樣品的製備和稀釋倍數的選擇
對於冰凍的樣品,在接種前要放到0~4℃的de冰bing箱xiang中zhong解jie凍dong。固gu體ti樣yang品pin要yao用yong滅mie菌jun刀dao或huo鑷nie子zi從cong不bu同tong部bu位wei采cai取qu試shi驗yan材cai料liao並bing混hun合he,在zai無wu菌jun操cao作zuo下xia充chong分fen研yan細xi,混hun勻yun,做zuo成cheng均jun勻yun稀xi釋shi液ye。樣yang品pin製zhi備bei的de整zheng個ge過guo程cheng都dou應ying在zai無wu菌jun狀zhuang態tai下xia進jin行xing,以yi防fang汙wu染ran。任何樣品在打開包裝前,都要在取樣開口處的周圍表麵進行消毒。錯誤操作是:冰凍樣品的解凍時間過長,導致細菌增殖,使實測結果偏高;固體樣品取樣不均衡,稀釋液未充分混勻,使所測結果準確度降低;取樣時未進行外包裝消毒,引起樣品汙染。
充氣飲料應在無菌條件下進行排氣;酸性樣品用經過滅菌的20~30% 碳酸鈉溶液調整pH值到中性;含鹽量較高的樣品應用滅菌蒸餾水進行稀釋。錯誤操作是:充氣飲料未經排氣,使樣品接種量偏低;酸性樣品未調pH值,使不適合酸性狀態下生長的細菌受抑製;高鹽樣品仍用生理鹽水進行稀釋,使不適於高鹽狀態下生長的細菌受抑製,結果均使實測值偏低。
不同的食品其「菌落總數」的檢出限量也不一致。醬油、奶製品、熟肉製品等細菌含量一般偏高,稀釋度可相應選擇較大的,如1:100 和1:1000 等,而飲料、糕點類樣品中細菌量偏低,稀釋度應選擇較小的,如液體樣品可選原樣,固體樣品選1:10 等。錯誤操作是:選擇的稀釋度過大,使得菌落生長稀少,或者稀釋度過小,菌落生長密度高,難以計數,導致實測結果或偏高或偏低。
接種、培養過程中應注意的問題
接(jie)種(zhong)時(shi),用(yong)移(yi)液(ye)管(guan)吸(xi)取(qu)稀(xi)釋(shi)液(ye)不(bu)應(ying)用(yong)吸(xi)球(qiu),而(er)要(yao)用(yong)管(guan)口(kou)上(shang)部(bu)塞(sai)有(you)脫(tuo)脂(zhi)棉(mian)球(qiu)的(de)經(jing)過(guo)高(gao)溫(wen)烘(hong)烤(kao)的(de)移(yi)液(ye)管(guan),以(yi)防(fang)產(chan)生(sheng)交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran)。稀(xi)釋(shi)液(ye)加(jia)入(ru)平(ping)皿(min)後(hou),應(ying)在(zai)盡(jin)可(ke)能(neng)快(kuai)的(de)時(shi)間(jian)內(nei)傾(qing)入(ru)瓊(qiong)脂(zhi)(傾倒瓊脂時,應保證瓊脂溫度在50~60℃,溫度過高,易殺死細菌;溫度過低,則瓊脂提前凝固,導致檢測失敗),並立即在桌麵上推旋平皿,使樣液與瓊脂混合均勻,切忌推旋動作過大,將瓊脂濺到平皿蓋上,影響測定結果。
pingminneiqiongzhiningguhou,buyaochangjiufangzhihoucaifanzhuanpingminpeiyang,eryingzaiqiongzhiningguhoulijijiangpingminfanzhuanyuyipeiyang,zheyangkebimianjunluomanyanshengchang,nanyijishu。
配製、分裝稀釋液或傾注平板不能在日光直射下進行,以防強烈的日光將細菌殺死。
在(zai)培(pei)養(yang)時(shi),恒(heng)溫(wen)培(pei)養(yang)箱(xiang)的(de)溫(wen)度(du)不(bu)能(neng)過(guo)高(gao),以(yi)免(mian)出(chu)現(xian)蔓(man)延(yan)生(sheng)菌(jun)的(de)趨(qu)勢(shi),但(dan)也(ye)要(yao)防(fang)止(zhi)因(yin)通(tong)風(feng)和(he)空(kong)氣(qi)循(xun)環(huan)而(er)造(zao)成(cheng)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)太(tai)幹(gan),而(er)影(ying)響(xiang)細(xi)菌(jun)的(de)正(zheng)常(chang)生(sheng)長(chang)。
滅菌消毒過程中應注意的問題
細菌檢測過程中所用到的一切用具和培養基都需經過滅菌程序。接種室要經常用消毒液進行地麵、qiangmianhezhuomiandexiaoduchuli。shiyanjinxingqian,haiyaojingziwaidengzhaosheshajun。jiancerenyuandeshiyanfuyeyaojingchangyongxiaoduyejinpaoxiaodu。fanshinengzaigaowenxiahongkaodeboliqimin、金屬器械等都應用專用紙包好並在170℃烘烤3小(xiao)時(shi)以(yi)上(shang),以(yi)徹(che)底(di)滅(mie)菌(jun)。培(pei)養(yang)基(ji)和(he)液(ye)體(ti)試(shi)劑(ji),則(ze)要(yao)在(zai)高(gao)壓(ya)鍋(guo)內(nei)進(jin)行(xing)滅(mie)菌(jun)。高(gao)壓(ya)鍋(guo)使(shi)用(yong)時(shi)應(ying)注(zhu)意(yi)在(zai)升(sheng)壓(ya)前(qian)要(yao)放(fang)淨(jing)鍋(guo)內(nei)殘(can)存(cun)的(de)空(kong)氣(qi),以(yi)保(bao)證(zheng)所(suo)需(xu)的(de)壓(ya)力(li),達(da)到(dao)滅(mie)菌(jun)效(xiao)果(guo)。滅(mie)菌(jun)效(xiao)果(guo)的(de)好(hao)壞(huai)可(ke)通(tong)過(guo)空(kong)白(bai)試(shi)驗(yan)確(que)定(ding)。空白試驗有空氣空白、稀釋用水空白、器皿空白等,完美的空白試驗平板上應該無細菌生長。
菌落計數在完成培養後應立即進行,以防細菌繼續生長蔓延影響實測結果。由於不小心、視shi力li疲pi勞lao或huo菌jun落luo沒mei有you辨bian認ren好hao,均jun可ke導dao致zhi錯cuo誤wu的de結jie果guo,因yin此ci,檢jian測ce人ren員yuan在zai計ji數shu時shi應ying采cai取qu多duo人ren同tong時shi進jin行xing計ji數shu的de方fang法fa,以yi避bi免mian這zhe種zhong情qing況kuang造zao成cheng的de誤wu差cha。
如果所有稀釋度的平板均無細菌生長,則檢測報告應以最低稀釋度報出,如最低稀釋度為1,則報為<1;若最低稀釋度為1:10,則報為<10,而不能報為「未檢出」。
以上所描述內容,均是在實際檢測「菌落總數」過程中易發生錯誤操作之處。隻有檢測人員嚴格按要求進行實際操作,避免產生上述錯誤,才能保證科學、準確地得出符合樣品實際的檢測結果,體現技術監督檢測工作的科學性和公正性。

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