下麵我們介紹一下環境中無菌或殺菌效果應如何檢查。

紫外燈在使用過程中輻射強度會逐漸降低，影響其殺菌效果
，故應該定期檢查。紫外燈的殺菌有效波長是253.7nm

，其強度可以用中心波長254nm的紫外線強度計測定。在沒有紫外線強度計的情況下可以采用生物學替代。

生物學測試簡要步驟如下：選用枯草芽孢杆菌ATCC 9372，製成106CFU/mL~108CFU/mL濃度的菌懸液；選用經脫脂處理的0.5cm×1.0cm大小的布片或鋁片
，高壓滅菌後用作載體；每個載體上滴一滴製備好的菌懸液
，幹燥後備用；將8個染菌載體放於無菌器皿中，置於紫外燈下1m~1.5m處，開啟紫外燈照射
，於0.5h、1h、1.5h和2h各取出2個染菌載體
，分別投入盛有5mL緩衝蛋白腖水的洗脫液；係列稀釋後進行平板計數；同法取8個染菌載體用做陽性對照，操作除不經紫外此昂照射外與試驗組相同。

殺滅率=（陽性對照回收菌數-試驗組回收菌數）/陽性對照回收菌數×100%

殺滅率大於99.9%時
，認為紫外燈殺菌效果合格。

無菌室空氣質量檢查應按照采樣計劃
，根據情況對處於空態、靜(jing)態(tai)和(he)正(zheng)常(chang)運(yun)行(xing)的(de)風(feng)險(xian)區(qu)
，使(shi)用(yong)適(shi)當(dang)的(de)儀(yi)器(qi)采(cai)集(ji)空(kong)氣(qi)中(zhong)微(wei)生(sheng)物(wu)
，測(ce)定(ding)並(bing)監(jian)控(kong)風(feng)險(xian)區(qu)空(kong)氣(qi)的(de)微(wei)生(sheng)物(wu)汙(wu)染(ran)。空(kong)氣(qi)懸(xuan)浮(fu)微(wei)生(sheng)物(wu)的(de)采(cai)樣(yang)和(he)計(ji)數(shu)方(fang)法(fa)多(duo)種(zhong)多(duo)樣(yang)，根(gen)據(ju)不(bu)同(tong)采(cai)樣(yang)目(mu)的(de)決(jue)定(ding)具(ju)體(ti)的(de)采(cai)樣(yang)方(fang)法(fa)和(he)采(cai)樣(yang)器(qi)。因(yin)采(cai)樣(yang)器(qi)的(de)采(cai)集(ji)效(xiao)率(lv)不(bu)同(tong)
，應(ying)慎(shen)重(zhong)選(xuan)擇(ze)合(he)適(shi)的(de)方(fang)法(fa)和(he)設(she)備(bei)。采(cai)樣(yang)器(qi)分(fen)為(wei)兩(liang)類(lei)：被動式采樣器，如落菌盤
；主動式采樣器
，如過濾采樣器、撞擊采樣器、衝擊采樣器等。

落luo菌jun盤pan等deng被bei動dong式shi空kong氣qi微wei生sheng物wu采cai樣yang器qi不bu能neng測ce量liang空kong氣qi中zhong的de微wei生sheng物wu的de總zong數shu，而er是shi測ce量liang空kong氣qi中zhong微wei生sheng物wu在zai表biao麵mian的de沉chen降jiang率lv。隻zhi要yao確que定ding單dan位wei時shi間jian落luo菌jun盤pan上shang微wei生sheng物wu的de數shu量liang，再zai根gen據ju落luo菌jun盤pan的de暴bao露lu麵mian積ji與yu暴bao露lu時shi間jian之zhi間jian的de關guan係xi，即ji可ke大da致zhi計ji算suan出chu空kong氣qi中zhong微wei生sheng物wu的de數shu量liang。

麵積小於30m²的室內設一條對角線取3點，在其中心以及兩端距牆1m處各取1點；麵積大於30m²的室內房間四麵距牆1m和中央各放置一個平皿
，高度為實驗台高度。培養基平皿開蓋暴露10min
，然後蓋上蓋子倒放
，培養48h，計數每個平皿上的菌落數。

日常監控時，可以設定可接受的菌落數限值。一般無菌室所有的取樣平皿上的細菌總數應小於15個。空氣質量良好的無菌室，通常每個平皿上生長的細菌不超過2個菌落數。

kongqicaiyangchuleziranchenjiangfawai，haikeyishiyongzhuanmendezhudongshicaiyangqi。zhudongshicaiyangqikeyipinggufengxianqukongqiweishengwudetezheng。zhudongshicaiyangqizhuyaobaokuoguolvcaiyangqi


、撞擊采樣器、衝擊采樣器等。

撞擊采樣器可以分為狹縫式采樣器
、離li心xin式shi采cai樣yang器qi和he針zhen孔kong式shi采cai樣yang器qi。狹xia縫feng式shi采cai樣yang器qi由you附fu加jia的de真zhen空kong抽chou氣qi泵beng抽chou氣qi


，通tong過guo采cai樣yang器qi的de縫feng隙xi式shi平ping板ban，將jiang采cai集ji的de空kong氣qi噴pen射she並bing撞zhuang擊ji到dao緩huan慢man旋xuan轉zhuan的de平ping板ban培pei養yang基ji表biao麵mian上shang

，附fu著zhe的de活huo微wei生sheng物wu粒li子zi經jing過guo培pei養yang後hou形xing成cheng菌jun落luo，予yu以yi計ji數shu。離li心xin式shi采cai樣yang器qi由you於yu內nei部bu風feng機ji的de高gao速su旋xuan轉zhuan，氣qi流liu從cong采cai樣yang器qi前qian部bu吸xi入ru從cong後hou部bu流liu出chu，在zai離li心xin機ji的de作zuo用yong下xia，空kong氣qi中zhong的de活huo微wei生sheng物wu粒li子zi有you足zu夠gou的de時shi間jian撞zhuang擊ji到dao專zhuan用yong的de固gu形xing培pei養yang條tiao上shang，經jing培pei養yang後hou形xing成cheng菌jun落luo
，予yu以yi計ji數shu。

過濾式空氣采樣器是最常用
、最簡單的空氣采樣器。過濾式采樣器有采樣頭、濾器、流量計和抽氣泵組成。過濾式采樣器的結構如圖：

kaidongdianjihou，chouqibenggongzuo，daidongkongqixirucaiyangtou，kongqitongguolvqideshihou，dayulvmokongjingdekelibeizuliu，dangdadaoyuxianshedingxiqitijihouchouqibengtingzhigongzuo，jianglvmoquchuzhuantiedaopeiyangjishang，peiyanghoujisuankongqizhongweishengwudenongdu。guolvshicaiyangqibuhuoxiaolvgao，danshilvmocailiaokenengyingxiangweishengwudecunhuolv
，haiyoucaiyangzulida
、流量易變的缺陷。

在沒有空氣采樣器的情況下，可以自己組裝如下圖的空氣錯率采樣裝置
，注意組裝連接處必須密不透風。

打開圖中大瓶的龍頭，空氣就被抽入無菌水中。待4L水流完，就有4L空氣通過小瓶中的無菌水
，也就是4L空氣中的微生物被留存在50mL無菌水中。無菌吸取1mL過濾的水樣進行平板計數，做2個平行。37℃培養48h計數。

每升空氣中的細菌數為：2個平皿上細菌數量的平均值×50/4。

表麵微生物汙染的檢查需要使用接觸器或拭子，獲得某表麵某時間點的微生物數量。

接觸器以容器內已知麵積的固態培養介質與表麵接觸，接觸麵積應大於20cm²
，均(jun)勻(yun)用(yong)力(li)將(jiang)整(zheng)個(ge)營(ying)養(yang)介(jie)質(zhi)壓(ya)住(zhu)表(biao)麵(mian)幾(ji)秒(miao)鍾(zhong)
，不(bu)得(de)移(yi)動(dong)。然(ran)後(hou)將(jiang)裝(zhuang)置(zhi)放(fang)回(hui)容(rong)器(qi)內(nei)
，再(zai)清(qing)潔(jie)采(cai)樣(yang)表(biao)麵(mian)
，清(qing)除(chu)殘(can)留(liu)營(ying)養(yang)物(wu)。接(jie)觸(chu)器(qi)培(pei)養(yang)後(hou)顯(xian)現(xian)的(de)菌(jun)落(luo)可(ke)以(yi)給(gei)出(chu)原(yuan)表(biao)麵(mian)微(wei)生(sheng)物(wu)的(de)存(cun)活(huo)狀(zhuang)況(kuang)的(de)鏡(jing)像(xiang)“圖”。

使用拭子更為簡單和靈活，用拭子擦拭某個表麵，它抹去的微生物數量就可以計算出了。對接觸裝置觸及不到的
、不平或有凹陷的非吸收性大表麵，用拭子采樣特別方便。棉拭子的操作方法如下：

準備材料：自製無菌棉拭子或購買商品化的無菌棉拭子

、內徑10cm×10cm無菌規格板、無菌生理鹽水、培養基平皿。

如ru果guo取qu樣yang物wu體ti是shi平ping麵mian的de，將jiang無wu菌jun規gui格ge板ban放fang在zai物wu體ti表biao麵mian
，用yong浸jin濕shi的de無wu菌jun棉mian拭shi子zi在zai無wu菌jun規gui格ge板ban空kong心xin處chu橫heng豎shu塗tu抹mo均jun勻yun，塗tu抹mo時shi隨sui之zhi轉zhuan動dong棉mian拭shi子zi，剪jian去qu棉mian拭shi子zi與yu手shou接jie觸chu部bu分fen，將jiang棉mian拭shi子zi放fang入ru裝zhuang有you一yi定ding體ti積ji的de無wu菌jun生sheng理li鹽yan水shui中zhong待dai檢jian。

將采樣管敲打80次以上是棉拭子上的細菌充分擴散，做適當稀釋，進行平板計數，37℃培養48h計數。

細菌總數（CFU/cm²）=（平皿上菌落平均數×稀釋倍數）/采樣麵積（cm²）

人員與檢測對象的接觸麵主要是手。

被(bei)檢(jian)人(ren)員(yuan)洗(xi)手(shou)消(xiao)毒(du)後(hou)，五(wu)指(zhi)並(bing)攏(long)。將(jiang)浸(jin)泡(pao)過(guo)的(de)棉(mian)拭(shi)子(zi)沿(yan)雙(shuang)手(shou)指(zhi)屈(qu)從(cong)指(zhi)根(gen)到(dao)指(zhi)端(duan)往(wang)返(fan)塗(tu)擦(ca)兩(liang)次(ci)
，塗(tu)擦(ca)的(de)同(tong)時(shi)轉(zhuan)動(dong)棉(mian)拭(shi)子(zi)。剪(jian)去(qu)操(cao)作(zuo)者(zhe)手(shou)接(jie)觸(chu)部(bu)位(wei)，將(jiang)棉(mian)拭(shi)子(zi)放(fang)入(ru)裝(zhuang)有(you)一(yi)定(ding)體(ti)積(ji)的(de)無(wu)菌(jun)室(shi)生(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)中(zhong)待(dai)檢(jian)。

按“無菌室物體表麵細菌汙染檢查”的方法進行樣品處理、接種、培養
、計數和報告結果。