六通閥進樣器是高效液相色譜係xi統tong中zhong最zui理li想xiang的de進jin樣yang器qi,了le解jie和he掌zhang握wo六liu通tong閥fa的de工gong作zuo原yuan理li有you利li於yu對dui它ta的de使shi用yong和he維wei護hu,延yan長chang其qi使shi用yong壽shou命ming。然ran而er很hen多duo實shi驗yan操cao作zuo人ren員yuan對dui六liu通tong閥fa的de工gong作zuo原yuan理li模mo棱leng兩liang可ke,缺que乏fa準zhun確que的de認ren識shi,今jin天tian小xiao編bian就jiu給gei大da家jia帶dai來lai詳xiang細xi的de六liu通tong閥fa進jin樣yang器qi工gong作zuo原yuan理li圖tu文wen介jie紹shao。
六通閥進樣器是由圓形密封墊(轉子)和固定底座(定子)組成。當在充樣(Load)位置時,從進樣孔充樣進定量環,多餘樣品從放空孔排出;轉動至進樣(Inject)位置時(將六通閥轉子轉動60°),由泵輸送的流動相衝洗定量環,推動樣品入柱。六通閥進樣器最為通用,各大HPLC儀器製造商均以此產品作為儀器的進樣器。
六通閥進樣器的工作原理主要分為兩步,分別是上樣和進樣,如下圖所示。其中,紅色虛線表示定量環。首先,使用泵將流動相從1號壓入,通過2號進入色譜柱中,使之在色譜係統中形成穩定的流路;然後樣品經進針口從3號注射進定量環中,定量環中充滿後,多餘的樣品液從5號放空孔排出,此時進樣完成。
待樣品進入定量環後,1號閥與6號閥接通,2號閥和3號閥接通,由泵輸入的流動相衝洗定量環,將待測樣品衝入色譜柱中進行分離檢測。
下麵的圖示更直觀地介紹了六通閥進樣器的工作原理。
流動相與色譜柱構成封閉環路,樣品從進樣口注入,進入定量環中,多餘的以廢液形式排出。
待樣品完全進入後,六通閥改變閥之間的連接方式,將流動相入口與定量環接通。
流動相通過定量環,將待測樣品衝入色譜柱中。
再次改變六通閥的連接方式,重新連回初始狀態,通過流動相的洗脫對待測樣品進行分離檢測。
外部六個接口由中間的某部件兩兩聯通,關閉時是左邊這樣,打開時中間聯通的部件轉動60°,變成右邊這樣。
然後再說外部的連接。平時的整個氣路係統(進氣部分氣路也可能是進樣口,用微量進樣器打進去。另外這裏說的是氣相色譜,液相可能略有不同。)是shi下xia麵mian這zhe個ge樣yang子zi。其qi中zhong兩liang個ge分fen別bie連lian進jin樣yang口kou和he尾wei氣qi,兩liang個ge連lian色se譜pu柱zhu,剩sheng下xia的de兩liang個ge互hu相xiang連lian起qi來lai,中zhong間jian定ding量liang環huan這zhe段duan管guan中zhong的de樣yang品pin就jiu是shi用yong來lai進jin樣yang的de。
紅色是你的樣品,直接從進樣口進去然後就吹出去了。藍色是色譜柱裏麵的載氣。
然後你點了一下進樣,哢嚓,六通閥一開,整個係統馬上變成下麵這樣:
然後你點了一下進樣,哢嚓,六通閥一開,整個係統馬上變成下麵這樣:
定量環改成連接在了色譜柱的兩端,於是載氣將中間殘留的一段樣品帶入色譜柱。
雖然六通閥進樣器具有結構簡單、使用方便、壽命長、日(ri)常(chang)無(wu)需(xu)維(wei)修(xiu)等(deng)特(te)點(dian),但(dan)正(zheng)確(que)的(de)使(shi)用(yong)和(he)維(wei)護(hu)將(jiang)能(neng)增(zeng)加(jia)使(shi)用(yong)壽(shou)命(ming),保(bao)護(hu)周(zhou)邊(bian)設(she)備(bei),同(tong)時(shi)增(zeng)加(jia)分(fen)析(xi)準(zhun)確(que)度(du)。如(ru)使(shi)用(yong)得(de)當(dang)的(de)話(hua),六(liu)通(tong)閥(fa)進(jin)樣(yang)器(qi)一(yi)般(ban)可(ke)連(lian)續(xu)進(jin)樣(yang)3萬次而無需維修,以下淺談有關六通閥進樣器的使用及保養事宜:
1、如果扳閥處於Load和Inject之間,便阻死了液流,壓力驟增,再轉到進樣位,過高的壓力在柱頭上引起損壞,所以應盡快轉動閥,不能停留在中途。
在HPLC係(xi)統(tong)中(zhong)使(shi)用(yong)的(de)注(zhu)射(she)器(qi)針(zhen)頭(tou)有(you)別(bie)於(yu)氣(qi)相(xiang)色(se)譜(pu),是(shi)平(ping)頭(tou)注(zhu)射(she)器(qi)。一(yi)方(fang)麵(mian),針(zhen)頭(tou)外(wai)側(ce)緊(jin)貼(tie)進(jin)樣(yang)器(qi)密(mi)封(feng)管(guan)內(nei)側(ce),密(mi)封(feng)性(xing)能(neng)好(hao),不(bu)漏(lou)液(ye),不(bu)引(yin)入(ru)空(kong)氣(qi);另一方麵,也防止了針頭刺壞密封組件及定子。
2、六通閥進樣器的進樣方式有部分裝液法和完全裝液法兩種。
使用部分裝液法進樣時,進樣量最多為定量環體積的75%,如20μl的定量環最多進樣15μl的樣品,並且要求每次進樣體積準確、相同;使用完全裝液法進樣時,進樣量最少為定量環體積的3至5倍,即20μl的定量環最少進樣60至100μl的樣品,這樣才能完全置換樣品定量環內殘留的溶液,達到所要求的精密度及重現性。推薦采用100μl的平頭進樣針配合20μl滿環進樣。
3、可根據進樣體積的需要自已製作定量環,一般不要求精確計算定量環的體積。
譬如,一根名義上10μl的定量環,實際是9μl還是10μl並不重要,因為被測樣品和校正樣品的進樣體積保持一致,在計算結果時誤差都被抵消了。
4、進樣樣品要求無微粒和能阻死針頭及進樣閥的物質,樣品溶液均要用0.45μm的濾膜過濾。
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