在做液相分析時有哪些懶不能偷?哪些操作不能做?希望看完這篇文章大家能夠有所收獲!歡迎轉發收藏!
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01
流動相走空
泵工作時要留意溶劑瓶內的流動相是否被用完,若發生空泵運轉會磨損柱塞、缸體或密封環,最終產生漏液。
02
沒有流動相流出,又無壓力指示
1、一種原因是泵內有大量氣體,打開泄壓閥,使泵在較大流量(如5ml/min)下運轉,將氣泡排盡。
2.另一個可能原因是密封環磨損,需要更換。
03
梯度洗脫的流動相選擇不當
1.yaozhuyirongjidehurongxing,buxianghunrongderongjibunengyongzuotiduxituodeliudongxiang。lingwaiyouxierongjizaiyidingbilineihunrong,chaochufanweihoujiubuhurong,shiyongshigengyaoyinqizhuyi。
2.當有機溶劑和緩衝液混合時,還可能析出鹽的晶體,尤其使用磷酸鹽時需特別小心。
04
忽略空白梯度洗脫
1.梯度洗脫所用的溶劑純度要求更高,以保證良好的重現性。進行樣品分析前必須進行空白梯度洗脫,以辨認溶劑雜質峰。
2.因為弱溶劑中的雜質富集在色譜柱頭後會被強溶劑洗脫下來。用於梯度洗脫的溶劑需徹底脫氣,以防止混合時產生氣泡。
05
流動相不過濾
1.由於任何雜質微粒都會磨損柱塞、密封環、缸體和單向閥,因此應預先除去流動相中的雜質微粒。
2.流動相最好在玻璃容器內蒸餾,而常用的方法是過濾,可通過4.5um濾膜過濾後使用,現配現用。輸液泵的濾器應經常清洗或更換。
06
使用後不及時洗泵
1.如果將含緩衝液的流動相留在泵內,尤其是在停泵過夜或更長時間的情況下,或由於蒸發、泄漏,甚至隻是由於溶液的靜置,就可能析出鹽的微細晶體,這些晶體將和上述固體微粒一樣會損壞密封環和柱塞等。
2.因此,必須用純水將泵充分清洗後,再換成適合於色譜柱保存或有利於泵維護的溶劑(對於反相鍵合矽膠固定相,可以是甲醇或甲醇-水)。
07
壓力過高或過低
壓力降低的原因則可能是管路有泄漏或堵塞。檢查堵塞或泄漏時應逐段進行。
在進行梯度洗脫時,由於多種溶劑混合,而且組成不斷變化,因此帶來一些特殊問題,必須充分重視。
08
調節流速太快
調節流速時應該緩慢進行,在進樣時閥的轉動不能過快,避免導致壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動影響柱內填料的填充狀況。
09
反衝色譜柱
yibanshuolaisepuzhubunengfanchong,chufeitebiezhiminggaizhukeyifanchongshi,caikeyifanchongchuquliuzaizhutoudezazhi。fouzefanchonghuixunsujiangdizhuxiao,yanzhongdeshenzhisunhuaisepuzhu。
010
不使用保護柱
為(wei)了(le)避(bi)免(mian)將(jiang)來(lai)源(yuan)於(yu)色(se)譜(pu)係(xi)統(tong)的(de)汙(wu)染(ran)或(huo)樣(yang)品(pin)的(de)汙(wu)染(ran)直(zhi)接(jie)進(jin)入(ru)柱(zhu)內(nei),從(cong)而(er)縮(suo)短(duan)色(se)譜(pu)柱(zhu)的(de)使(shi)用(yong)壽(shou)命(ming),需(xu)要(yao)在(zai)進(jin)樣(yang)器(qi)和(he)色(se)譜(pu)柱(zhu)之(zhi)間(jian)連(lian)接(jie)保(bao)護(hu)柱(zhu)從(cong)而(er)截(jie)取(qu)不(bu)溶(rong)性(xing)顆(ke)粒(li)和(he)吸(xi)附(fu)樣(yang)品(pin)基(ji)質(zhi)中(zhong)的(de)雜(za)質(zhi)。使(shi)用(yong)保(bao)護(hu)柱(zhu)可(ke)大(da)大(da)降(jiang)低(di)分(fen)析(xi)柱(zhu)受(shou)汙(wu)染(ran)的(de)程(cheng)度(du),延(yan)長(chang)分(fen)析(xi)柱(zhu)使(shi)用(yong)壽(shou)命(ming)。
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