1、酸(suan)性(xing)物(wu)質(zhi)適(shi)合(he)做(zuo)負(fu)離(li)子(zi)檢(jian)測(ce),所(suo)以(yi)流(liu)動(dong)相(xiang)偏(pian)堿(jian)性(xing)較(jiao)合(he)適(shi),促(cu)使(shi)其(qi)解(jie)離(li),堿(jian)性(xing)物(wu)質(zhi)適(shi)合(he)做(zuo)正(zheng)離(li)子(zi)檢(jian)測(ce),流(liu)動(dong)相(xiang)中(zhong)適(shi)當(dang)的(de)加(jia)入(ru)酸(suan),促(cu)使(shi)其(qi)形(xing)成(cheng)正(zheng)離(li)子(zi),流(liu)動(dong)相(xiang)中(zhong)適(shi)當(dang)加(jia)一(yi)些(xie)醋(cu)酸(suan)鈉(na)(或者醋酸銨),可形成加鈉的正離子或者加銨的正離子。
液質分析中推薦使用的流動相和添加劑
2、糖苷類的物質在做FAB和esi(+)時,[M+Na]峰往往比[M+H]峰要強,此為經驗,原因隻是推測可能和天然產物的提取過程有關;鹽類化合物如鹽酸鹽、硫酸鹽在質譜中酸的部分一般不會出現;二羧酸鹽(esi負離子模式)除了分子離子峰外,會出現連續掉44的兩個峰,為失去羧酸根的離子,這三個峰非常特征,但是會受錐孔電壓的影響,調低電壓譜圖會更漂亮。
3、胺類物質做esi質譜時要注意進樣量要少,因為很容易離子化,不易衝洗幹淨,會影響後麵樣品的測定。像三乙胺在液質聯用時不能用於調節流動相pH值。若不慎引入三乙胺,在正離子檢測時總會出現很強的102峰(三乙胺的[M+H]).
4、質譜用水一般用娃哈哈純淨水之類的就很好;質譜用甲醇和乙腈,換用了很多品牌,發現Merck的還是稍微好一些;Finnigan用的氮氣不一定要用到液氮瓶,用普通的鋼瓶氣就可以了,可能還省錢些;建議大家買一個好一點的手電筒和一個放大鏡,手電筒用來看源裏麵,放大鏡看你割的毛細管平整。
5、質譜的基線其實跟液相的紫外檢測器和熒光檢測器一樣,基線高的原因不外乎內部和外部的原因。
1)你選擇的流動相在質譜的響應比較高,比如水相比較多的時候,噪音比較大些;還有如果鹽含量比較大的時候,噪音更大些
2)jianceqidelingminduyuegaodeshihou,zaoyinyinggaiyuegao。ruguozhipudewuranbijiaoyanzhongshi,jixiankendingbijiaogao。birulizijingjianceqi,yongdejiule,jingzhongdelizijiuhuizengduo,yifangmianjiangdilezhipudelingmindu,lingyifangmianzengjialejixianzaoyin
3)質(zhi)譜(pu)的(de)基(ji)線(xian)很(hen)多(duo)時(shi)候(hou)還(hai)跟(gen)你(ni)選(xuan)擇(ze)的(de)離(li)子(zi)寬(kuan)度(du)有(you)關(guan)。比(bi)如(ru)你(ni)作(zuo)選(xuan)擇(ze)離(li)子(zi)掃(sao)描(miao)的(de)時(shi)候(hou),基(ji)線(xian)就(jiu)低(di)些(xie)。你(ni)作(zuo)選(xuan)擇(ze)反(fan)應(ying)掃(sao)描(miao)的(de)時(shi)候(hou),離(li)子(zi)寬(kuan)度(du)不(bu)要(yao)選(xuan)得(de)太(tai)寬(kuan),太(tai)寬(kuan)噪(zao)音(yin)就(jiu)高(gao)些(xie)
4)多級質譜一般做二級或三級質譜,基線噪音就低很多
6、質譜維護經驗交流:做樣前-檢查氮氣,流動相,質譜儀的真空度,毛細管溫度…
1)最好不用直接進樣(容易汙染離子源)
2)做聯用時最好分流(a可以使用常規柱,b縮短分析時間,c 延長質量分析器壽命)
3)最好使用在線切換閥,降前每個樣品的前後1-2分鍾的流動相切入廢液(避免樣品中的鹽進入質譜,做Sequence時可以把平衡柱子的流動相切入廢液)
4)開始聯用前,直接運行質譜數分鍾,可以先將溫度(毛細管溫度和離子源溫度(APCI))加熱到預設定值(如果是APCI源還可以避免將燒掉heater,太貴了,最好別燒)
5)待機時將切換閥置於waste,避免剛開液相時將流動相打入離子源
6)關guan機ji前qian毛mao細xi管guan的de溫wen度du先xian降jiang下xia來lai,穩wen定ding一yi段duan時shi間jian後hou再zai關guan閉bi電dian源yuan,避bi免mian風feng扇shan停ting止zhi轉zhuan動dong後hou毛mao細xi管guan外wai圍wei的de熱re量liang向xiang裏li擴kuo散san,容rong易yi引yin起qi內nei部bu線xian路lu及ji電dian子zi元yuan器qi件jian老lao化hua加jia速su
7)每天清理毛細管口外部,擦洗幹淨,每次停機時注意清洗Skimmer,用無塵擦拭紙,kimberly那種
8)如果用的是鋼瓶而且天天做樣的話,將兩個鋼瓶並聯,當然,一月不做一次的話就算了
9)做定量時注意離子源噴針的具體位置,否則標準曲線就不能用了
10)不要不經過柱子分離進行定量分析,結果不可靠(競爭性抑製目標分子離子化)
11)如果是負離子檢測的話,可以相流動相中加入少量異丙醇
12)不要使用不揮發性鹽,如果使用揮發性鹽,但濃度不要超過20mmol/l
13)需要使用酸的情況下可以用甲酸,乙酸,三氟乙酸可以用,但能用甲酸或乙酸時就別用TFA
7、理論上液質聯用禁止使用任何不揮發性的緩衝鹽,如果需要盡量使用諸如乙酸氨等揮發性鹽,濃度不要超過20mmol/l。
duiyubuhuifaxingdehuanchongyan,ruguonideyiqiyouchuisaobujidehuayekeshiyong,danyidingyaoxiaoxin。wanbudeyiyebuyaoyong,shouxianyoubuhuifayanshidebudaohaodeliziliude,qiciyanliuzaizhipuzhonghennanchudiao,chufeitingjiqingxi,buranyizhihuiyingxiangqitayangpindefenxi。
可以找質譜友好的條件來做液質聯機,例如色譜條件為20mM磷酸鹽的水/乙腈流動相,做液質聯機的時候就可以用醋酸銨代替,然後用醋酸調節pH值與磷酸鹽的一致即可。
除了難揮發的鹽,三乙胺、表麵活性劑、還有高濃度(>0.5%)的TFA,都對質譜不好,液質聯用的流動相中應該避免。
文章(文字)來源:實驗之家。
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