內標法的優缺點
內(nei)標(biao)法(fa)對(dui)進(jin)樣(yang)量(liang)不(bu)嚴(yan)格(ge)要(yao)求(qiu),測(ce)定(ding)的(de)結(jie)果(guo)也(ye)較(jiao)為(wei)準(zhun)確(que),由(you)於(yu)通(tong)過(guo)測(ce)量(liang)內(nei)標(biao)物(wu)及(ji)被(bei)測(ce)組(zu)分(fen)的(de)峰(feng)麵(mian)積(ji)的(de)相(xiang)對(dui)值(zhi)來(lai)進(jin)行(xing)計(ji)算(suan)的(de),因(yin)而(er)在(zai)一(yi)定(ding)程(cheng)度(du)上(shang)消(xiao)除(chu)了(le)進(jin)樣(yang)量(liang)、儀器不穩定等變化所引起的誤差,隻對欲分析的組分峰做校正。
不(bu)過(guo)內(nei)標(biao)法(fa)必(bi)須(xu)加(jia)一(yi)個(ge)組(zu)分(fen)進(jin)到(dao)樣(yang)品(pin),易(yi)增(zeng)加(jia)麵(mian)積(ji)測(ce)量(liang)誤(wu)差(cha)。操(cao)作(zuo)程(cheng)序(xu)較(jiao)為(wei)麻(ma)煩(fan),每(mei)次(ci)分(fen)析(xi)時(shi)內(nei)標(biao)物(wu)和(he)試(shi)樣(yang)都(dou)要(yao)準(zhun)確(que)稱(cheng)量(liang),有(you)時(shi)尋(xun)找(zhao)合(he)適(shi)的(de)內(nei)標(biao)物(wu)也(ye)有(you)困(kun)難(nan)。
內標物的選擇原則
采用內標法定量時,內標物的選擇是一項十分重要的工作。理想地說,內標物應當是一個能得到純樣的已知化合物,這樣它能以準確、已知的量加到樣品中去,它應當和被分析的樣品組分有基本相同或盡可能一致的物理化學性質(如化學結構、極性、揮發度及在溶劑中的溶解度等)、色譜行為和響應特征,最好是被分析物質的一個同係物。
dangran,zaisepufenxitiaojianxia,neibiaowubixunengyuyangpinzhonggezufenchongfenfenli。xuyaozhichudeshi,zaishaoshuqingkuangxia,fenxirenyuankenengbijiaoguanxinhuahewuzaiyigefuzaguochengzhongsuodedaodehuishoulv,cishi,takeyishiyongyizhongzaizhezhongguochengzhonghenrongyibeiwanquanhuishoudehuahewuzuoneibiao,laicedingganxingquhuahewudebaifenhuishoulv,erbubizunxunyishangsuoshuodexuanzeyuanze。
對於內標法定量分析來說,內標物的選擇必須滿足如下的條件:
1、內標物與被分析物質的物理化學性質要相似(如:沸點、極性、化學結構等);
2、內標物應是該試樣中不存在的純物質;
3、它必須完全溶於被測樣品(或溶劑)中,且不與被測樣品起化學反應;並與試樣中各組分的色譜峰能完全分離;
4、能加入內標物的量應接近於被測組分;
5、色se譜pu峰feng的de位wei置zhi應ying與yu被bei測ce組zu分fen的de色se譜pu峰feng的de位wei置zhi相xiang近jin,或huo在zai幾ji個ge被bei測ce組zu分fen色se譜pu峰feng中zhong間jian。且qie又you不bu共gong溢yi出chu,目mu的de是shi為wei了le避bi免mian儀yi器qi的de不bu穩wen定ding性xing所suo造zao成cheng的de靈ling敏min度du的de差cha異yi;
6、選擇合適的內標物加入量,使得內標物和被分析物質二者峰麵積的匹配性大於75%,以免由於它們處在不同響應值區域而導致的靈敏度偏差。
xuyaozhichudeshi,zaishaoshuqingkuangxia,fenxirenyuankenengbijiaoguanxinhuataiwuzaiyigefuzaguochengzhongsuodedaodehuishoulv,cishi,keyishiyongzaizheguochengzhonghenrongyibeiwanquanhuishoudehuataiwuzuoneibiao,laicedingganxingquhuahewudebaifenhuishoulv,erbubizunxunyishangsuoshuodexuanzeyuanze。
內標法的操作
將已知量的內標樣加入標準樣品,製成混合標樣,並配製一係列的已知濃度的工作標樣。混合標樣中標樣與內標樣的摩爾比不變。
注入色譜柱,以(標樣峰麵積/內標樣峰麵積)為響應值。
根據響應值與工作標樣濃度之間存在的線性關係,即W=f×A,製成標準曲線。
將已知量的內標樣加入未知樣品,注入色譜柱,得到欲測組分的響應值。
根據已知的係數f,即可求出欲測組分的濃度。
caozuoguochengzhongyangpinheneibiaoshihunhezaiyiqizhurusepuzhude,yincizhiyaohunherongyezhongbeicezufenyuneibiaodeliangdebizhihengding,shangyangtijidebianhuabuhuiyingxiangyingxiangdingliangjieguo。neibiaofadixiaoleshangyangtiji,naizhiliudongxiang、檢測器的影響,因此比外標法精確。
製作內標標準曲線
在zai用yong內nei標biao法fa做zuo色se譜pu定ding量liang分fen析xi時shi,先xian配pei製zhi一yi定ding重zhong量liang比bi的de被bei測ce組zu分fen和he內nei標biao樣yang品pin的de混hun合he物wu做zuo色se譜pu分fen析xi,測ce量liang峰feng麵mian積ji,做zuo重zhong量liang比bi和he麵mian積ji比bi的de關guan係xi曲qu線xian,此ci曲qu線xian即ji為wei標biao準zhun曲qu線xian。在zai實shi際ji樣yang品pin分fen析xi時shi所suo采cai用yong的de色se譜pu條tiao件jian應ying盡jin可ke能neng與yu製zhi作zuo標biao準zhun曲qu線xian時shi所suo用yong的de條tiao件jian一yi致zhi,因yin此ci,在zai製zhi作zuo標biao準zhun曲qu線xian時shi,不bu僅jin要yao注zhu明ming色se譜pu條tiao件jian(如固定相、柱溫、載氣流速等),haiyingzhumingjinyangtijiheneibiaowunongdu。zaizhizuoneibiaobiaozhunquxianshi,gedianbingbuwanquanluozaizhixianshang,cishiyingqiuchumianjibihezhongliangbidebizhiyuqipingjunweidebiaozhunpiancha,zaishiyongguochengzhongyingdingqijinxingdandianxiaozheng,ruosuodezhiyupingjunzhidepianchaxiaoyu2,曲線仍可使用,若大於2,則應重作曲線,如果曲線在鉸短時期內即產生變動,則不宜使用內標法定量。
小結
內nei標biao法fa是shi一yi種zhong間jian接jie或huo相xiang對dui的de校xiao準zhun方fang法fa。在zai分fen析xi測ce定ding樣yang品pin中zhong某mou組zu分fen含han量liang時shi,加jia入ru一yi種zhong內nei標biao物wu質zhi以yi校xiao準zhun和he消xiao除chu出chu於yu操cao作zuo條tiao件jian的de波bo動dong而er對dui分fen析xi結jie果guo產chan生sheng的de影ying響xiang,以yi提ti高gao分fen析xi結jie果guo的de準zhun確que度du。
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