一、感官檢驗
各種產品的感官檢驗基本包含組織狀態、色澤、氣味、滋味是否正常,有無異物,液體樣品有無分層及渾濁現象,粉狀樣品有無水濕、結塊,有無黴變、腐敗變質等現象。
在感官檢驗時同時要檢驗產品的生產日期、保質期、淨含量等。
二、理化檢驗作業指導書
(一)化學試劑
化學試劑根據用途分為:
一般試劑、基礎試劑、高純試劑、色譜試劑、生化試劑、光譜純試劑和指示劑等。一般用於食品檢驗的有一般試劑、基礎試劑、高純試劑和專用試劑。
基礎試劑:
可ke用yong作zuo基ji準zhun物wu質zhi的de試shi劑ji叫jiao做zuo基ji準zhun試shi劑ji,也ye可ke稱cheng為wei標biao準zhun試shi劑ji。基ji礎chu準zhun試shi劑ji可ke用yong來lai直zhi接jie配pei製zhi標biao準zhun溶rong液ye,用yong來lai校xiao正zheng或huo標biao定ding其qi他ta化hua學xue試shi劑ji。如ru在zai配pei置zhi標biao準zhun溶rong液ye時shi用yong於yu標biao定ding標biao準zhun溶rong液ye用yong的de基ji準zhun物wu。
化學試劑的儲存:
(1)化學試劑大多數都具有毒性及危害性,要加強管理。
(2)隔離存放:易燃類、劇毒類、強腐蝕性類、低溫貯存的等分類放置;要求化驗人員有一定的相關知識。
(3)一般存放於通風、陰涼、溫度低於30℃的藥品櫃中。
有些藥品遇光容易分解,避光保存。
固體、液體、酸、堿分別放置。
(二)儀器和器皿
(1)檢驗所用的儀器應處於正常狀態,要符合精度要求;同時高級的精密儀器要由經過專業培訓的人員或專業技術人員操作,不可在未弄清使用方法前動用儀器。
(2)儀器因經常使用,檢測性能會逐漸降低,所以測試儀器要定期檢定和校準。
(3)一yi般ban的de玻bo璃li器qi皿min采cai用yong一yi次ci計ji量liang。可ke以yi是shi送song到dao法fa定ding的de計ji量liang單dan位wei進jin行xing計ji量liang,也ye可ke以yi送song一yi套tao到dao法fa定ding的de計ji量liang單dan位wei進jin行xing計ji量liang,然ran後hou用yong這zhe套tao計ji量liang好hao的de容rong器qi對dui本ben企qi業ye生sheng產chan中zhong使shi用yong的de容rong器qi進jin行xing自zi校xiao準zhun。玻bo璃li儀yi器qi的de計ji量liang一yi定ding要yao結jie合he本ben企qi業ye的de實shi際ji情qing況kuang合he理li進jin行xing校xiao正zheng,並bing不bu是shi所suo有you的de儀yi器qi都dou要yao送song檢jian,但dan作zuo為wei判pan定ding數shu據ju使shi用yong的de器qi皿min一yi定ding要yao計ji量liang。
(三)溶液的配製
1.標準溶液的配製
配製標準溶液用水,應符合GB/T 6682-2008的要求。
所用試劑純度應在分析純以上。標定所用的基準試劑應為容量分析工作中使用的基準試劑。
所用分析天平及砝碼應定期檢定。
所用滴定管、容量瓶及移液管均需定期校正。校正方法按JJG 196-1990《基本玻璃量器》中規定進行。
製備標準溶液的溫度係指20℃ 時的濃度,在標定的使用時,如溫度有差異,應按GB/T 601-2002中附錄A進行補正。
標定標準溶液時,平行試驗不得少於8次,兩人各作4次平行測定,檢測結果在按GB/T 601-2002規定的方法進行數據的取舍後取平均值,濃度值取4位有效數字。
凡規定用“標定”和“比較”兩種方法測定濃度時,不得略去其中任何一種。濃度值以標定結果為準。
配製濃度等於或低於0.02 mol/L的標準溶液時,應於臨用前將濃度高的標準溶液用煮沸並冷卻了純水稀釋,必要時重新標定。
碘量法反應時,溶液溫度不能過高,一般在15-20℃之間進行。
滴定分析用標準溶液在常溫(15-25℃)下,保存時間一般不得超過2個月。
2.標準溶液配製的分類:
有直接配製法和標定法兩種。
(1)直接配製法
在分析天平上準確稱以一定量的已幹燥的基準物(基準試劑)溶於純水後,轉入已校正的容量瓶中,用純水稀釋至刻度,搖勻即可。
(2)標定法
很多試劑並不符合基準物的條件,例如市售的濃鹽酸中HCL很hen易yi揮hui發fa,固gu體ti氫qing氧yang化hua鈉na很hen易yi吸xi收shou空kong氣qi中zhong的de水shui分fen二er氧yang化hua碳tan,高gao錳meng酸suan鉀jia不bu易yi提ti純chun而er易yi分fen解jie等deng。因yin此ci它ta們men都dou不bu能neng直zhi接jie配pei製zhi標biao準zhun溶rong液ye。一yi般ban暗an先xian將jiang這zhe些xie物wu質zhi配pei成cheng近jin似si所suo需xu濃nong度du的de溶rong液ye,再zai用yong基ji準zhun物wu測ce定ding其qi準zhun確que濃nong度du。這zhe一yi操cao作zuo稱cheng為wei標biao定ding。
3.配製溶液注意事項
配製溶液的蒸餾水一定要達到規定標準,防止水中雜質影響實驗結果。
稱量要準
特te別bie是shi在zai配pei製zhi標biao準zhun溶rong液ye時shi,稱cheng取qu標biao準zhun物wu質zhi的de量liang要yao準zhun確que到dao小xiao數shu點dian後hou第di四si位wei,稱cheng取qu的de試shi劑ji要yao毫hao無wu損sun失shi地di轉zhuan移yi到dao容rong量liang瓶ping內nei,定ding容rong要yao準zhun確que。作zuo為wei檢jian驗yan人ren員yuan要yao學xue會hui看kan懂dong標biao準zhun要yao求qiu,如ru標biao準zhun上shang寫xie著zhe“準確稱取”或“精確到0.0001g、0.001g”的要求,就要準確稱取到相應的精度要求;同時在稱取過程中盡量減少中間變更的容器。
配製標準溶液時,需要幹燥的試劑或基準物(根據標準中的具體要求)一定要進行烘幹後方可使用,而且要在烘幹後盡快使用。
每瓶試劑溶液必須有標明名稱、濃度和配製日期的標簽,標準溶液的標簽還應標明標定日期、標定者。
溶液要用帶塞的試劑瓶盛裝。見光易分解的溶液要裝於棕色瓶中,揮發性試劑、見空氣易變質及放出腐蝕性氣體的溶液,瓶塞要嚴密。濃堿液應用塑料瓶裝,如裝在玻璃瓶中,要用橡皮塞緊,不能用玻璃磨口塞。
配製硫酸、磷酸、硝酸等溶液時,都應把酸倒入水中,對於溶解時放熱較多的試劑,不可在試劑瓶中配製,以免炸裂。
不能用手接觸腐蝕性及有劇毒的溶液。劇毒溶液應先作解毒處理,不可直接倒入下水道。
(四)樣品的理化檢驗
三、微生物作業指導書
(一)樣品的采集
1.采樣目的
確保采集的樣品能代表全部被檢驗的物質,使檢驗分析更具代表性。
2.采樣原則
采集的樣品要有代表性,采樣時應首先對該批食品原料、加工、運輸、貯藏方法條件、周圍環境衛生狀況等進行詳細調查,檢查是否有汙染源存在,同時能反映全部被檢食品的組成、質量和衛生狀況。
應設法保持樣品原有微生物狀況,在進行檢驗前不得汙染,不發生變化。
采樣必須遵循無菌操作程,容器必須滅菌,避免環境中微生物汙染,容器不得使用煤酚皂溶液,新潔爾滅、酒精等消毒物滅菌,更不能含有此類消毒藥物,以避免殺掉樣品中的微生物,所用剪、刀、匙用具也需滅菌方可使用。
3.采樣數量
取樣數量的確定,應考慮分析項目的要求、分析方法的要求及被檢物的均勻程度三個因素。樣品應一式兩份,分別供檢驗、複檢使用,每份樣品數量一般不少於200g。
根據不同種類采樣數量略有不同,實驗室檢驗樣品一般為25克。
4.采樣方法
采取隨機抽樣的方式。
直接食用的小包裝食品,盡可能取原包裝,直到檢驗前不要開封,以防汙染。
如為非冷藏易腐食品,應迅速將所采樣品冷卻至0-4℃。
不要使樣品過度潮濕,以防食品中固有的細菌增殖。
在將冷凍食品送到實驗室前,要始終保持樣品處於冷凍狀態。樣品一旦融化,不可使其再凍,保持冷卻即可。
5.樣品的保存和運送
樣品采集完後,應迅速送往實驗室檢驗,送檢過程中一般不超過3h,如路程較遠,可保存在1-5℃環境中,如需冷凍者,則在冷凍狀態下送檢。
冷凍樣品應存放在-15℃以下冰箱內;冷卻和易腐食品應存放在0-5℃冰箱或冷卻庫內;其它食品可放在常溫冷暗處。
運送冷凍和易腐食品應在包裝容器內加適量的冷卻劑或冷凍劑。保證途中樣品不升溫或不融化。
待檢樣品存放時間一般不應超過36小時。
(二)檢驗樣品的製備
樣品的全部製備過程均應遵循無菌操作程序。
檢驗冷凍樣品前應先使其融化。可在0-4℃融化,時間不超過18小時,也可在溫度不超過45℃的環境中融化,時間不超過15分鍾。
檢驗液體或半固體樣品前應先將其充分搖勻。如容器已裝滿,可迅速翻轉25次;如未裝滿,可於7s內以30cm的幅度搖動25次。從混樣到檢驗間隔時間不應超過3分鍾。
開啟樣品包裝前,先將表麵擦幹淨,然後用75%乙醇消毒開啟部位及其周圍。
非粘性液體樣品可用吸管吸取一定量,然後加入適量的稀釋液或培養基內,吸管插入樣品內的深度不應超過2.5cm,也不得將吸有樣品的吸管浸入稀釋液或培養基內。
粘性液體樣品可用滅菌容器稱取一定量,然後加入適量的稀釋液或培養基。
gutihuobangutiyangpinkeyongmiejundejunzhibeichengquyidingliang,zaijiashiliangdexishiyehuopeiyangjijinxingjunzhi,congyangpindejunzhidaoxishihejiezhong,xianggeshijianbuyingchaoguo15分鍾,或是在無菌生理鹽水裏放入玻璃珠,充分振蕩搖勻。
(三)檢驗
實驗室收到樣品後或是自己取樣後,首先進行外觀檢驗,及時按照國家標準檢驗方法進行檢驗,檢驗過程中要認真、負責,嚴格進行無菌操作,避免環境中微生物汙染。
檢驗所使用的稀釋液、試劑、培養基接觸的一切器皿必須經過有效的滅菌。
實驗室所用儀器、設備的性能應定期檢查和校正。
製備試劑和培養基所用的水,應為無離子水或用玻璃器皿蒸餾的蒸餾水。
檢驗結束後,所有帶菌的培養基、試劑、稀釋液和器皿必須盡快滅菌和洗刷。清洗過的器皿不應殘留洗滌劑的痕跡。
(四)檢驗記錄和結果的報告
經檢驗的每份樣品都應有完整的檢驗記錄。樣品檢驗過程中所用方法、出現的現象和結果等均要用文字寫出試驗記錄,以作為對結果分析、判定的依據,記錄要求詳細、清楚、真實、客觀、不得塗改和偽造。
檢驗結束後,根據檢驗結果,及時填寫檢驗報告書,簽字並經負責人審核簽字後發出。
(五)樣品的微生物檢驗流程
(六)微生物操作注意要點
1.無菌操作要求
(1)微(wei)生(sheng)物(wu)實(shi)驗(yan)室(shi)工(gong)作(zuo)人(ren)員(yuan),必(bi)須(xu)有(you)嚴(yan)格(ge)的(de)無(wu)菌(jun)觀(guan)念(nian),許(xu)多(duo)實(shi)驗(yan)要(yao)求(qiu)在(zai)無(wu)菌(jun)的(de)條(tiao)件(jian)下(xia)進(jin)行(xing),主(zhu)要(yao)原(yuan)因(yin),一(yi)是(shi)防(fang)止(zhi)試(shi)驗(yan)操(cao)作(zuo)中(zhong)人(ren)為(wei)汙(wu)染(ran)樣(yang)品(pin),二(er)是(shi)保(bao)證(zheng)工(gong)作(zuo)人(ren)員(yuan)安(an)全(quan),防(fang)止(zhi)檢(jian)出(chu)的(de)致(zhi)病(bing)菌(jun)由(you)於(yu)操(cao)作(zuo)不(bu)當(dang)造(zao)成(cheng)個(ge)人(ren)汙(wu)染(ran)。要(yao)求(qiu)如(ru)下(xia):
(2)接種細菌時必須穿工作服、帶工作帽;
(3)進行接種食品樣品時,必須穿專用的工作服、帽及拖鞋,應放在無菌室緩衝間,工作前經紫外線消毒後使用;
(4)接種食品樣品時,應在進無菌室前用肥皂洗手,然後用酒精棉球將手擦幹淨;
(5)進行接種所用的吸管、平皿及培養基等必須經消毒滅菌,打開包裝未使用完的器皿,不能放置後再使用,金屬用具應高壓滅菌或用酒精點燃燒灼三次後使用;
(6)從包裝中取出吸管時,吸管尖部不能觸及試管或平皿邊;
(7)接種樣品、轉種細菌必須在酒精燈前操作,接種細菌活樣品時,吸管從包裝中取出後及打開試管塞都要通過火焰消毒;
(8)接種環和針在接種細菌前應經火焰燒灼全部金屬絲,必要時還要燒到針和環與杆的連接處;
(9)吸管吸取菌液或樣品時,應用相應的吸爾球吸取,不得直接用口吸。
2.無菌間使用要求
(1)無菌間應密封,不得隨意打開,並設有與無菌間大小相應的緩衝間及門,另盡量設有小窗,以備進入無菌間後傳遞物品。
(2)無菌間應保持清潔,工作後用巴氏消毒溶液消毒,擦拭工作台麵,不得存放與試驗無關的物品。
(3)無菌間使用前後應將門關緊,打開紫外燈消毒(30W,1m)時,照射時間不少於30分(fen)鍾(zhong),使(shi)用(yong)紫(zi)外(wai)燈(deng),應(ying)注(zhu)意(yi)不(bu)得(de)直(zhi)接(jie)在(zai)紫(zi)外(wai)線(xian)下(xia)操(cao)作(zuo),以(yi)免(mian)引(yin)起(qi)損(sun)傷(shang),燈(deng)管(guan)每(mei)隔(ge)兩(liang)周(zhou)需(xu)用(yong)酒(jiu)精(jing)球(qiu)輕(qing)輕(qing)擦(ca)拭(shi),除(chu)去(qu)上(shang)麵(mian)的(de)灰(hui)塵(chen)和(he)油(you)垢(gou),以(yi)減(jian)少(shao)紫(zi)外(wai)線(xian)穿(chuan)透(tou)的(de)影(ying)響(xiang)。
(4)處理和接種食品樣品時,進入無菌間操作,不得隨意出入,如需要傳遞物品,可通過小窗傳遞。
3.消毒滅菌要求
微生物檢測用的玻璃器皿、金屬用具及培養基、被汙染和接種的培養物等,必須經滅菌後方能使用。
(1)滅菌前準備
①所有需經滅菌的物品首先要清洗晾幹,玻璃器皿如吸管、平皿用紙包裝嚴密,如用金屬筒應將上麵氣孔打開。
裝培養基的三角瓶塞好棉塞,試管蓋好蓋,用紙包好。
(2)裝放
將物品分別包紮好,直接放入消毒筒內,物品之間不能過擠。
(3)設備檢查
①檢查門的開關是否靈活,橡皮圈有無損壞,是否平整。
②壓(ya)力(li)表(biao)蒸(zheng)氣(qi)排(pai)盡(jin)時(shi)是(shi)否(fou)停(ting)留(liu)在(zai)零(ling)位(wei),蓋(gai)好(hao)蓋(gai),通(tong)蒸(zheng)氣(qi)或(huo)加(jia)熱(re)後(hou),觀(guan)察(cha)是(shi)否(fou)漏(lou)氣(qi),壓(ya)力(li)表(biao)與(yu)溫(wen)度(du)計(ji)所(suo)標(biao)示(shi)的(de)狀(zhuang)況(kuang)是(shi)否(fou)吻(wen)合(he),管(guan)道(dao)有(you)無(wu)堵(du)塞(sai)。
③對有自動電子程序控製裝置的滅菌器,使用前應檢查規定的程序,是否符合於進行滅菌處理的要求。
(4)滅菌處理
手提式高壓鍋或立式壓力蒸氣滅菌器的使用應按下列步驟進行:
①高壓鍋內加入清水(重複使用時應將水量補足,水變混濁需要更換)。
②將要滅菌的物品放入滅菌鍋內,蓋好蓋子。
接通電源,加熱,水沸騰後打開放氣閥排氣,直到壓力表指針降到0.05Mpa時,關掉放氣閥。
指針指到121℃時開始計時,達到要求的滅菌時間關掉開關,冷卻直到壓力降到0.05Mpa即可通過放氣閥緩慢放氣。
(5)滅菌溫度與時間
①不同類型培養基的滅菌溫度與時間的關係見下表:
②滅菌處理:滅菌後物品,按正常情況已屬無菌,從滅菌器中取出應仔細檢查,以免再度汙染。
物品取出,隨即檢查包裝的完整性,若有破壞或棉塞脫掉,不可作為無菌物品使用。
取出的物品,如外包裝有明顯的水浸者,不可作為無菌物品使用。
培養基或試劑等,應檢查是否符合達到滅菌後的色澤或狀態,未達到者應廢棄。
取出的物品掉落在地或誤放不潔之處,或沾有水液,均視為受到汙染,不可作為無菌物品使用。
取出的合格滅菌物品,應存放於貯藏室或防塵櫃內,嚴禁與未滅菌物品混放。
凡屬合格物品,應標有滅菌日期及有效期限。
每批滅菌處理完成後,記錄滅菌品名、數量、溫度、時間、操作者。
(6)有毒有菌汙物處理要求
微生物實驗室所用實驗器材、培養物等未經消毒處理,一律不得帶出實驗室。
經培養的汙染材料及廢棄物應放在嚴密的容器或鐵絲筐內,並集中存放在指定地點,待統一進行高壓滅菌。
經微生物汙染的培養物,必須經121℃,30min高壓滅菌。
染菌後的吸管,使用後放入5%煤酚皂溶液或石炭酸溶液中,最少浸泡24小時,再經121℃,30min高壓滅菌。
塗片染色衝洗片的液體,一般可直接衝入下水道,染色的玻片放入5%煤酚皂液中浸泡24h後,煮沸洗滌。
打碎的培養物,立即用5%煤酚皂液或石炭酸噴灑和浸泡被汙染部位,浸泡半小時後再擦拭幹淨。
(7)玻璃器皿的清洗要求
①目的
為了保證微生物實驗順利進行,保證實驗結果的準確性,不影響實驗進度,必須把器皿徹底清洗幹淨。
②注意事項
任何洗滌方法,都不應對玻璃器皿有所損傷,不能用有腐蝕作用的化學藥劑,也不能使用比玻璃器皿硬度大的物品來擦拭玻璃器皿。
一般新的玻璃器皿用2%的鹽酸液浸泡數小時,後用水衝洗幹淨。
用過的器皿應立即洗滌,放置太久會增加洗滌困難。
強酸、強堿及其它氧化物和有揮發性的有毒物品,都不能倒在洗滌槽內,以免汙染環境水質,必須倒在廢水缸中。
含有對人體有傳染性病菌的器具,應先煮沸滅菌後再進行洗滌。
難(nan)洗(xi)滌(di)的(de)器(qi)皿(min)不(bu)要(yao)與(yu)易(yi)洗(xi)滌(di)的(de)器(qi)皿(min)放(fang)在(zai)一(yi)起(qi),以(yi)免(mian)增(zeng)加(jia)洗(xi)滌(di)的(de)麻(ma)煩(fan)。有(you)油(you)的(de)器(qi)皿(min)不(bu)要(yao)與(yu)無(wu)油(you)的(de)器(qi)皿(min)混(hun)在(zai)一(yi)起(qi),否(fou)則(ze)使(shi)本(ben)來(lai)無(wu)油(you)的(de)器(qi)皿(min)沾(zhan)上(shang)了(le)油(you)垢(gou),浪(lang)費(fei)藥(yao)劑(ji)和(he)時(shi)間(jian)。
洗滌劑的種類:水、洗衣粉、檸檬洗滌劑、肥皂
③洗滌方法
含有瓊脂培養基的玻璃器皿的洗滌方法:shixianyingjiangqiminzhongdeqiongzhiguaqu,ranhouyongqingshuixidi,bingyongshiguanshuashuaqipingbi,yichuquzhanwuzaibishangdehuichenheyougou。yongxiyifenshuixiquyouwu,ranhouyongzilaishui(蒸餾水)衝洗。洗好後的器皿應倒置晾幹或置於幹燥箱中幹燥至無水滴。
載玻片及蓋玻片的洗滌法:新載玻片及蓋玻片先在20%的鹽酸溶液中浸一小時,然後用自來水衝洗2~3次,最後用蒸餾水換洗2~3次。用過的載玻片及蓋玻片,應用紙擦去油垢,再放在5%的洗衣粉水中煮30分鍾後立即用自來水衝洗,然後放在稀的洗液中浸泡2小時,再用蒸餾水衝洗至中性。
移液管、倒管的洗滌方法:新的移液管及倒管先在的5%鹽酸溶液中浸一小時,然後用自來水衝洗幾次,最後用蒸餾水換洗幾次。用過的移液管、daoguanxianyongzilaishuixiqubiaomiandecanye,zaifangzaixiyifenshuizhongjinpaoyixiaoshiyishang,zaiyongzilaishuichongxizhiguanneibiwucanzha,zuihouyongzhengliushuihuanxici,liangganhouruhengwenganzaoxiangzhonghonggan。
(8)培養基、無菌水的製備
①基本原理
培養基的種類很多,不同微生物所需要的培養基不同。培養基製成後的物理狀態可分為液體、固體、半固體三種類型,我們實驗室常用的是固體培養基。
②器材
三角瓶、試管、燒杯、玻棒、天平、搪瓷杯、量筒、鋁箔紙、藥勺、杜氏小管、矽膠塞(棉塞)、電爐
③培養基的種類
營養瓊脂培養基、乳糖膽鹽發酵培養基、乳糖發酵培養基、伊紅美蘭瓊脂培養基等
④方法步驟
培養基的製備:
稱量:根據培養基的配方,稱取適量藥品於搪瓷杯中;
溶解:用量筒量取所需水量,置電爐上加熱,一邊攪拌,至完全溶解,加熱至沸騰,拔掉電源,待冷卻;
分裝:根據不同需要,立即趁熱分裝入三角瓶或試管中,分裝三角瓶以不超過三角瓶一半為宜,分裝試管一般為管長的1/5(需根據試管的大小而定)。液體培養基如乳糖膽鹽發酵培養基約分裝10毫升左右。
塞橡膠(棉)塞:裝好培養基的試管應塞上橡膠(棉)塞,鬆緊合適,緊貼管壁,不留縫隙,約1/2塞入內,這樣即可過濾空氣,避免雜菌侵入,又可減緩培養基水分的蒸發。
包裝:三角瓶棉塞頭部應用錫箔紙包紮,試管集中於試管簍。
無菌水的製備:
用10mL移液管量取9.0mL蒸餾水(稀釋水)裝入試管中。
用250mL量筒量取225mL蒸餾水(稀釋水)裝入250mL的三角瓶中,可置少許玻璃珠於三角瓶內,塞上橡膠(棉)塞用牛皮紙包紮好,高壓滅菌備用。
(9)設備使用原則
①實驗設備的使用由實驗員嚴格按照操作說明書進行,其他人員不得隨意操作。
②實驗設備的日常維護保養由實驗員根據設備操作說明書進行,出現不可排除的故障時,經部門總經理批準,商請專業人員維修。
③實驗設備應定期進行計量檢測,確保儀器的準確性。
④實驗員應愛護儀器設備,使用前應檢查,使用後應及時清理清潔,並定期維護保養,下班前應檢查設備電源是否關閉。
手機版






