導致峰形異常的原因有很多,接下來帶大家了解一下常見的影響因素:
當供試品進樣量和進樣體積在安全的範圍內,改變進樣量和體積會相應地影響到峰高和峰麵積,而保留時間、峰寬和分離度的影響並不大,但當進樣體積或者質量很大的時候,就會造成超載現象,伴隨著峰寬增加、峰型變差和分離度降低。
柱長在50~250mm,內徑4~5mm的色譜柱,單個樣品的進樣質量應該在50μg以內,進樣體積小於25 μL。超載分為體積超載和質量超載兩種,下麵將分別對這兩個超載對分離的影響做介紹。
(1)體積超載
(2)質量超載
chaozaihuiyingxiangdaosepufengxing,dangjinyangtijihezhiliangzaiheshidefanweinei,shihuodelianghaofengxingdebaozheng,eryouyounaxieyinsukeyidaozhiqianyanhetuoweine,xiamianwomenjiezheshuo。
1. 溶劑效應的影響
(1)用流動相溶解樣品:
a.用純甲醇溶解樣品
b.用流動相溶解樣品
(2)先強溶劑溶解樣品,然後用流動相稀釋
a.純甲醇溶解
b.用流動相溶解樣品
2、緩衝作用不合適:
3、儀器係統不合適:
1. 降低pH,抑製矽羥基的電離
a. 流動相:甲醇:磷酸鹽緩衝溶液=70:30(混合好後,測得pH為4.07)
b.流動相:甲醇:磷酸鹽緩衝溶液=70:30(甲醇和磷酸鹽緩衝溶液混合好後用磷酸調節pH至2.49)
2、增加緩衝鹽,加大緩衝作用
a. 流動相:甲醇:水=75:25
b. 流動相:甲醇:50mmol/L磷酸二氫鈉溶液=75:25 (混合好後,用三乙胺調節pH至8.40, 即200ml混合好的溶液中加入75ul三乙胺)
3、因為每種緩衝鹽的緩衝能力不一樣,可以通過更換緩衝鹽來調整:
a. 流動相:5mmol/L磷酸鹽緩衝液(用磷酸調節pH值為4.4)-甲醇-乙腈(40:20:10)
b. 流動相:5mmol/L醋酸鹽緩衝液(用醋酸調節pH值為4.4)-甲醇-乙腈(40:20:10)
4、屏蔽矽羥基的影響(如加入三乙胺)
a.流動相:磷酸鹽緩衝溶液:甲醇=80:20b.流動相:磷酸鹽緩衝溶液:甲醇:三乙胺=80:20:
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