一、目的
為證實ACQUITY UPLC® I-Class係統可使柱外譜帶擴展達到最低,從而使進行高分離度及高通量UPLC®分離時的分離效果更佳。以下將通過雜質分析以及彈道梯度說明這些改善的重要性。
二、背景
已證實在多種應用中,采用填裝亞2-_m顆粒的色譜柱能夠改善色譜分離的峰容量以及分離度,從而大幅度提高分離度以及通量。
然ran而er,為wei使shi一yi項xiang指zhi定ding分fen離li所suo可ke能neng達da到dao的de分fen離li度du達da到dao最zui大da,需xu要yao使shi係xi統tong擴kuo散san性xing達da到dao最zui小xiao。屬shu於yu進jin樣yang器qi後hou係xi統tong流liu路lu的de任ren何he液ye體ti管guan路lu或huo連lian接jie均jun可ke導dao致zhi柱zhu外wai譜pu帶dai展zhan寬kuan。包bao括kuo進jin樣yang閥fa、溶劑預熱裝置、連接管路、配件、及光學流通池。許多供應商已嚐試改善UHPLC係統的擴散性,但收效甚微。雖然可減小擴散性,但仍無法達到最佳從而可獲得窄孔UPLC色譜柱(內徑2.1 mm)的全部優點。這些色譜柱要求較低的流速,這使得分析每份樣品時的投資回報率更高,從而可在足夠的分離度下進行高效分離。


三、解決方案
ACQUITY UPLC I-Class係統可減小柱外譜帶分布。新設計的UV檢測器流通池的光學路徑與先前的ACQUITY UPLC的光學路徑相同,可獲得同樣高的靈敏度;另(ling)外(wai),已(yi)重(zhong)新(xin)設(she)計(ji)流(liu)體(ti)管(guan)路(lu)以(yi)及(ji)連(lian)接(jie),以(yi)使(shi)譜(pu)帶(dai)擴(kuo)散(san)進(jin)一(yi)步(bu)減(jian)小(xiao)。必(bi)須(xu)使(shi)用(yong)溶(rong)劑(ji)預(yu)熱(re)器(qi)以(yi)使(shi)可(ke)導(dao)致(zhi)柱(zhu)上(shang)分(fen)散(san)效(xiao)應(ying)的(de)溫(wen)度(du)梯(ti)度(du)減(jian)至(zhi)最(zui)低(di)。因(yin)此(ci),溶(rong)劑(ji)預(yu)熱(re)器(qi)的(de)體(ti)積(ji)應(ying)足(zu)夠(gou)小(xiao),以(yi)確(que)保(bao)使(shi)樣(yang)品(pin)簇(cu)(sample plug)以yi最zui小xiao的de擴kuo散san度du到dao達da色se譜pu柱zhu頭tou部bu,而er且qie即ji使shi在zai高gao溫wen及ji高gao流liu速su下xia也ye可ke提ti供gong極ji佳jia的de溶rong劑ji加jia熱re性xing能neng。根gen據ju您nin實shi驗yan室shi的de需xu求qiu,可ke在zai兩liang種zhong樣yang品pin管guan理li器qi(Sample Manager)中選擇一種來構成ACQUITYUPLC I-Class係統。不管是使用固定定量環式(SM-FL)還是流通針式(SM-FTN)進樣器,均已通過采用小體積的針頭端口、連接管路、及ji內nei部bu閥fa門men通tong道dao使shi由you進jin樣yang器qi所suo導dao致zhi的de擴kuo散san性xing減jian至zhi最zui低di。通tong常chang,固gu定ding環huan式shi進jin樣yang器qi的de設she計ji可ke使shi柱zhu外wai譜pu帶dai擴kuo展zhan程cheng度du更geng小xiao,這zhe是shi由you於yu其qi減jian小xiao了le注zhu射she器qi流liu動dong路lu徑jing的de體ti積ji。通tong過guo對dui每mei一yi組zu件jian進jin行xing優you化hua,已yi使shi柱zhu外wai譜pu帶dai擴kuo展zhan較jiao之zhi任ren一yi其qi他ta市shi售shouLC係統顯著降低。表1總結了在使用多種係統(包括UHPLC係統)後所獲得的譜帶擴展數值。


ACQUITY UPLC家族在保持超高效分離的整體性方麵的性能優於所有其他係統,其中ACQUITYUPLC H-Class係統的譜帶擴展減少至9 _L,而ACQUITY UPLC I-Class係統則減少至低至5.5 _L。
降低的係統擴散性可直接導致ACQUITY UPLCI-Class係統的分離度增加。分離可以達到彈道梯度,同時保持典型分析梯度中的分離度。圖2說明對丁卡因進行雜質分析的結果。
采用ACQUITY UPLC I-Class係統及購自供應商B的UHPLC係統,在相同條件下進行分離,結果ACQUITY UPLC I-Class的分離度顯著更佳。供應商B的係統按其建議安裝有光路長度為60 mm的流動池,結果發現其產生了明顯的譜帶擴展,以至於測不到肩峰。


四、小結
ACQUITY UPLC I-Classxitongjuyoubukebinidexingneng,keyongyudangjinzuijutiaozhanxingdefenlirenwu。buguannindeshiyanshixuyaozengjiafenlishidefenliduhaishixuyaozengjiayangpintongliang,talinghuodexitonggouzaodoukeshideUPLC色譜柱上的柱外譜帶擴展最低,從而獲得最佳的分離性能。
手機版







