一、矽膠基質填料
1、正相色譜 正相色譜用的固定相通常為矽膠（Silica）以及其他具有極性官能團胺基團
，如（NH2

，APS）和氰基團（CN
，CPS）的鍵合相填料。
由於矽膠表麵的矽羥基（SiOH）或huo其qi他ta極ji性xing基ji團tuan極ji性xing較jiao強qiang，因yin此ci，分fen離li的de次ci序xu是shi依yi據ju樣yang品pin中zhong各ge組zu分fen的de極ji性xing大da小xiao，即ji極ji性xing較jiao弱ruo的de組zu份fen最zui先xian被bei衝chong洗xi出chu色se譜pu柱zhu。正zheng相xiang色se譜pu使shi用yong的de流liu動dong相xiang極ji性xing相xiang對dui比bi固gu定ding相xiang低di，如ru正zheng已yi烷wan（Hexane）
，氯仿（Chloroform）
，二氯甲烷（Methylene Chloride）等。
2、反向色譜 反向色譜用的填料常是以矽膠為基質
，表麵鍵合有極性相對較弱官能團的鍵合相。反向色譜所使用的流動相極性較強
，通常為水、緩衝液與甲醇
、乙腈等的混合物。樣品流出色譜柱的順序是極性較強的組分最先被衝洗出，而極性弱的組分會在色譜柱上有更強的保留。
常用的反向填料有：C18（ODS）、C8（MOS）
、C4（Butyl）、C6H5（Phenyl）等。
二、聚合物填料 聚合物填料多為聚苯乙烯―二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂等，其重要優點是在PH值為1―14均可使用。相對於矽膠基質的C18填料，這類填料具有更強的疏水性；大孔的聚合物對蛋白質等樣品的分離非常有效。現有的聚合物填料的缺點是相對矽膠基質填料，色譜柱柱效較低。
三、其它無機填料 其它HPLCdewujitianliaosepuzhuyeyijingshangpinhuayouyuqiteshudexingzhi，yibanjinxianyuteshudeyongtu。ru，shimohuatanheizhengzhujianchengweifanxiangsepuzhutianliao。zhezhongtianliaodefenlibutongyuguijiaojizhiwanjijianhexiang
，shimohuatandebiaomianjishibaoliudejichu
，buzaixuqitadebiaomiangaixing。gaizhutianliaoyibanbiwanjijianhexiangguijiaohuoduokongjuhewutianliaodebaoliunengligengqiang。shimohuatankeyongyufenlimouxiejiheyigouti，youyuzaiHPLC流動相中不會被溶解
，這類柱可在任何PH與溫度下使用。氧化鋁也可以用於HPLC。氧化鋁微粒剛性強
，可製成穩定的色譜柱柱床
，其優點是可以在PH高達12deliudongxiangzhongshiyong。danyouyuyanghualvyujianxinghuahewudezuoyongyehenqiang，yingyongfanweishoudaoyidingxianzhi
，suoyiweinengguangfanyingyong。xinxingsepuyanghuagaojizhitianliaoyekeyongyuHPLC。商品化的隻有聚合物塗層的多孔氧化鋯微球色譜柱

，應用PH1-14，溫度可達100℃。由於氧化鋯填料是最近幾年才開始研究，加之麵臨的實驗難度，其重要用途與優勢尚在進行之中。
怎樣選擇填料粒度 目前，商品化的色譜填料粒度從1um到超過30um均有銷售，而目前分析分離主要用3和5um填料進行。填料的粒度主要影響填充柱的兩個參數
，即柱效和背壓。粒度越小，柱壓越大
，柱壓的增加限製了粒度小於3um的de填tian料liao應ying用yong。在zai相xiang同tong選xuan擇ze性xing條tiao件jian下xia
，提ti高gao柱zhu效xiao可ke提ti高gao分fen離li度du，但dan不bu是shi唯wei一yi的de因yin素su。如ru果guo固gu定ding相xiang選xuan擇ze是shi正zheng確que，但dan是shi分fen離li度du不bu夠gou，那na麼me選xuan用yong更geng小xiao的de粒li度du的de填tian料liao是shi很hen有you用yong的de。3um填料填充柱的柱效比相同條件下的5um填料的柱效提高近30%
；然而，3um的色譜柱的背壓卻是5um的2倍(bei)。與(yu)此(ci)同(tong)時(shi)，柱(zhu)效(xiao)提(ti)高(gao)意(yi)味(wei)著(zhe)在(zai)相(xiang)同(tong)條(tiao)件(jian)下(xia)可(ke)以(yi)選(xuan)用(yong)更(geng)短(duan)的(de)色(se)譜(pu)柱(zhu)，即(ji)相(xiang)同(tong)的(de)塔(ta)板(ban)數(shu)或(huo)分(fen)離(li)能(neng)力(li)，但(dan)是(shi)柱(zhu)長(chang)更(geng)短(duan)，以(yi)縮(suo)短(duan)分(fen)析(xi)時(shi)間(jian)。另(ling)外(wai)，可(ke)以(yi)采(cai)用(yong)低(di)粘(zhan)度(du)的(de)溶(rong)劑(ji)做(zuo)流(liu)動(dong)相(xiang)或(huo)增(zeng)加(jia)色(se)譜(pu)柱(zhu)的(de)使(shi)用(yong)溫(wen)度(du)
，比(bi)如(ru)用(yong)乙(yi)腈(jing)代(dai)替(ti)甲(jia)醇(chun)
，以(yi)降(jiang)低(di)色(se)譜(pu)柱(zhu)的(de)壓(ya)力(li)。