色譜柱在色譜儀分析係統中起著分離作用,是色譜分析的核心部件。正確使用和維護色譜柱尤為重要,使用不當就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。以下從七個方麵簡單介紹液相色譜柱在使用過程中應當著重注意的問題。
1避免壓力和溫度的急劇變化
溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會衝動柱內填料,因此在調節流速時應該緩慢進行,以保持色譜柱內填料的穩定性。
2避免直接改變溶劑的組成
zaixuyaogaibianjianceyangpinrongyezuchengshi,yingzhujiangaibianrongjidezucheng,tebieshifanxiangsepuzhong,buyingzhijiecongyoujirongjigaibianweiquanbushishui,fanzhiyiran。qiezaishiyongcixituonengliqiangde 洗脫液衝洗色譜柱時,對流路係統中流動相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過渡,每種流動相的體積應是柱體積的20倍左右,即常規分析需要50~75ML。
3避免色譜柱反衝
一yi般ban來lai說shuo色se譜pu柱zhu不bu能neng反fan衝chong,隻zhi有you色se譜pu柱zhu使shi用yong說shuo明ming書shu上shang標biao明ming該gai柱zhu可ke反fan衝chong才cai可ke以yi反fan衝chong除chu去qu留liu在zai柱zhu頭tou上shang的de雜za質zhi。否fou則ze,反fan衝chong色se譜pu柱zhu的de影ying響xiang是shi迅xun速su降jiang低di柱zhu效xiao。
4避免流動相使用不當而破壞固定相
選擇使用適宜的流動相(尤其是PH),yibimiangudingxiangbeipohuai。youshikeyizaijinyangqiqianmianlianjieyiduanyuzhu,fenxizhushijianheguijiaoshi,yuzhuweiguijiao,keshiliudongxiangzaijinrufenxizhuzhiqianyuxianbeiguijiao"飽和",避免分析柱中的矽膠基質被溶解。
5禁止樣品未經處理直接進入色譜柱
避(bi)免(mian)將(jiang)基(ji)質(zhi)複(fu)雜(za)的(de)樣(yang)品(pin)尤(you)其(qi)是(shi)生(sheng)物(wu)樣(yang)品(pin)直(zhi)接(jie)注(zhu)入(ru)柱(zhu)內(nei),需(xu)要(yao)對(dui)樣(yang)品(pin)進(jin)行(xing)預(yu)處(chu)理(li)或(huo)者(zhe)在(zai)進(jin)樣(yang)器(qi)和(he)色(se)譜(pu)柱(zhu)之(zhi)間(jian)連(lian)接(jie)一(yi)保(bao)護(hu)柱(zhu)。保(bao)護(hu)柱(zhu)一(yi)般(ban)是(shi)填(tian)有(you)相(xiang)似(si)固(gu)定(ding)相(xiang)的(de)短(duan)柱(zhu)。保(bao)護(hu)柱(zhu)可(ke)以(yi)而(er)且(qie)應(ying)該(gai)經(jing)常(chang)更(geng)換(huan)。
6禁止將緩衝溶液長時間存放在色譜柱內
保存色譜柱時應將柱內充滿乙腈或甲醇,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發幹燥。絕對禁止將緩衝溶液留在柱內靜置過夜或更長時間。
7禁止色譜柱未經處理直接封存
色譜柱使用完成之後須使用相宜溶劑進行清潔處理,例如ODS柱宜用甲醇衝洗至基線平衡;當采用鹽緩衝溶液作流動相時,使用完後應用無鹽流動相衝洗;含鹵族 元素(氟、氯、溴)的化合物可能會腐蝕不鏽鋼管道,不宜長期與之接觸;裝在液相色譜儀上的色譜柱如不經常使用,應每隔4-5天開機衝洗15分鍾。
文章(文字)來源:分析與GMP
手機版




