柱前衍生化的條件
首先,如果要是想在色譜中使用柱前衍生化,其衍生化反應應該滿足以下幾個條件:
1、反應能迅速、定量的進行,反應重複性好,反應條件不苛刻,容易操作;
2、反應的選擇性高,最好隻與目標化合物反應,即反應具有專一性;
3、衍生化反應產物隻有一種,反應的副產物和過量衍生化試劑不幹擾目標化合物的分離與檢測;
4、衍生化試劑方便易得,通用性好。
氣相色譜常見的衍生化反應
1、酯化衍生化方法
(1)甲醇法:有you機ji酸suan與yu甲jia醇chun在zai催cui化hua劑ji條tiao件jian下xia加jia熱re,發fa生sheng酯zhi化hua反fan應ying,生sheng成cheng有you機ji酸suan甲jia酯zhi。一yi般ban采cai用yong三san氟fu化hua硼peng作zuo催cui化hua劑ji,通tong常chang將jiang三san氟fu化hua硼peng通tong入ru甲jia醇chun配pei製zhi酯zhi化hua劑ji,因yin為wei配pei置zhi過guo程cheng中zhong以yi放fang熱re,有you一yi定ding的de危wei險xian性xing,現xian在zai也ye有you商shang品pin化hua的de三san氟fu化hua硼peng甲jia醇chun溶rong液ye可ke直zhi接jie購gou買mai使shi用yong。
(2)重氮甲烷法:重zhong氮dan甲jia烷wan可ke以yi與yu有you機ji酸suan反fan應ying生sheng成cheng有you機ji酸suan甲jia酯zhi放fang出chu氮dan氣qi。此ci法fa簡jian便bian有you效xiao,反fan應ying速su度du快kuai,轉zhuan化hua率lv高gao,較jiao少shao副fu反fan應ying,不bu引yin入ru雜za質zhi,但dan是shi反fan應ying要yao在zai非fei水shui介jie質zhi中zhong進jin行xing。雖sui然ran反fan應ying條tiao件jian溫wen和he,但dan是shi重zhong氮dan甲jia烷wan不bu穩wen定ding,有you爆bao炸zha性xing、有毒,製備與使用時要特別小心。另外,酚羥基在常溫下可以與重氮甲烷反應,但在0℃下可以避免酚羥基反應。
(3)三氟乙酸酐法: 在三氟乙酸酐的存在下有機酸和酸可以反應生成酯,比較適合空間位阻較大的有機酸和醇或酚的酯化。
(4)其他酯化法:有時為了提高方法的靈敏度和選擇性,需要製備甲酯之外的酯,方法與甲酯化方法類似,可以用重氮乙烷、重氮丙烷、重氮甲苯代替重氮甲烷以製得相應的酯,且這些實際的穩定性好、爆炸性小。用三氟化硼的丙醇、丁醇或戊醇溶液與有機酸反應也可以製得相應的丙酯、丁酯或戊酯。
2、酰化衍生化方法
酰化能降低羥基、氨基、巰qiu基ji的de極ji性xing,改gai善shan這zhe些xie化hua合he物wu的de色se譜pu性xing能neng,並bing提ti高gao這zhe些xie化hua合he物wu的de揮hui發fa性xing,增zeng加jia某mou些xie易yi氧yang化hua化hua合he物wu的de穩wen定ding性xing。當dang酰xian化hua時shi引yin入ru含han有you鹵lu離li子zi的de酰xian基ji時shi,還hai可ke以yi提ti高gao使shi用yongECD檢測器的靈敏度。常用的酰化試劑有酰鹵、酸酐和反應活性的酰化物。
(1)乙酰化法:標準乙酰化法是將樣品溶於氯仿中,與乙酸酐和乙酸在50℃反應2-6h,真空出去剩餘試劑。還可以乙酸鈉為堿性催化劑,以乙酸酐為乙酰化試劑進行乙酰化反應,用於糖類分析。吡啶、三甲胺、甲基咪唑也可以作為堿性催化劑。乙酰化反應通常在非水介質中進行,但是胺類和酚類化合物乙酰化時可在水溶液中進行。
(2)多氟酰化法:常用的多氟化試劑是三氟乙酰(TFA)、五氟丙酰(PFP)和七氟丁酰(HFB),其活性是TFA>PFP>HFB。TFA和PFP的衍生物揮發性較強,而HFB的衍生物ECDlingmindujiaogao。duofuxianhuafanyingshijianchulequjueyuduofuxianhuashijidehuoxing,haiqujueyumubiaohuahewudehuoxing。duoshuqingkuangxiafuxianhuafanyingbuxurongji,danyouxieqingkuangxiayeshixuyaorongjide,ciwaiyoushihaixuyaojiajianxingcuihuaji。
3、鹵化衍生化法
在目標化合物中引入鹵原子後可使用ECD檢測器,提高檢測的靈敏度,同時可以改善揮發性和穩定性,常用的鹵化衍生化方法如下:
(1)鹵素法:用鹵素直接作為衍生化試劑處理樣品,鹵素的作用是加成或取代。
(2)鹵化氫法:常用HCl和HBr為衍生化試劑與不飽和鏈發生加成反應或與羥基發生置換反應。
(3)N-溴代丁二酰亞胺(NBS)法:NBS是選擇性很強的鹵化衍生試劑,可使烯丙位的氫原子發生溴代反應。
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