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1.細菌保存於穿刺培養物中：一般細菌保存於穿刺培養物可以維持兩年。具體方法如下：用滅菌接種針挑取分散良好的單菌落，針緩慢穿過瓊脂到達瓶底，連續幾次，蓋上瓶蓋擰緊，做好標記。室溫下存放於暗處。（最好一點可以將瓶蓋放鬆，在適當溫度下培養過夜，再擰緊瓶蓋並加封Parafilm膜，室溫或最好在4度避光保存）。
2.細菌保存於含有甘油的培養物中：
（1）在液體培養基中生長的細菌培養物：取0.85ml細菌培養物，加入0.15ml高壓滅菌甘油，振蕩培養物使甘油分布均勻，然後轉移到標記好的保存管內，密封，在乙醇－幹冰或液氮中凍結後再轉至－70度長期保存。在複蘇時，用滅菌接種針刮取凍結的培養物表麵，然後立即把黏附於接種針上的細菌劃於含適當抗生素(antibiotic)的LB瓊脂平板表麵，於37度過夜。
（2）在瓊脂平板上生長的細菌培養物：從瓊脂平板表麵刮下細菌放入裝有2mlLB的無菌試管內，再加入等量的含有30％滅菌甘油的LB培(pei)養(yang)基(ji)，振(zhen)蕩(dang)使(shi)甘(gan)油(you)完(wan)全(quan)分(fen)布(bu)均(jun)勻(yun)後(hou)，分(fen)裝(zhuang)於(yu)無(wu)菌(jun)保(bao)存(cun)管(guan)內(nei)，密(mi)封(feng)，再(zai)按(an)前(qian)述(shu)方(fang)法(fa)冰(bing)凍(dong)保(bao)存(cun)。這(zhe)一(yi)方(fang)法(fa)的(de)優(you)點(dian)在(zai)於(yu)可(ke)用(yong)於(yu)保(bao)存(cun)在(zai)質(zhi)粒(li)載(zai)體(ti)上(shang)建(jian)立(li)的(de)cDNA文庫。
