在操作高效液相色譜時,流動相出現氣泡,那整個工作就沒法進行了。
超聲波震蕩了一個小時的流動相,為什麼天氣晴好的時候沒出現氣泡,陰天、下雨天就會出現;是因為陰天、下雨天空氣氣壓下降,引起溶在流動相中的空氣過飽和(晴天時氣壓高還沒飽和),當高壓泵抽取流動相時,空氣析出,產生了氣泡。
超聲波震蕩了一個小時的流動相,為什麼裏麵還有空氣呢?這是由於在常壓下震蕩,驅趕空氣效果不行。
如果把裝流動相的瓶子進行抽真空,同時進行超聲波震蕩,效果會怎麼樣呢?效果非常好,隻要1min,流動相中的空氣差不多沒了;經過這樣驅逐空氣的流動相,陰天、下雨天使用也不會出現氣泡了;而且省時,不用動不動半小時、一小時超聲波震蕩;並且效果非常好。
由於氣泡的存在,會造成色譜圖上出現尖銳的噪聲峰,嚴重時會造成分析靈敏度下降;氣泡變大進入流路或色譜柱時會使流動相的流速變慢或不穩定,使基線起伏。
造成上述現象的主要原因有三條:
一是流動相溶液中往往因溶解有氧氣或混入了空氣而形成氣泡;
二是係統開始工作時未能將流路中的空氣驅趕幹淨;
三是在注入樣品時不注意混入了空氣。
而液相色譜儀在使用中,整個液路係統有兩個地方易產生氣泡!
1、泵頭吸液白管;2、檢測口流通池。
氣泡產生的原因大多數是因為:
溫度上升,壓力下降!溫度上升或柱溫上升,當接近試劑沸點時,試劑汽化產生氣泡,試劑中已含微小氣泡,因加熱變大而產生氣泡。
壓(ya)力(li)下(xia)降(jiang)產(chan)生(sheng)氣(qi)泡(pao),流(liu)動(dong)相(xiang)中(zhong)一(yi)直(zhi)包(bao)含(han)微(wei)小(xiao)氣(qi)泡(pao),無(wu)論(lun)超(chao)聲(sheng)過(guo)濾(lv),均(jun)不(bu)能(neng)池(chi)底(di)去(qu)掉(diao)它(ta),那(na)麼(me)當(dang)壓(ya)力(li)下(xia)降(jiang)時(shi),微(wei)小(xiao)氣(qi)泡(pao)將(jiang)長(chang)大(da),且(qie)多(duo)個(ge)小(xiao)氣(qi)泡(pao)易(yi)聚(ju)集(ji)成(cheng)大(da)氣(qi)泡(pao),而(er)影(ying)響(xiang)正(zheng)常(chang)實(shi)驗(yan)。
氣泡產生原因及解決辦法
一、泵頭及吸液白管
1、泵頭
泵beng頭tou是shi壓ya力li變bian化hua最zui劇ju烈lie的de地di方fang,也ye是shi最zui易yi產chan生sheng氣qi泡pao的de地di方fang,泵beng頭tou靠kao負fu壓ya而er吸xi液ye,而er負fu壓ya必bi然ran使shi流liu動dong相xiang中zhong的de小xiao氣qi泡pao長chang大da,當dang泵beng腔qiang變bian正zheng壓ya時shi,已yi長chang大da的de氣qi泡pao未wei必bi能neng全quan部bu變bian小xiao流liu入ru後hou續xu液ye路lu,則ze泵beng腔qiang內nei將jiang積ji存cun氣qi泡pao,從cong而er影ying響xiang吸xi液ye精jing度du,鑒jian於yu此ci,泵beng頭tou上shang專zhuan門men設she計ji了le排pai氣qi閥fa,便bian於yu泵beng頭tou排pai氣qi,觀guan察cha柱zhu壓ya穩wen定ding了le說shuo明ming泵beng頭tou排pai氣qi成cheng功gong。
2、吸液白管長氣泡。
a、xiyebaiguanjiechukongqibuweilouqi,chanshengkejianqipao,xiyebaiguanshichangyahefuyajiaobibianhuabuwei,qiloubiaoxianweidaqijinrubaiguannei,erbuyijiandaoguanneiyetilouchu。
處理方法:更換白管。
b、濾頭堵:濾頭堵使得液體流入濾頭的速度下降,泵強製吸液而產生真空氣泡。
判斷:拔掉濾頭不再長氣泡則是濾頭堵。
處理:A、30%硝酸水液超洗濾頭,20分鍾左右。B、水超洗濾頭,注意換水多超幾次。
c、流動相汽化產生氣泡。
尤其是夏天室溫高,沸點低的試劑易汽化,比如:乙酸,乙醚,氨水,石油醚等易於汽化。
處理:超聲,降室溫。
二、檢測流通池長氣泡
流(liu)通(tong)池(chi)是(shi)易(yi)積(ji)存(cun)氣(qi)泡(pao)的(de)地(di)方(fang),其(qi)對(dui)基(ji)線(xian)影(ying)響(xiang)巨(ju)大(da),流(liu)動(dong)相(xiang)流(liu)入(ru)色(se)譜(pu)柱(zhu)後(hou),壓(ya)力(li)越(yue)來(lai)越(yue)小(xiao),微(wei)小(xiao)氣(qi)泡(pao)將(jiang)逐(zhu)漸(jian)長(chang)大(da),而(er)流(liu)通(tong)池(chi)截(jie)麵(mian)積(ji)遠(yuan)大(da)於(yu)鋼(gang)管(guan)麵(mian)積(ji),則(ze)氣(qi)泡(pao)在(zai)池(chi)內(nei)易(yi)長(chang)大(da),氣(qi)泡(pao)的(de)特(te)點(dian)是(shi)長(chang)大(da)在(zai)無(wu)外(wai)壓(ya)的(de)情(qing)況(kuang)下(xia),很(hen)難(nan)縮(suo)小(xiao)到(dao)鋼(gang)管(guan)內(nei)經(jing)以(yi)下(xia)流(liu)出(chu)流(liu)通(tong)池(chi),所(suo)以(yi)它(ta)就(jiu)存(cun)在(zai)了(le)池(chi)內(nei)。處(chu)理(li)方(fang)法(fa):1、對於示差檢測器(示差檢測器池隻能耐幾個公斤壓力),隻能是反複衝洗斥資,舉高廢液瓶靠廢液管內液柱給池加一個微小反壓,所以這就靠成了示差池子排氣困難些,但無它法。
為了避免這類問題的出現,液相色譜實際分析過程中必須重視對流動相進行脫氣處理。
常用的脫氣方法有以下幾種:
1、吹氦脫氣法 使用在液體中比空氣溶解度低的氦氣,在0.1Mpa壓力下,以約60ml/min流速通入流動相10-15min以驅除溶解的氣體。此法使用於所有的溶劑,脫氣效果較好,但在國內因氦氣價格較貴,本法使用較少;
2、加熱回流法 此法的脫氣效果較好;
3、抽真空脫氣法 此時可使用微型真空泵,降壓至0.05-0.07MPa即可除區溶解的氣體。顯然使用水泵連接抽濾瓶和G4微(wei)孔(kong)玻(bo)璃(li)漏(lou)鬥(dou)可(ke)一(yi)起(qi)完(wan)成(cheng)過(guo)濾(lv)機(ji)械(xie)雜(za)質(zhi)和(he)脫(tuo)氣(qi)的(de)雙(shuang)重(zhong)任(ren)務(wu)。由(you)於(yu)抽(chou)真(zhen)空(kong)會(hui)引(yin)起(qi)混(hun)合(he)溶(rong)劑(ji)組(zu)成(cheng)的(de)變(bian)化(hua),故(gu)此(ci)法(fa)適(shi)用(yong)於(yu)單(dan)一(yi)溶(rong)劑(ji)體(ti)係(xi)脫(tuo)氣(qi)。對(dui)多(duo)元(yuan)溶(rong)劑(ji)體(ti)係(xi)應(ying)預(yu)先(xian)脫(tuo)氣(qi)後(hou)再(zai)進(jin)行(xing)混(hun)合(he),以(yi)保(bao)證(zheng)混(hun)合(he)後(hou)的(de)比(bi)例(li)不(bu)變(bian)。
4、超聲波脫氣法 它是目前實驗室使用最廣泛的脫氣方法,將配製好的流動相連同容器一起放入超聲波水漕中脫氣10-20min即可。該方法操作簡便,基本能滿足日常分析的要求。
5、在線真空脫氣法 bazhenkongtuoqizhuangzhichuanliandaochuyexitongzhong,bingjiehemoguolvqi,shixianleliudongxiangzaijinrushuyebengqiandelianxuzhenkongtuoqi。cifadetuoqixiaoguomingxianyouyushangshujizhongfangfa,bingshiyongyuduoyuanrongjitixi。
其二,在液相色譜係統開始工作前,可以用注射器連接恒流泵的排空閥,抽入流動相,將流路中的空氣驅趕幹淨。
其三,在注入樣品前注意排出樣品注射器中的空氣。
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