這裏以大家最常用的大腸埃希菌為例，其它菌種方法類似。

也可以使用TSA平板進行培養，如果轉接的是冷凍保藏管中的菌
，最好再轉接一次，使用第二次轉接的菌種。

取(qu)菌(jun)液(ye)的(de)時(shi)候(hou)，需(xu)要(yao)先(xian)對(dui)菌(jun)液(ye)進(jin)行(xing)振(zhen)蕩(dang)或(huo)吹(chui)打(da)混(hun)勻(yun)，方(fang)可(ke)吸(xi)取(qu)菌(jun)液(ye)。可(ke)以(yi)不(bu)用(yong)進(jin)行(xing)倍(bei)比(bi)稀(xi)釋(shi)，隻(zhi)要(yao)能(neng)保(bao)證(zheng)最(zui)後(hou)加(jia)入(ru)到(dao)測(ce)試(shi)樣(yang)品(pin)中(zhong)的(de)菌(jun)的(de)數(shu)量(liang)符(fu)合(he)要(yao)求(qiu)即(ji)可(ke)。

取菌液時同樣需要先將試管中的菌液進行混勻。

不建議逐日觀察結果，因為平板中可能有凝集水
， 逐日觀察拿動平板，可能會導致水落到菌落上，菌跟著水流到下一個空白地方，導致結果不準確
；另外如果是ù菌，因為有孢子，拿動也會導致孢子落到平板空白地方，影響結果。

菌懸液使用有時效性要求

2015版<中國藥典>和<歐洲藥典>8.0版要求如果放置在室溫，菌懸液必須在2小時內使用，如果放置在2-8℃保存

，可以在24小時內使用。

那ô問題來了，菌懸液的菌的數量需要在48小時後才能確定，但是在24小時之內菌懸液必須使用，所以在不知道菌含量的情況下

，樣品測試需要做至少三個梯度。

筆者之前在微生物實驗室做了5次的菌懸液製備，為了保證實驗的成功，ÿ次都是要做三個梯度，雖然大多數都是同一個稀釋級的含量符合要求，但是還是偶爾有另一個稀釋級才符合要求的時候，所以筆者ÿ次都乖乖的做三個梯度的測試，還好筆者那個時候依據的法規中
，日常的無菌檢查和控製菌檢查中û有陽性對照的要求。

這zhe裏li說shuo的de三san個ge梯ti度du不bu是shi說shuo隻zhi是shi計ji數shu，而er是shi菌jun懸xuan液ye實shi際ji運yun用yong的de測ce試shi中zhong也ye需xu要yao三san個ge梯ti度du，舉ju個ge例li子zi
，某mou個ge無wu菌jun產chan品pin無wu菌jun檢jian查zha中zhong的de陽yang性xing對dui照zhao測ce試shi，需xu要yao做zuo三san個ge對dui照zhao。當dang然ran，同tong樣yang的de產chan品pin方fang法fa適shi用yong性xing，培pei養yang基ji促cu生sheng長chang測ce試shi也ye是shi如ru此ci。流liu程cheng圖tu如ru下xia：

這個流程圖中，還是省略了一些步驟，一句話帶過的倍比稀釋
，做過的小夥伴們知道，這個說起來容易做起來難。

另外在接收菌種和從冷凍保藏管中取出菌種來使用時

，還需要進行相應的鑒定



，所以不要覺得這個流程好冗長，其實已經是簡單版的。