
目標
在不進行衍生的條件下, 證明ACQUITY UPLC® H-CLASS係統的多元混合能力,配合使用沃特世 黃曲黴毒素分析包,可提高黃曲黴毒素M1,G2,G1,B2和B1分離的分辨率且縮短分析時間。
背景
黃曲黴毒素是由真菌、黃曲黴菌和寄生曲黴代謝生成的一組真菌毒素。它們可出現在各種食品中,如穀物、花生、調味料和乳製品。天然形成的黃曲黴毒素有四種:B1,B2,G1和G2。二次代謝產物M1,是乳牛食用B1汙染的穀物後代謝生成的副產物,可汙染乳製品,如牛奶。
這些化合物具有毒性,可對人類和動物產生致癌作用。B1和G1是(shi)四(si)種(zhong)天(tian)然(ran)產(chan)生(sheng)的(de)毒(du)素(su)中(zhong)毒(du)性(xing)最(zui)大(da)的(de)兩(liang)種(zhong)。由(you)於(yu)其(qi)毒(du)性(xing)強(qiang),政(zheng)府(fu)法(fa)規(gui)部(bu)門(men)對(dui)食(shi)品(pin)中(zhong)黃(huang)曲(qu)黴(mei)毒(du)素(su)的(de)含(han)量(liang)進(jin)行(xing)了(le)嚴(yan)格(ge)的(de)限(xian)製(zhi)。因(yin)此(ci),食(shi)品(pin)行(xing)業(ye)需(xu)要(yao)靈(ling)敏(min)、精確且重現性良好的分析方法對這些物質進行檢測。這些方法通常基於反相HPLC色譜分離和熒光檢測。但是,由於反相洗脫會使黃曲黴毒素B1和G1的熒光效應發生猝滅,通過使用衍生化以增強這些待測物的反應。常規檢測是使用三氟乙酸(TFA)進行柱前衍生以及采用碘法、電化學衍生溴法或光化學UV衍生法的柱後衍生。
這些方法耗時較長,並且需要購置昂貴的柱後反應器,或為了獲得電化學生成溴而購置的電化學單元。尤其是TFA的使用會增加技術人員的安全隱患。
解決方案
樣品前處理采用基於VICAM AflaTest®P方法學的沃特世黃曲黴毒素分析包進行處理。采用ACQUITY UPLC H-CLASS係統,配合其UPLC®優化的熒光(FLR)檢測器,黃曲黴毒素M1,G2,G1,B2和B1的基線分離分析時間為4.5分鍾。無需進行衍生化。ACQUITY UPLC H-CLASS係統擁有四元溶劑管理器(QSM)和Auto.Blend TM技術,可對溶劑進行動態程序化混合。將水、甲醇和乙腈的三路混合連接ACQUITY UPLC BEH C18柱即可完成分離。


圖1. 采用FLR 檢測器和高通量流通池的ACQUITY UPLC H-CLASS係統進行黃曲黴毒素分離
總結
采用ACQUITY UPLC H-CLASS係統兩個最直接的優勢是,保留了傳統HPLC儀器的操作方法的同時,應用UPLC的功能,可將分析時間從12分鍾大大縮短至4.5分鍾。
消(xiao)除(chu)柱(zhu)後(hou)衍(yan)生(sheng)係(xi)統(tong)和(he)柱(zhu)後(hou)流(liu)量(liang)降(jiang)低(di)造(zao)成(cheng)的(de)譜(pu)帶(dai)展(zhan)寬(kuan),形(xing)成(cheng)尖(jian)峰(feng),實(shi)現(xian)高(gao)信(xin)噪(zao)比(bi)。因(yin)此(ci)能(neng)夠(gou)實(shi)現(xian)更(geng)精(jing)確(que)的(de)積(ji)分(fen)和(he)定(ding)量(liang)。無(wu)需(xu)衍(yan)生(sheng)化(hua)也(ye)可(ke)以(yi)簡(jian)化(hua)係(xi)統(tong),降(jiang)低(di)對(dui)培(pei)訓(xun)、故障排除和維護的需求。另外,采用UPLC替代HPLC也可以降低約85%的溶劑消耗量。
配有FLR檢測器和黃曲黴毒素分析包的ACQUITY UPLC H-CLASS係統可使實驗室更靈敏地對黃曲黴毒素進行定量分析而無需進行衍生化。分析時間的減少可使得樣品周轉更快,效率更高。
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