液相色譜儀，於多數檢測人來說是很好上手的儀器，但是就算是用過幾年、經驗豐富的分析員也會習慣於一些錯誤的操作，導致挺貴的機器沒用幾次就壞了。
簡化分析過程固然重要，但是為了省時間而忽略了一些必不可少的步驟，損壞了儀器就得不償失了。因為塵埃或其它任何雜質微粒都會磨損柱塞、密封環、缸體和單向閥，因此應預先除去流動相中的任何固體微粒。流動相最好在玻璃容器內蒸餾，而常用的方法是濾過，可采用Millipore濾膜（0.2μm或0.45μm）等濾器。泵的入口都應連接砂濾棒（或片）。輸液泵的濾器應經常清洗或更換。
liudongxiangbuyinghanyourenhefushixingwuzhi，hanyouhuanchongyedeliudongxiangbuyingbaoliuzaibengnei，youqishizaitingbengguoyehuogengchangshijiandeqingkuangxia。ruguojianghanhuanchongyedeliudongxiangliuzaibengnei，youyuzhengfahuoxielou，shenzhizhishiyouyurongyedejingzhi，jiukenengxichuyandeweixijingti，zhexiejingtijiangheshangshugutiweiliyiyangsunhuaimifenghuanhezhusaideng。因此，必須泵入純水將泵充分清洗後，再換成適合於色譜柱保存和有利於泵維護的溶劑（對於反相鍵合矽膠固定相，可以是甲醇或甲醇-水）。泵工作時要留心防止溶劑瓶內的流動相被用完，否則空泵運轉也會磨損柱塞、缸體或密封環，最終產生漏液。可能是泵內有大量氣體，這時可打開泄壓閥，使泵在較大流量（如5mL/min）下運轉，將氣泡排盡，也可用一個50mL針筒在泵出口處幫助抽出氣體。另一個可能原因是密封環磨損，需更換。原因可能是氣泡，需要排除；或huo者zhe是shi單dan向xiang閥fa內nei有you異yi物wu，可ke卸xie下xia單dan向xiang閥fa，浸jin入ru丙bing酮tong內nei超chao聲sheng清qing洗xi。有you時shi可ke能neng是shi砂sha濾lv棒bang內nei有you氣qi泡pao，或huo被bei鹽yan的de微wei細xi晶jing粒li或huo滋zi生sheng的de微wei生sheng物wu部bu分fen堵du塞sai，這zhe時shi，可ke卸xie下xia砂sha濾lv棒bang浸jin入ru流liu動dong相xiang內nei超chao聲sheng除chu氣qi泡pao，或huo將jiang砂sha濾lv棒bang浸jin入ru稀xi酸suan（如4mol/L硝酸）內迅速除去微生物，或將鹽溶解，再立即清洗。 可(ke)能(neng)是(shi)是(shi)管(guan)路(lu)被(bei)堵(du)塞(sai)，需(xu)要(yao)清(qing)除(chu)和(he)清(qing)洗(xi)。壓(ya)力(li)降(jiang)低(di)的(de)原(yuan)因(yin)則(ze)可(ke)能(neng)是(shi)管(guan)路(lu)有(you)泄(xie)漏(lou)。檢(jian)查(zha)堵(du)塞(sai)或(huo)泄(xie)漏(lou)時(shi)應(ying)逐(zhu)段(duan)進(jin)行(xing)。在(zai)進(jin)行(xing)梯(ti)度(du)洗(xi)脫(tuo)時(shi)，由(you)於(yu)多(duo)種(zhong)溶(rong)劑(ji)混(hun)合(he)，而(er)且(qie)組(zu)成(cheng)不(bu)斷(duan)變(bian)化(hua)，因(yin)此(ci)帶(dai)來(lai)一(yi)些(xie)特(te)殊(shu)問(wen)題(ti)，必(bi)須(xu)充(chong)分(fen)重(zhong)視(shi)：PS：（zaiyexiangsepuzhongduizufenfuzadeyangpincaiyongtiduxituodefangfa。zaitongyigefenxizhouqizhong，anyidingchengxubuduangaibianliudongxiangdenongdupeibi，chengweitiduxituo。congerkeyishiyigefuzayangpinzhongdexingzhichayijiaodadezufennengangezishiyiderongliangyinzik達到良好的分離目的。梯度洗脫的優點：1.縮短分析周期；2.提高分離能力；3.峰型得到改善，很少拖尾；4.增加靈敏度。但有時引起基線漂移。）
yaozhuyirongjidehurongxing，buxianghunrongderongjibunengyongzuotiduxituodeliudongxiang。youxierongjizaiyidingbilineihunrong，chaochufanweihoujiubuhurong，shiyongshigengyaoyinqizhuyi。當有機溶劑和緩衝液混合時，還可能析出鹽的晶體，尤其使用磷酸鹽時需特別小心。梯ti度du洗xi脫tuo所suo用yong的de溶rong劑ji純chun度du要yao求qiu更geng高gao，以yi保bao證zheng良liang好hao的de重zhong現xian性xing。進jin行xing樣yang品pin分fen析xi前qian必bi須xu進jin行xing空kong白bai梯ti度du洗xi脫tuo，以yi辨bian認ren溶rong劑ji雜za質zhi峰feng，因yin為wei弱ruo溶rong劑ji中zhong的de雜za質zhi富fu集ji在zai色se譜pu柱zhu頭tou後hou會hui被bei強qiang溶rong劑ji洗xi脫tuo下xia來lai。用yong於yu梯ti度du洗xi脫tuo的de溶rong劑ji需xu徹che底di脫tuo氣qi，以yi防fang止zhi混hun合he時shi產chan生sheng氣qi泡pao。混hun合he溶rong劑ji的de粘zhan度du常chang隨sui組zu成cheng而er變bian化hua，因yin而er在zai梯ti度du洗xi脫tuo時shi常chang出chu現xian壓ya力li的de變bian化hua。例li如ru甲jia醇chun和he水shui粘zhan度du都dou較jiao小xiao，當dang二er者zhe以yi相xiang近jin比bi例li混hun合he時shi粘zhan度du增zeng大da很hen多duo，此ci時shi的de柱zhu壓ya大da約yue是shi甲jia醇chun或huo水shui為wei流liu動dong相xiang時shi的de兩liang倍bei。因yin此ci要yao注zhu意yi防fang止zhi梯ti度du洗xi脫tuo過guo程cheng中zhong壓ya力li超chao過guo輸shu液ye泵beng或huo色se譜pu柱zhu能neng承cheng受shou的de最zui大da壓ya力li。①樣品溶液進樣前必須用0.45μm濾膜過濾，以減少微粒對進樣閥的磨損。②轉動閥芯時不能太慢，更不能停留在中間位置，否則流動相受阻，使泵內壓力劇增，甚至超過泵的最大壓力；再轉到進樣位時，過高的壓力將使柱頭損壞。③為防止緩衝鹽和樣品殘留在進樣閥中，每次分析結束後應衝洗進樣閥。通常可用水衝洗，或先用能溶解樣品的溶劑衝洗，再用水衝洗。
色譜柱的正確使用和維護十分重要，稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過程中，需要注意下列問題，以維護色譜柱。避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會衝動柱內填料，因此在調節流速時應該緩慢進行，在閥進樣時閥的轉動不能過緩（如前所述）。一般說來色譜柱不能反衝，隻有生產者指明該柱可以反衝時，才可以反衝除去留在柱頭的雜質。否則反衝會迅速降低柱效。選擇使用適宜的流動相（尤其是pH），yibimiangudingxiangbeipohuai。youshikeyizaijinyangqiqianmianlianjieyiyuzhu，fenxizhushijianheguijiaoshi，yuzhuweiguijiao，keshiliudongxiangzaijinrufenxizhuzhiqianyuxianbeiguijiao“飽和”，避免分析柱中的矽膠基質被溶解。bimianjiangjizhifuzadeyangpinyouqishishengwuyangpinzhijiezhuruzhunei，xuyaoduiyangpinjinxingyuchulihuozhezaijinyangqihesepuzhuzhijianlianjieyibaohuzhu。baohuzhuyibanshitianyouxiangsigudingxiangdeduanzhu。baohuzhukeyierqieyinggaijingchanggenghuan。
對(dui)於(yu)儀(yi)器(qi)本(ben)身(shen)一(yi)般(ban)不(bu)會(hui)有(you)問(wen)題(ti)，特(te)別(bie)是(shi)剛(gang)買(mai)回(hui)來(lai)的(de)新(xin)儀(yi)器(qi)。對(dui)於(yu)儀(yi)器(qi)本(ben)身(shen)最(zui)重(zhong)要(yao)的(de)就(jiu)是(shi)儀(yi)器(qi)的(de)校(xiao)驗(yan)，剛(gang)買(mai)回(hui)來(lai)的(de)儀(yi)器(qi)一(yi)般(ban)都(dou)是(shi)由(you)賣(mai)家(jia)先(xian)對(dui)儀(yi)器(qi)做(zuo)係(xi)統(tong)的(de)確(que)認(ren)工(gong)作(zuo)（包括IQ、PQ、OQ），確(que)認(ren)順(shun)利(li)通(tong)過(guo)後(hou)，再(zai)請(qing)國(guo)家(jia)或(huo)省(sheng)級(ji)儀(yi)器(qi)檢(jian)定(ding)局(ju)的(de)來(lai)校(xiao)驗(yan)，檢(jian)定(ding)合(he)格(ge)後(hou)就(jiu)可(ke)以(yi)放(fang)心(xin)使(shi)用(yong)了(le)，除(chu)此(ci)之(zhi)外(wai)，一(yi)些(xie)做(zuo)得(de)好(hao)的(de)公(gong)司(si)每(mei)半(ban)年(nian)會(hui)對(dui)儀(yi)器(qi)進(jin)行(xing)一(yi)次(ci)的(de)內(nei)部(bu)校(xiao)驗(yan)，目(mu)的(de)就(jiu)是(shi)為(wei)了(le)保(bao)證(zheng)儀(yi)器(qi)的(de)正(zheng)常(chang)可(ke)運(yun)行(xing)狀(zhuang)態(tai)。色譜條件一般包括流動相、色譜柱、檢測波長、流速及進樣量。 流動相就涉及到配製流動相所用到的水和試劑試液，水一般要求用超純水或其他水的電阻率不大於18.2兆歐級別，試劑試液要求用色譜級別的，原因為防止水和試劑試液中的雜質對色譜結果的幹擾。色se譜pu柱zhu會hui因yin不bu同tong的de品pin種zhong而er有you不bu同tong的de要yao求qiu，但dan每mei根gen色se譜pu柱zhu都dou有you它ta的de清qing洗xi要yao求qiu，這zhe個ge在zai色se譜pu柱zhu說shuo明ming書shu上shang都dou可ke以yi找zhao到dao，一yi定ding要yao根gen據ju上shang麵mian的de要yao求qiu進jin行xing，否fou則ze會hui造zao成cheng色se譜pu柱zhu效xiao下xia降jiang和he色se譜pu柱zhu的de使shi用yong壽shou命ming縮suo短duan，檢jian測ce波bo長chang也ye會hui因yin品pin種zhong的de不bu同tong有you不bu同tong的de要yao求qiu，這zhe裏li需xu要yao指zhi出chu的de是shi要yao注zhu意yi觀guan察cha檢jian測ce器qi氘dao燈deng能neng量liang的de變bian化hua，比bi如ru基ji線xian波bo動dong大da，活huo性xing成cheng分fen的de響xiang應ying值zhi突tu然ran變bian小xiao等deng，都dou有you可ke能neng是shi氘dao燈deng的de能neng量liang不bu足zu所suo引yin起qi的de，氘dao燈deng一yi般ban建jian議yi使shi用yong800小時，但實際上使用時間不止，可根據實際情況更換。流速也因品種的不同而不同，一般為1.0mL/min，流速是不可隨意改動的，特別是作為QC人ren員yuan，但dan是shi作zuo為wei研yan發fa人ren員yuan，有you時shi為wei了le摸mo索suo條tiao件jian或huo進jin行xing方fang法fa耐nai用yong性xing驗yan證zheng，會hui對dui流liu速su進jin行xing改gai變bian以yi評ping價jia方fang法fa的de適shi用yong性xing。對dui於yu進jin樣yang量liang因yin不bu同tong的de品pin種zhong也ye有you不bu同tong規gui定ding，進jin樣yang量liang這zhe塊kuai現xian在zai都dou使shi用yong自zi動dong進jin樣yang，所suo以yi進jin樣yang精jing密mi度du都dou很hen好hao，不bu需xu強qiang調tiao什shen麼me。
首(shou)先(xian)，作(zuo)為(wei)液(ye)相(xiang)操(cao)作(zuo)人(ren)員(yuan)，一(yi)定(ding)要(yao)認(ren)真(zhen)學(xue)習(xi)液(ye)相(xiang)的(de)說(shuo)明(ming)書(shu)，掌(zhang)握(wo)液(ye)相(xiang)硬(ying)件(jian)和(he)軟(ruan)件(jian)的(de)操(cao)作(zuo)，掌(zhang)握(wo)日(ri)常(chang)的(de)維(wei)護(hu)保(bao)養(yang)，掌(zhang)握(wo)最(zui)基(ji)礎(chu)故(gu)障(zhang)的(de)排(pai)除(chu)和(he)維(wei)修(xiu)。一yi般ban液ye相xiang的de操cao作zuo規gui程cheng也ye是shi有you操cao作zuo人ren員yuan起qi草cao的de，所suo以yi隻zhi要yao嚴yan格ge按an照zhao操cao作zuo要yao求qiu進jin行xing操cao作zuo，一yi般ban不bu會hui出chu現xian問wen題ti，當dang然ran啫啫喱li需xu要yao特te別bie指zhi出chu的de是shi對dui於yu液ye相xiang的de日ri常chang維wei護hu保bao養yang很hen重zhong要yao，比bi如ru流liu動dong相xiang的de過guo濾lv、脫氣、泵密封墊的清洗、係統管路的清洗、溶劑過濾頭的清洗等，倘若不堅持，很容易導致色譜柱堵塞、係統壓力過大、色譜峰異常等不必要的故障，浪費時間。其次，操作人員在配製液相分析用樣品溶液時，最好由同一個人單獨完成，以免不必要的偶然誤差。液相色譜儀應盡量安裝於水平、遠離振動、電(dian)磁(ci)幹(gan)擾(rao)的(de)屋(wu)內(nei)的(de)台(tai)麵(mian)上(shang)，有(you)條(tiao)件(jian)的(de)話(hua)盡(jin)量(liang)將(jiang)液(ye)相(xiang)數(shu)據(ju)處(chu)理(li)係(xi)統(tong)分(fen)隔(ge)開(kai)，一(yi)個(ge)是(shi)防(fang)止(zhi)色(se)譜(pu)基(ji)線(xian)噪(zao)音(yin)偏(pian)大(da)，基(ji)線(xian)不(bu)穩(wen)等(deng)，一(yi)個(ge)是(shi)為(wei)減(jian)少(shao)對(dui)人(ren)體(ti)的(de)危(wei)害(hai)。 
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