紫外分光光度計是我們實驗室常用的定性、定ding量liang儀yi器qi,是shi我wo們men檢jian測ce及ji科ke研yan必bi不bu可ke少shao的de設she備bei,用yong了le這zhe麼me多duo年nian的de老lao搭da檔dang你ni了le解jie它ta嗎ma?今jin天tian小xiao編bian就jiu跟gen你ni好hao好hao分fen析xi一yi下xia,紫zi外wai分fen光guang光guang度du計ji的de幹gan貨huo,一yi起qi看kan看kan吧ba。
在一般分光光度計的使用說明書上,要求儀器預熱時間約20分鍾;若是帶微處理器的分光光度計,開機後儀器自動進入自檢(初始化)狀態,約需10分鍾左右。
在分光光度計預熱這個環節上,很多使用者或多或少存在問題,如開機隻預熱電路係統 (不調節波長、打開吸收池暗箱蓋預熱等)或認為初始化過程就是預熱等。
對帶微處理器有自檢功能的分光光度計,開機後儀器自檢 (初始化)結束後,在測定窗口上,設置所需波長值, 用一個吸收池裝上純淨水置於光路上,調 “0000A”後,預熱儀器,當儀器顯示讀數不再變化後即可進行測定。
樣品室的主要作用就是放置樣品,液體測試一般使用比色皿,比色皿分為石英和玻璃兩種,玻璃比色皿主要用於可見區(320nm-2500nm),在紫外區有吸收,不適用於紫外區,石英比色皿可以用於紫外可見近紅外區(190nm-2500nm),另外有些透明有機玻璃也可以用作吸收池。
(1)比色皿上方通常會有字母標識,各型號標識稍有差別,玻璃比色皿口沿處有“G”(Glass 玻璃) ,而石英比色皿口沿處有“Q”(Quartz 石英) 或者 “S”(Silicide石英玻璃)。
使用需要配對的比色皿,在可適用的相同波長下,以空氣或者純水為介質,使用透光率T進行測量,將每組比色皿中的一隻透射率調為100%,然後測量另外一隻透光率,凡透射率之差不超過0.5%T,即可配對使用。
比(bi)色(se)皿(min)是(shi)分(fen)析(xi)過(guo)程(cheng)中(zhong)對(dui)結(jie)果(guo)有(you)很(hen)大(da)影(ying)響(xiang)的(de)一(yi)個(ge)因(yin)素(su),比(bi)色(se)皿(min)汙(wu)染(ran)之(zhi)後(hou)對(dui)測(ce)試(shi)的(de)影(ying)響(xiang)更(geng)大(da),會(hui)使(shi)測(ce)試(shi)不(bu)穩(wen)定(ding)甚(shen)至(zhi)結(jie)果(guo)不(bu)準(zhun),因(yin)此(ci)完(wan)成(cheng)樣(yang)品(pin)測(ce)定(ding)之(zhi)後(hou),必(bi)須(xu)徹(che)底(di)清(qing)洗(xi)比(bi)色(se)皿(min),下(xia)列(lie)清(qing)洗(xi)流(liu)程(cheng)僅(jin)供(gong)參(can)考(kao):蒸餾水清洗――乙醇清洗――幹燥。
如果比色皿被汙染,請按照如下流程清洗:在洗滌劑中浸泡約10min(30-50℃)――蒸餾水清洗――再加有少量雙氧水的稀硝酸中浸泡約30min――蒸餾水清洗――幹燥。
注:如果比色皿被有機物汙染,請先用如丙酮等有機溶劑將有機物洗去並用蒸餾水清洗。
值得注意的是:fenxishiyanchangyongdegesuanxiyebuyiyongyubiseminxidi,zheshiyinweidaishuidebiseminzaigaixiyezhongkenenghuichanshengreliang,zhishibiseminjiaojiemianliekaiersunhuai。tongshijingxiyexidihoudebiseminhaikenengcancunweiliangge(鉻在紫外區有吸收) ,因此會影響實驗的測定。
1、使用的吸收池必須潔淨,並注意配對使用。量瓶、移液吸管均應校正、洗淨後使用。
2、取吸收池時,手指應拿毛玻璃麵的兩側,裝盛樣品以池體的4/5weidu,shiyonghuifaxingrongyeshiyingjiagai,touguangmianyaoyongcajingzhiyoushangerxiacashiganjing,jianshiyingwurongjicanliu。xishouchifangruyangpinshishiyingzhuyifangxiangxiangtong。yonghouyongrongjihuoshuichongxiganjing,liangganfangchenbaocun。
3、供試品溶液濃度除各該品種已有注明外,其吸收度以在0.3~0.7之間為宜。
4、測定時除另有規定外,應以配製供試品溶液的同批溶劑為空白對照,采用1cm石英吸收池,在規定的吸收峰±2nm以yi內nei,測ce幾ji個ge點dian的de吸xi收shou度du或huo由you儀yi器qi在zai規gui定ding的de波bo長chang附fu近jin自zi動dong掃sao描miao測ce定ding,以yi核he對dui供gong試shi品pin的de吸xi收shou峰feng位wei置zhi是shi否fou正zheng確que,並bing以yi吸xi收shou度du最zui大da的de波bo長chang作zuo為wei測ce定ding波bo長chang,除chu另ling有you規gui定ding外wai吸xi收shou度du最zui大da波bo長chang應ying在zai該gai品pin種zhong項xiang下xia規gui定ding的de測ce定ding波bo長chang±2nm以內。
5、供試品應取2份,如為對照品比較法,對照品一般也應取2份。並進行平行操作,每份結果與平均值的偏差應在±0.5%以內。
6、選(xuan)用(yong)儀(yi)器(qi)的(de)狹(xia)縫(feng)寬(kuan)度(du)應(ying)小(xiao)於(yu)供(gong)試(shi)品(pin)吸(xi)收(shou)帶(dai)的(de)半(ban)寬(kuan)度(du),否(fou)則(ze)測(ce)得(de)的(de)吸(xi)收(shou)度(du)值(zhi)會(hui)偏(pian)低(di),狹(xia)縫(feng)寬(kuan)度(du)的(de)選(xuan)擇(ze)應(ying)以(yi)減(jian)少(shao)狹(xia)縫(feng)寬(kuan)度(du)時(shi)供(gong)試(shi)品(pin)的(de)吸(xi)收(shou)度(du)不(bu)再(zai)增(zeng)加(jia)為(wei)準(zhun),對(dui)於(yu)大(da)部(bu)分(fen)被(bei)測(ce)品(pin)種(zhong),可(ke)以(yi)使(shi)用(yong)2nm縫寬。
1、若實驗中需大幅度改變測試波長,需稍等片刻,等燈熱平衡後,重新校正“0”和“100%”點。然後再測量。
2、指針式儀器在未接通電源時,電表的指針必須位於零刻度上。若不是這種情況,需進行機械調零。
3、比色皿使用完畢後,請立即用蒸餾水衝洗幹淨,並用幹淨柔軟的紗布將水跡擦去,以防止表麵光潔度被破壞,影響比色皿的透光率。
4、操作人員不應輕易動燈泡及反光鏡燈,以免影響光效率。
5、一般的分光光度計,由於其光電接收裝置為光電倍增管,它本身的特點是放大倍數大,因而可以用於檢測微弱光 電信號,而不能用來檢測強光。否則容易產生信號漂移,靈敏度下降。針對其上述特點,在維修、使用此類儀器時應注意不讓光電倍增管長時間暴露於光下,因此在 預熱時,應打開比色皿蓋或使用擋光杆,避免長時間照射使其性能漂移而導致工作不穩。
6、放大器靈敏度換擋後,必須重新調零。
7、比色杯必須配套使用,否則將使測試結果失去意義。在進行每次測試前均應進行比較。具體方法如下:
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