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儀器本身性能帶來的誤差
比耳定律成立的前提條件是入射光是單色光，但是精度再高的儀器，即使是雙單色器defenguangguangduji，yezhinenghuodejinhudansedeguang，wufahuodechundanseguang，tarengranhanyouxiazhaiguangtongdai，juyoufuseguangdexingzhi。erfuseguanghuidaozhibierdinglvdezhenghuofupianli。gudingxiafengde紫外分光光度計光譜帶寬一般為1nm或2nm，可調狹縫的可以做到0.Inm；可見分光光度計帶寬6nm、snm，甚(shen)至(zhi)十(shi)幾(ji)納(na)米(mi)。光(guang)譜(pu)帶(dai)寬(kuan)應(ying)該(gai)是(shi)越(yue)小(xiao)越(yue)好(hao)，但(dan)是(shi)隨(sui)著(zhe)光(guang)譜(pu)分(fen)辨(bian)率(lv)的(de)提(ti)高(gao)，儀(yi)器(qi)的(de)靈(ling)敏(min)度(du)降(jiang)低(di)，所(suo)以(yi)選(xuan)擇(ze)儀(yi)器(qi)時(shi)要(yao)綜(zong)合(he)考(kao)慮(lv)各(ge)種(zhong)條(tiao)件(jian)的(de)影(ying)響(xiang)。當(dang)溶(rong)液(ye)濃(nong)度(du)較(jiao)小(xiao)且(qie)單(dan)色(se)光(guang)較(jiao)純(chun)時(shi)，可(ke)近(jin)似(si)認(ren)為(wei)符(fu)合(he)比(bi)耳(er)定(ding)律(lv)。
2 雜散光的影響
雜散光是指進入檢測器的處於待測波長光譜帶寬範圍外的其他波長組分，它是光譜測量中誤差的主要來源。產生原因有：分光光度計的色散元件、反射鏡、透鏡及單色器內壁灰塵等。在分光光度計工作波段邊緣波長處，由於單色器透光率、光源輻射強度、檢(jian)測(ce)器(qi)靈(ling)敏(min)度(du)都(dou)較(jiao)低(di)，雜(za)散(san)光(guang)的(de)影(ying)響(xiang)更(geng)為(wei)顯(xian)著(zhu)。雜(za)散(san)光(guang)限(xian)製(zhi)儀(yi)器(qi)的(de)分(fen)析(xi)上(shang)限(xian)可(ke)引(yin)起(qi)嚴(yan)重(zhong)的(de)測(ce)量(liang)誤(wu)差(cha)，實(shi)際(ji)工(gong)作(zuo)中(zhong)，在(zai)定(ding)量(liang)分(fen)析(xi)時(shi)，一(yi)般(ban)在(zai)吸(xi)收(shou)峰(feng)或(huo)其(qi)附(fu)近(jin)處(chu)測(ce)量(liang)樣(yang)品(pin)吸(xi)光(guang)度(du)，如(ru)果(guo)在(zai)分(fen)析(xi)波(bo)長(chang)處(chu)含(han)有(you)雜(za)散(san)光(guang)，這(zhe)時(shi)樣(yang)品(pin)的(de)透(tou)光(guang)率(lv)較(jiao)小(xiao)，而(er)雜(za)散(san)光(guang)大(da)部(bu)分(fen)透(tou)過(guo)，使(shi)測(ce)量(liang)吸(xi)光(guang)度(du)低(di)於(yu)真(zhen)實(shi)吸(xi)光(guang)度(du)。
3 儀器噪聲對測t的影響
儀器噪聲也是儀器的一個重要指標，它表征儀器做稀溶液的能力。是疊加在待測量的分析信號中的不需要的信號，掃描100%T和0%T線，可觀察到分光光度計的絕對噪聲水平，如果儀器噪聲較大，會掩蓋較小的測量信號，一般用噪音的二倍來表示儀器的靈敏度。
4 波長和吸光度準確度
樣yang品pin的de每mei一yi個ge值zhi都dou是shi在zai一yi定ding的de波bo長chang下xia測ce得de的de，如ru果guo波bo長chang誤wu差cha很hen大da，測ce出chu的de值zhi肯ken定ding不bu準zhun。吸xi光guang度du準zhun確que度du也ye是shi用yong戶hu對dui儀yi器qi的de直zhi接jie要yao求qiu，更geng應ying引yin起qi足zu夠gou的de重zhong視shi。國guo家jia計ji量liang檢jian定ding規gui程cheng規gui定ding雙shuang光guang束shu紫zi外wai可ke見jian分fen光guang光guang度du計ji透tou射she比bi準zhun確que度du為weiA級士0.6%， B級土1.0%。
測量條件的選擇
1 參比溶液和溶劑的選擇
分fen光guang光guang度du計ji的de測ce量liang實shi際ji上shang是shi以yi通tong過guo參can比bi池chi的de光guang強qiang度du作zuo為wei入ru射she光guang強qiang度du來lai測ce定ding試shi樣yang的de吸xi光guang度du，先xian調tiao節jie儀yi器qi使shi透tou過guo參can比bi池chi溶rong液ye的de吸xi光guang度du為wei零ling，然ran後hou讓rang同tong一yi束shu光guang通tong過guo樣yang品pin，使shi得de吸xi光guang度du比bi較jiao真zhen實shi地di反fan映ying待dai測ce物wu質zhi的de濃nong度du，所suo以yi參can比bi溶rong液ye的de選xuan擇ze非fei常chang重zhong要yao。如ru果guo僅jin有you待dai測ce物wu質zhi與yu顯xian色se劑ji的de反fan應ying產chan物wu有you吸xi收shou，可ke用yong純chun溶rong劑ji或huo蒸zheng餾liu水shui作zuo參can比bi溶rong液ye。如ru果guo顯xian色se劑ji有you顏yan色se，並bing在zai測ce定ding波bo長chang下xia有you吸xi收shou，則ze用yong顯xian色se劑ji溶rong液ye作zuo參can比bi溶rong液ye，所suo加jia人ren顯xian色se劑ji及ji其qi它ta試shi劑ji的de量liang，與yu試shi樣yang中zhong的de加jia入ru量liang應ying一yi致zhi。如ru果guo樣yang品pin中zhong其qi它ta組zu分fen本ben身shen的de顏yan色se對dui測ce定ding有you幹gan擾rao，而er所suo用yong顯xian色se劑ji沒mei顏yan色se，則ze用yong不bu加jia顯xian色se劑ji的de樣yang品pin溶rong液ye作zuo參can比bi液ye。
正確選擇合適的溶劑，對提高分析的準確度起重要作用。為減小溶劑中雜質的影響，應選擇高純度的溶劑；溶劑應不與待測物質發生化學反應；待測物在溶劑中要有一定的溶解度；在測定的波長範圍內，溶劑本身沒有吸收，注意常用溶劑的最短可用波長；當用揮發性大的溶劑時，測量過程中吸收池應加蓋。
2 測試波長的選擇
dangyongfenguangguangdujiduirongyejinxingcedingshi，shouxianxuyaoxuanzeheshideceliangbochang。xuanzedeyijushigaibeicerongyedexishouquxian。zaiyibanqingkuangxia，womenzongshixuanzezuidaxishoubochangzuoweiceliangbochang，zheyangkeyitigaolingmindu。erzaiyouxieqingkuangxiazuidaxishoufenghenjianrui、吸收過大或附近有幹擾存在，就不能選最大吸收波長，而必須在保證有一定靈敏度的情況下，選擇吸收曲線中的其它波長進行測定(曲線較平坦處對應的波長)，以消除幹擾。繪製吸收曲線是正確選擇波長的有效手段和方法。
