外標法分為工作曲線法、外標一點法。

工作曲線法是用對照物質配製一係列濃度的對照品溶液確定工作曲線，求出斜率、截jie距ju。在zai完wan全quan相xiang同tong的de條tiao件jian下xia
，準zhun確que進jin樣yang與yu對dui照zhao品pin溶rong液ye相xiang同tong體ti積ji的de樣yang品pin溶rong液ye
，根gen據ju待dai測ce組zu分fen的de信xin號hao，從cong標biao準zhun曲qu線xian上shang查zha出chu其qi濃nong度du
，或huo用yong回hui歸gui方fang程cheng計ji算suan
；

外標一點法是用一種濃度的對照品溶液對比測定樣品溶液中i 組分的含量。將對照品溶液與樣品溶液在相同條件下多次進樣，測得峰麵積的平均值，用下式計算樣品中i組分的量。

（1）用(yong)標(biao)準(zhun)樣(yang)品(pin)配(pei)製(zhi)成(cheng)不(bu)同(tong)濃(nong)度(du)的(de)標(biao)準(zhun)係(xi)列(lie)，在(zai)與(yu)欲(yu)測(ce)組(zu)分(fen)相(xiang)同(tong)的(de)色(se)譜(pu)條(tiao)件(jian)下(xia)，等(deng)體(ti)積(ji)準(zhun)確(que)量(liang)進(jin)樣(yang)
，測(ce)量(liang)各(ge)峰(feng)的(de)峰(feng)麵(mian)積(ji)或(huo)峰(feng)高(gao)，用(yong)峰(feng)麵(mian)積(ji)或(huo)峰(feng)高(gao)對(dui)樣(yang)品(pin)濃(nong)度(du)繪(hui)製(zhi)標(biao)準(zhun)工(gong)作(zuo)曲(qu)線(xian)，此(ci)標(biao)準(zhun)工(gong)作(zuo)曲(qu)線(xian)應(ying)是(shi)通(tong)過(guo)原(yuan)點(dian)的(de)直(zhi)線(xian)。若(ruo)標(biao)準(zhun)工(gong)作(zuo)曲(qu)線(xian)不(bu)通(tong)過(guo)原(yuan)點(dian)，說(shuo)明(ming)測(ce)定(ding)方(fang)法(fa)存(cun)在(zai)係(xi)統(tong)誤(wu)差(cha)。標(biao)準(zhun)工(gong)作(zuo)曲(qu)線(xian)的(de)斜(xie)率(lv)即(ji)為(wei)絕(jue)對(dui)校(xiao)正(zheng)因(yin)子(zi)。

（2）dangyucezufenhanliangbianhuabuda，bingyizhizheyizufendedagaihanliangshi，yekeyibubihuizhibiaozhungongzuoquxian，eryongdandianxiaozhengfa
，jiwaibiaoyidianfa。waibiaoyidianfashijishangshiliyongyuandianzuoweibiaozhungongzuoquxianshangdelingyigedian。yinci，dangfangfacunzaixitongwuchashi（即標準工作曲線不通過原點），單點校正法的誤差較大。因此規定
，y=ax+b（b的絕對值應不大於100%響應值是y的2%）。

優點：繪hui製zhi好hao標biao準zhun工gong作zuo曲qu線xian後hou測ce定ding工gong作zuo就jiu很hen簡jian單dan了le，計ji算suan時shi可ke直zhi接jie從cong標biao準zhun工gong作zuo曲qu線xian上shang讀du出chu含han量liang，這zhe對dui大da量liang樣yang品pin分fen析xi十shi分fen合he適shi。特te別bie是shi標biao準zhun工gong作zuo曲qu線xian繪hui製zhi後hou可ke以yi使shi用yong一yi段duan時shi間jian
，在zai此ci段duan時shi間jian內nei可ke經jing常chang用yong一yi個ge標biao準zhun樣yang品pin對dui標biao準zhun工gong作zuo曲qu線xian進jin行xing單dan點dian校xiao正zheng，以yi確que定ding該gai標biao準zhun工gong作zuo曲qu線xian是shi否fou還hai可ke使shi用yong。

缺點：ÿ次樣品分析的色譜條件（檢測器的響應性能，柱溫度，流動相流速及組成，進樣量，柱效等）很難完全相同

，因此容易出現較大誤差。另外，標準工作曲線繪製時，一般使用欲測組分的標準樣品（或已知準確含量的樣品）
，因此對樣品前處理過程中欲測組分的變化無法進行補償。

優點：進樣量的變化
，色譜條件的微小變化對內標法定量結果的影響不大
，特別是在樣品前處理（如濃縮、萃取，衍生化等）qianjiaruneibiaowu，ranhouzaijinxingqianchulishi
，kebufenbuchangyucezufenzaiyangpinqianchulishidesunshi。ruoyaohuodehengaojingdudejieguoshi
，keyijiarushuzhongneibiaowu
，yitigaodingliangfenxidejingdu。

缺點：選擇合適的內標物比較困難，內標物的稱量要準確，操作較麻煩。使用內標法定量時要測量欲測組分和內標物的兩個峰的峰麵積（或峰高）
，根據誤差疊加原理

，內標法定量的誤差中，由於峰麵積測量引起的誤差是標準曲線法定量的2-2，但dan是shi由you於yu進jin樣yang量liang的de變bian化hua和he色se譜pu條tiao件jian變bian化hua引yin起qi的de誤wu差cha，內nei標biao法fa比bi標biao準zhun曲qu線xian法fa要yao小xiao很hen多duo，所suo以yi總zong的de來lai說shuo

，內nei標biao法fa定ding量liang比bi標biao準zhun曲qu線xian法fa定ding量liang的de準zhun確que度du和he精jing密mi度du都dou要yao好hao。

1.內標物應是該試樣中不存在的純物質；

2.它必須完全溶於試樣中，並與試樣中各組分的色譜峰能完全分離；

3.加入內標物的量應接近於被測組分；

4.色譜峰的λ置應與被測組分的色譜峰的λ置相近
，或在幾個被測組分色譜峰中間。

“以前做過很多醫藥、農藥中間體的芳香族±代化合物的常量定量分析，û有(you)自(zi)動(dong)進(jin)樣(yang)器(qi)，用(yong)外(wai)標(biao)法(fa)定(ding)量(liang)，確(que)實(shi)重(zhong)現(xian)性(xing)與(yu)穩(wen)定(ding)性(xing)非(fei)常(chang)差(cha)，結(jie)果(guo)經(jing)常(chang)受(shou)到(dao)搞(gao)合(he)成(cheng)同(tong)事(shi)的(de)質(zhi)疑(yi)。其(qi)實(shi)，仔(zai)細(xi)分(fen)析(xi)原(yuan)因(yin)不(bu)一(yi)定(ding)就(jiu)是(shi)外(wai)標(biao)法(fa)不(bu)適(shi)合(he)這(zhe)種(zhong)定(ding)量(liang)分(fen)析(xi)
，首(shou)先(xian)我(wo)們(men)的(de)實(shi)驗(yan)室(shi)儀(yi)器(qi)和(he)手(shou)段(duan)是(shi)否(fou)調(tiao)整(zheng)到(dao)一(yi)種(zhong)穩(wen)定(ding)而(er)合(he)理(li)的(de)狀(zhuang)態(tai)了(le)，比(bi)如(ru)，襯(chen)管(guan)是(shi)否(fou)潔(jie)淨(jing)，玻(bo)璃(li)棉(mian)的(de)λ置是否合適恰當（能否使樣品盡可能的汽化）、汽化溫度是否合適
、色譜峰形是否對稱（也就是樣品與色譜柱健合相是否匹配）
、附近有û有其它色譜峰的幹擾、選用什ô進樣方式（如快速進樣還是熱針進樣）等等因素的影響都需要考慮，如果這些因素都考慮了
，按照GMP方法驗證對於精密度的要求，同一樣品進6針以上的RSD和配製6個樣品的定量結果RSD都能滿足小於1.5%的要求
，那ô這個方法用外標法就是完全適用的
，但是前麵的影響因素是一定要都考慮到的，否則談論這個方法是否適用就有失偏頗了。
 

在做過的許多出口產品的定量分析方法當中有許多是一些醫藥公司提供的比較完善而驗證過的方法，內標與外標都有（他們用的都是自動進樣）精密度都能滿足RSD小於1.5%deyaoqiu
，dangyigefangfanenggoumanzuceshiyaoqiudeshihou
，wulunneibiaowaibiao，doushikexingde，dangranyouyigefenxichengbenhefenxishijiandewenti，neibiaodechengbenhekongzhirongye
、樣(yang)品(pin)溶(rong)液(ye)的(de)配(pei)製(zhi)當(dang)然(ran)要(yao)比(bi)外(wai)標(biao)要(yao)高(gao)和(he)麻(ma)煩(fan)一(yi)些(xie)了(le)。而(er)有(you)些(xie)時(shi)候(hou)，可(ke)能(neng)受(shou)你(ni)實(shi)驗(yan)室(shi)現(xian)有(you)儀(yi)器(qi)和(he)附(fu)屬(shu)設(she)備(bei)的(de)影(ying)響(xiang)，達(da)不(bu)到(dao)一(yi)定(ding)的(de)要(yao)求(qiu)，而(er)還(hai)必(bi)須(xu)進(jin)行(xing)定(ding)量(liang)分(fen)析(xi)，有(you)時(shi)外(wai)標(biao)的(de)結(jie)果(guo)可(ke)能(neng)就(jiu)要(yao)差(cha)一(yi)些(xie)
，這(zhe)時(shi)，你(ni)可(ke)能(neng)就(jiu)要(yao)考(kao)慮(lv)用(yong)內(nei)標(biao)法(fa)了(le)，可(ke)以(yi)排(pai)除(chu)手(shou)動(dong)進(jin)樣(yang)的(de)誤(wu)差(cha)、分流歧視的影響、包括一些δ知因素平行誤差的影響
，這時內標可能就顯示出它的優勢來了。”

“¥上已經提到當做方法驗證的時候
，當同一樣品配製6個樣品溶液用所選用的外標法進行定量的時候
，RSD都滿足1.5%的要求時，也分為兩種情況，小於1%和大於1%小於1.5%。如果RSD的結果小於1%
，那這個方法就û有什ô可以懷疑的了
；如果RSD的結果大於1%而在1.5%略低一些的範Χ活動時，這個方法的可行性就將受到質疑，畢竟這是方法驗證，你就要考慮上麵1所提到的影響因素的影響了，如果排除掉以上的影響因素
，RSD還是在1.5%附近
，就要嚐試內標了
，如果內標結果的RSD很好，就證明你的這個方法受實驗條件的影響很大
，隻能用內標了，或者幹脆將原方法做大的變動

，再嚐試用外標法測試。”

“對於微量分析
，比如農藥和獸藥殘留的分析、環境分析等，根據不同的限量標準要求對於精密度的要求也比常量分析的要求要寬鬆的多
，RSD有時可以允許達到10%甚至更高，這時可能外標法有更大的應用空間。”

“dancongjingmidufangmianqukaolv，paichuqitachengbenhexiaolvdeyinsu
，gerenrenweihaishineibiaoyouyuwaibiao。zengjingzuoguoyigezhongjiantieranjibingchundechangliangdingliangfenxi
，yieryichunanweineibiao，RTX-5amine（堿改性）15m*0.32mm*1.0um色譜柱分析
，將配製好的控製溶液（含有內標物）自動進樣器進6針，目的物（二氨基丙醇）與內標物（二乙醇胺）峰麵積比率的RSD為0.18%，而隻對這六針樣品的目的物峰（二氨基丙醇）麵積求RSD，結果為0.71%，tongguozheyishilidejieguodajiajiuhuifaxiandaodinagefangfajingmidugenghaole，dangranshineibiaogenghaole。dangranzhegehuahewudejiancefangfazuihougenjushangmiandeyanzhengshujuyongneibiaohewaibiaodingliangdoushikeyide
，shiyanshikeyiziyouxuanze。danneibiaoyuwaibiaojingmidujieguodechayishixianrancunzaideshishi。”