一、目的

為證實在進行四個以上數量級進行定量時, LC/MS/MS的樣品殘留量可降低至可測得的水平以下。

二、背景

現(xian)今(jin)質(zhi)譜(pu)儀(yi)的(de)靈(ling)敏(min)度(du)已(yi)經(jing)能(neng)夠(gou)實(shi)現(xian)跨(kua)五(wu)個(ge)數(shu)量(liang)級(ji)的(de)檢(jian)測(ce)，且(qie)柱(zhu)上(shang)進(jin)樣(yang)量(liang)的(de)定(ding)量(liang)下(xia)限(xian)可(ke)低(di)至(zhi)阿(e)克(ke)級(ji)。要(yao)使(shi)高(gao)性(xing)能(neng)質(zhi)譜(pu)儀(yi)的(de)靈(ling)敏(min)度(du)不(bu)斷(duan)增(zeng)加(jia)，也(ye)要(yao)求(qiu)LC係統上的樣品交叉汙染達到最低，以優化分析性能。

有關驗證跨多個數量級的生物分析方法的規範通常要求最高濃度校準品的樣品殘留量不多於最低濃度校準品的20%。1因此，為使校準範圍跨四個數量級，必須使樣品殘留量低至0.002%以下。

若ruo校xiao準zhun範fan圍wei在zai四si個ge數shu量liang級ji以yi上shang
，則ze必bi須xu使shi交jiao叉cha汙wu染ran減jian少shao至zhi更geng低di的de水shui平ping。通tong常chang，隨sui著zhe對dui柱zhu上shang進jin樣yang量liang交jiao叉cha汙wu染ran的de要yao求qiu不bu斷duan嚴yan格ge
，係xi統tong汙wu染ran變bian得de非fei常chang關guan鍵jian。LC係統及方法必須能夠重複地將分析物自進樣器、管道及色譜柱上去除
，以使每次進樣都沒有交叉汙染。

在對奧美拉唑進行分析時，Xevo® TQ-S上的ACQUITY UPLC® I-Class係統可使樣品殘留量減少至0.0005%以下
，且其線性定量範圍跨度可達四個數量級以上。

三
、解決方案

Xevo TQ-S是具有高靈敏度的用於LC/MS/MS分析的質譜儀。它需要一個能夠解決交叉汙染問題的UPLC® 入口，以與該儀器寬泛的線性動態範圍相匹配。ACQUITY UPLC I-Class係統可選用兩種樣品管理器：固定定量環(SM-FL)或流通針式(SM-FTN)進樣器，這兩者在設計上均能實現良好的抗交叉汙染性能。在分析奧美拉唑時，采用SM-FTN設計。該種類型的進樣器，在分析過程中，以移動相(梯度)衝洗針頭內部。在進樣口，FTNcaiyongdanzhongrongjiqingxizhentouwaibu，qiezaishejishangnenggoushixianfangzhiqingxirongyeyuyangpinhuoliudongxiangjiechu。zaimifengmiantongshiqingxizhentouyijimifengdiankejianshaowuranjilv。qingxichengxuyibianrubenfangfazhong
，qiekeshezhiweizaijinyangzhiqianyijijinyangzhihouqingxi。qingxirongjidezuchengqujueyuyangpin，qieqibixunenggouhenrongyidirongjiefenxiwu。duiyupKa為8.8的de奧ao美mei拉la唑zuo來lai說shuo，可ke采cai用yong含han有you氫qing氧yang化hua銨an的de清qing洗xi溶rong劑ji來lai清qing洗xi注zhu射she器qi。此ci外wai

，當dang將jiang氫qing氧yang化hua銨an用yong於yu流liu動dong相xiang時shi
，係xi統tong的de交jiao叉cha汙wu染ran將jiang更geng低di。在zai堿jian性xing條tiao件jian下xia，可ke使shi奧ao美mei拉la唑zuo的de離li子zi化hua效xiao率lv進jin一yi步bu提ti高gao。為wei評ping估gu交jiao叉cha汙wu染ran，向xiang色se譜pu柱zhu注zhu射she具ju最zui高gao濃nong度du(10 ng/mL或10 pg)的標準品。如圖1所示，在注射最高濃度標準品之後首次進行空白注射時，未觀察到有交叉汙染。

基於校準曲線，確定樣品殘留量低於0.0005%，而這低於質譜的檢測下限。如圖2所示，在500 ag至10 pg範圍內，采用1/x權重係數，可獲得相關係數為0.99997的線性
，這足以證實可在與Xevo TQ-S連用的ACQUITY UPLC I-Class係統上對奧美拉唑進行線性校準。

四
、小結

ACQUITY UPLC I-Class係統非常適用於需要跨四個以上數量級進行定量的高靈敏度LC/MS/MS方法的交叉汙染要求。在對奧美拉唑進行分析時，在Xevo TQ-S上未檢測到樣品殘留，且由此可知，樣品殘留量已減少至0.0005%以下。由於樣品殘留量很少，可在500 fg/mL至10 ng/mL或500 ag至10 pg之間進行校準。