一、開箱檢查:
打開包裝箱,查看斜麵是否破損,菌株編號與說明書是否一致。
二、實驗準備:
仔細閱讀菌株說明書,準備2個新鮮平板或斜麵。
三、器材滅菌:
斜麵試管表麵消毒後,轉移至生物安全櫃中,管口灼燒滅菌冷卻備用。接種鋤和接種鏟在酒精燈外焰翻轉灼燒滅菌3-5分鍾,冷卻備用,冷卻後用接種鋤在斜麵上相距0.5cm處切兩條平行線(與試管垂直)。
四、切分斜麵:
換接種鏟在兩條平行線之間相距0.5cm處切兩條平行線(與試管平行),形成0.5cm*0.5cm的小正方形菌塊。
五、黴菌轉接:
用接種鏟挑取菌塊平放到平板或斜麵(固體瓊脂表麵)上(菌塊正麵朝上)。轉接多個平板或斜麵,重複以上操作即可。
六、完成培養:
平板正放,斜麵傾斜放置於黴菌培養箱中培養。(參照菌種說明書上的培養條件設置溫度)
(1) 實驗材料
根黴,毛黴,黑曲黴,青黴,土豆瓊脂培養基,培養皿,載玻片,蓋玻片,鑷子,顯微鏡,小刀,U形管等。
(2) 實驗步驟
1、配置培養基:根據原料用量配置土豆培養基。配置時,先急火煮沸,在溫火加熱20min,若有渾濁出現,則需過濾,然後定容。包紮土豆培養基,甘油等其他用品。滅菌後取出備用2、培養小室準備及滅菌 在培養皿底部鋪一張略小於皿底的圓形濾紙片,濾紙片上依次放上“U”形載玻片擱架、載玻片、蓋玻片-四片,蓋上皿蓋,牛皮紙包紮,於恒溫幹燥箱中121℃滅菌30min烘幹備用;
2、瓊脂薄片製作:
a) 將稍微冷卻的培養基,倒在培養皿 中,做成薄平板。培養基應該要倒 得薄而均勻。注意無菌操作。
b) 用解剖刀將瓊脂薄平板切成邊長不大於1cm的瓊脂薄片
c) 用解剖刀將瓊脂薄片移至小室載玻片上(一個載玻片上方兩塊薄片)
3、取菌接種:用接種環挑取少量待觀察的黴菌孢子(黴菌菌種的表麵輕輕刮取即可),接(jie)種(zhong)於(yu)固(gu)體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)邊(bian)緣(yuan),以(yi)便(bian)於(yu)黴(mei)菌(jun)生(sheng)長(chang)。接(jie)種(zhong)時(shi)隻(zhi)要(yao)將(jiang)帶(dai)菌(jun)的(de)接(jie)種(zhong)環(huan)在(zai)載(zai)玻(bo)片(pian)上(shang)輕(qing)輕(qing)碰(peng)幾(ji)下(xia)即(ji)可(ke)。接(jie)種(zhong)量(liang)要(yao)少(shao),以(yi)免(mian)培(pei)養(yang)後(hou)菌(jun)絲(si)過(guo)於(yu)稠(chou)密(mi)而(er)影(ying)響(xiang)觀(guan)察(cha)。
4、加蓋玻片:用yong無wu菌jun鑷nie子zi將jiang皿min內nei的de蓋gai玻bo片pian蓋gai在zai瓊qiong脂zhi薄bo層ceng上shang,用yong鑷nie子zi輕qing壓ya蓋gai玻bo片pian,使shi蓋gai玻bo片pian和he載zai玻bo片pian之zhi間jian的de距ju離li相xiang當dang接jie近jin,但dan不bu能neng壓ya扁bian。蓋gai玻bo片pian不bu能neng緊jin貼tie載zai玻bo片pian,要yao彼bi此ci留liu有you小xiao縫feng隙xi,一yi是shi為wei了le通tong氣qi,二er是shi使shi各ge部bu分fen結jie構gou平ping行xing排pai列lie,易yi於yu觀guan察cha。
5、倒保濕劑:每皿倒入約2-3mL 20%的經滅菌處理的甘油,使皿內濾紙完全濕潤,以保持皿內濕度,蓋上皿蓋。製成載玻片濕室。
6、正置培養:將平皿置於27℃黴菌培養箱中培養一周。
7、觀察: 將培養好的載玻片取出,置於顯微鏡下直接觀察。
(3)實驗結果及分析
實驗結果
1.根黴:菌絲無隔,有假根、匍匐菌絲。假根著生處有向上直立的孢囊梗,其頂端膨大成孢子囊,底部為半球形囊軸。
2.毛黴:孢囊梗直接由菌絲出,頂端為球形孢子囊
3.黑曲黴:菌絲有隔,氣生菌絲分化為分生孢子梗(無隔),頂端 膨脹為球狀頂囊。
4.青黴:菌絲有隔,分生孢子梗頂端不膨大,無頂囊,多次分枝成幾輪小梗,小梗頂端長孢子。分生孢子梗呈掃帚狀。
如何讓黴菌產孢子?
一般微生物都會在逆境下產孢子,比如低溫、ziwaizhaoshedengeliedeshengcuntiaojian,youdeqingkuangxia,yangguangzhaosheyenengcushichanbao。butongdejundechanbaotiaojianhaibutaiyiyang,yaoyinjuneryi,hepeiyangjiyeyouguan。keyizhaozhaoxiangguanziliaozhazhachanbaopeiyangji,keyishishishuiqiongzhipeiyangji(直接在水中加瓊脂、無其他營養物質)。
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