把所有出峰的組分含量之和按100%計的定量方法,稱為歸一化法。
各成分校正因子一致時可用該法,該法簡便、準確,特別是進樣量不容易準確控製時,進樣濃度及進樣量的變化的影響很小。
其他操作條件,如流速、柱溫等變化對定量結果的影響也很小。GC應用廣於HPLC。
外標法(標準曲線法、直接比較法)
首先用欲測組分的標準樣品繪製標準工作曲線。具體作法是:用yong標biao準zhun樣yang品pin配pei製zhi成cheng不bu同tong濃nong度du的de標biao準zhun係xi列lie,在zai與yu欲yu測ce組zu分fen相xiang同tong的de色se譜pu條tiao件jian下xia,等deng體ti積ji準zhun確que量liang進jin樣yang,測ce量liang各ge峰feng的de峰feng麵mian積ji或huo峰feng高gao,用yong峰feng麵mian積ji或huo峰feng高gao對dui樣yang品pin濃nong度du繪hui製zhi標biao準zhun工gong作zuo曲qu線xian,此ci標biao準zhun工gong作zuo曲qu線xian應ying是shi通tong過guo原yuan點dian的de直zhi線xian。若ruo標biao準zhun工gong作zuo曲qu線xian不bu通tong過guo原yuan點dian,說shuo明ming測ce定ding方fang法fa存cun在zai係xi統tong誤wu差cha。標準工作曲線的斜率即為絕對校正因子。
當(dang)欲(yu)測(ce)組(zu)分(fen)含(han)量(liang)變(bian)化(hua)不(bu)大(da),並(bing)已(yi)知(zhi)這(zhe)一(yi)組(zu)分(fen)的(de)大(da)概(gai)含(han)量(liang)時(shi),也(ye)可(ke)以(yi)不(bu)必(bi)繪(hui)製(zhi)標(biao)準(zhun)工(gong)作(zuo)曲(qu)線(xian),而(er)用(yong)單(dan)點(dian)校(xiao)正(zheng)法(fa),即(ji)直(zhi)接(jie)比(bi)較(jiao)法(fa)定(ding)量(liang)。單(dan)點(dian)校(xiao)正(zheng)法(fa)實(shi)際(ji)上(shang)是(shi)利(li)用(yong)原(yuan)點(dian)作(zuo)為(wei)標(biao)準(zhun)工(gong)作(zuo)曲(qu)線(xian)上(shang)的(de)另(ling)一(yi)個(ge)點(dian)。因(yin)此(ci),當(dang)方(fang)法(fa)存(cun)在(zai)係(xi)統(tong)誤(wu)差(cha)時(shi)(即標準工作曲線不通過原點),單點校正法的誤差較大。因此規定,y=ax+b 。b的絕對值應不大於100%響應值是y的2%。
標準曲線法的優點:繪(hui)製(zhi)好(hao)標(biao)準(zhun)工(gong)作(zuo)曲(qu)線(xian)後(hou)測(ce)定(ding)工(gong)作(zuo)就(jiu)很(hen)簡(jian)單(dan)了(le),計(ji)算(suan)時(shi)可(ke)直(zhi)接(jie)從(cong)標(biao)準(zhun)工(gong)作(zuo)曲(qu)線(xian)上(shang)讀(du)出(chu)含(han)量(liang),這(zhe)對(dui)大(da)量(liang)樣(yang)品(pin)分(fen)析(xi)十(shi)分(fen)合(he)適(shi)。特(te)別(bie)是(shi)標(biao)準(zhun)工(gong)作(zuo)曲(qu)線(xian)繪(hui)製(zhi)後(hou)可(ke)以(yi)使(shi)用(yong)一(yi)段(duan)時(shi)間(jian),在此段時間內可經常用一個標準樣品對標準工作曲線進行單點校正,以確定該標準工作曲線是否還可使用。
標準曲線法的缺點:每次樣品分析的色譜條件(檢測器的響應性能,柱溫度,流動相流速及組成,進樣量,柱效等)很難完全相同,因此容易出現較大誤差。另外,標準工作曲線繪製時,一般使用欲測組分的標準樣品(或已知準確含量的樣品),因此對樣品前處理過程中欲測組分的變化無法進行補償。
內標法
選擇適宜的物質作為欲測組分的參比物,定量加到樣品中去,依據欲測組分和參比物在檢測器上的響應值(峰麵積或峰高)之比和參比物加入的量進行定量分析的方法稱為內標法。
neibiaofadeguanjianshixuanzeheshideneibiaowu。neibiaowuyingshiyuanyangpinzhongbucunzaidechunwuzhi,gaiwuzhidexingzhiyingjinkenengyuyucezufenxiangjin,buyubeiceyangpinqihuaxuefanying,tongshiyaonengwanquanrongyubeiceyangpinzhong。neibiaowudefengyingjinkenengjiejinyucezufendefeng,huoweiyujigeyucezufendefengzhongjian,danbixuyuyangpinzhongdesuoyoufengbuzhongdie,jiwanquanfenkai。yibanhuixuanzebiaozhunwuzhidetongweisuwuzhizuoweineibiaowu。
內標法的優點:進樣量的變化,色譜條件的微小變化對內標法定量結果的影響不大,特別是在樣品前處理(如濃縮、萃取,衍生化等)前加入內標物,然後再進行前處理時,可部分補償欲測組分在樣品前處理時的損失。若要獲得很高精度的結果時,可以加入數種內標物,以提高定量分析的精度。
內標法的缺點:選擇合適的內標物比較困難,內標物的稱量要準確,操作較麻煩。使用內標法定量時要測量欲測組分和內標物的兩個峰的峰麵積(或峰高),根據誤差疊加原理,內標法定量的誤差中,由於峰麵積測量引起的誤差是標準曲線法定量的2-2,danshiyouyujinyangliangdebianhuaheseputiaojianbianhuayinqidewucha,neibiaofabibiaozhunquxianfayaoxiaohenduo,suoyizongdelaishuo,neibiaofadingliangbibiaozhunquxianfadingliangdezhunqueduhejingmidudouyaohao。
標準加入法
biaozhunjiarufashizhishangshiyizhongteshudeneibiaofa,shizaixuanzebudaoheshideneibiaowushi,yiyucezufendechunwuzhiweineibiaowu,jiarudaodaiceyangpinzhong,ranhouzaixiangtongdeseputiaojianxia,cedingjiaruyucezufenchunwuzhiqianhouyucezufendefengmianji(或峰高),從而計算欲測組分在樣品中的含量的方法。
標準加入法的優點:不bu需xu要yao另ling外wai的de標biao準zhun物wu質zhi作zuo內nei標biao物wu,隻zhi需xu欲yu測ce組zu分fen的de純chun物wu質zhi,進jin樣yang量liang不bu必bi十shi分fen準zhun確que,操cao作zuo簡jian單dan。若ruo在zai樣yang品pin的de前qian處chu理li之zhi前qian就jiu加jia入ru已yi知zhi準zhun確que量liang的de欲yu測ce組zu分fen,則ze可ke以yi完wan全quan補bu償chang欲yu測ce組zu分fen在zai前qian處chu理li過guo程cheng中zhong的de損sun失shi,是shi色se譜pu分fen析xi中zhong較jiao常chang用yong的de定ding量liang分fen析xi方fang法fa。
標準加入法的缺點:要求加入欲測組分前後兩次色譜測定的色譜條件完全相同,以保證兩次測定時的校正因子完全相等,否則將引起分析測定的誤差。
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