽(gui)膠(jiao)基(ji)體(ti)的(de)溶(rong)解(jie)進(jin)程(cheng)。一(yi)段(duan)時(shi)間(jian)後(hou)，兩(liang)個(ge)相(xiang)反(fan)的(de)過(guo)程(cheng)會(hui)達(da)成(cheng)一(yi)個(ge)動(dong)態(tai)平(ping)衡(heng)，從(cong)而(er)穩(wen)定(ding)下(xia)來(lai)。對(dui)你(ni)問(wen)題(ti)提(ti)到(dao)的(de)這(zhe)個(ge)現(xian)象(xiang)，我(wo)想(xiang)到(dao)的(de)是(shi)這(zhe)個(ge)原(yuan)因(yin)。
氨基柱，要看氨基柱的應用模式，是正相還是HILIC？這兩種模式的情況是大不相同的。正相使用，一般很怕有水，但HILIC模式應用，一般流動相是乙腈/水，是不怕水的。buguo，jianheanbingjijituanfeichangrongyishuijie，suoyiyibananjizhubushiyibaocunyoushuiderongjizhong。zuoweizhengxiangyingyongshi，liudongxiangzhongyaoqiuyidiandoubunenghanshui，danqingxizhuzishangdewuranwuzhi，shikeyihanshuide，yinwei，shuiyouqiangjixing，zaizhengxiangsepushangxituonenglijiqiang，dangranbubiyong100%純水。氨基柱具體衝洗方法，正相條件按照正相矽膠柱的清洗方法，HILIC模式按C18柱的清洗方法。
49.采用國標用C18柱測定辣椒精辣度，將辣椒精中添加吐溫係列乳化劑做成水溶辣椒精，請問乳化劑對C18柱是否有影響？
答：乳化劑和離子對試劑類似，有極性端和非極性端，肯定會對C18柱有影響。不過，如果辣椒精是極性物質，乳化劑的存在可以提高其在C18柱上的保留能力。
50.gongsianzhaoguobiaocedinglajiaohongsesuzhongsudanhonghanliang，biaopinfenlihenhao，fengyebucuo，danshi，lajiaohongsesuyouyugensudanhongxingzhihenxiangsi，qieyansejiaoshen，fenlixiaoguohencha，shoudelvhendi，cedingjieguopianchahenda。gairuhechuliyangpin？sesushifouhuijiangdizhuxiao？
答：色素不會降低柱效，但，辣椒紅色素主峰濃度過大，會影響與臨近雜質峰的分離。可考慮稀釋樣品或試試用柱效更高的柱子。
