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液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)圖(tu)是(shi)打(da)開(kai)未(wei)知(zhi)物(wu)質(zhi)世(shi)界(jie)的(de)大(da)門(men)，科(ke)研(yan)中(zhong)的(de)很(hen)多(duo)問(wen)題(ti)都(dou)能(neng)從(cong)色(se)譜(pu)圖(tu)中(zhong)得(de)到(dao)很(hen)好(hao)的(de)反(fan)映(ying)，有(you)些(xie)問(wen)題(ti)可(ke)以(yi)通(tong)過(guo)改(gai)變(bian)設(she)備(bei)參(can)數(shu)得(de)到(dao)解(jie)決(jue)，而有些問題則必須通過修改操作程序來解決，畢竟，正確選擇色譜柱和流動相才是得到好的色譜圖的關鍵。
小編在此根據大家實踐中可能會經常遇到的一些圖譜問題進行了整理彙總，大家一起來看一下吧。
1、拖尾峰
1、篩板阻塞：柱zhu子zi兩liang頭tou的de過guo濾lv篩shai板ban如ru果guo堵du塞sai，樣yang品pin就jiu會hui在zai篩shai板ban部bu分fen受shou阻zu而er形xing成cheng時shi間jian延yan遲chi，使shi得de樣yang品pin在zai柱zhu後hou流liu出chu時shi峰feng型xing形xing成cheng拖tuo尾wei。需xu要yao通tong過guo反fan衝chong色se譜pu柱zhu，或huo者zhe更geng換huan篩shai板ban。
2、色譜柱塌陷：是(shi)指(zhi)色(se)譜(pu)柱(zhu)由(you)於(yu)其(qi)它(ta)原(yuan)因(yin)引(yin)起(qi)了(le)柱(zhu)效(xiao)率(lv)喪(sang)失(shi)，不(bu)能(neng)對(dui)物(wu)質(zhi)形(xing)成(cheng)保(bao)留(liu)，使(shi)得(de)物(wu)質(zhi)不(bu)在(zai)固(gu)定(ding)相(xiang)上(shang)保(bao)留(liu)而(er)隨(sui)流(liu)動(dong)相(xiang)流(liu)出(chu)，但(dan)是(shi)又(you)還(hai)有(you)一(yi)點(dian)柱(zhu)效(xiao)，因(yin)此(ci)形(xing)成(cheng)拖(tuo)尾(wei)。需(xu)要(yao)重(zhong)新(xin)填(tian)充(chong)色(se)譜(pu)柱(zhu)或(huo)者(zhe)更(geng)換(huan)色(se)譜(pu)柱(zhu)。
3、有汙染：即樣品不在同一起跑線起跑，從後麵開始跑得到達終點稍晚，表現出拖尾。更換色譜柱或者采用有機溶劑梯度洗脫1h以上，以衝洗柱子。
4、流動相pH值選擇錯誤：如某pH下有的樣品存在分子型和離子型的動態平衡，離子型的陸續向分子型轉化就會表現出拖尾。調節pH值可抑製分子解離，改善拖尾，對於堿性化合物，相對較低的PH值更有利於得到對稱峰。
2、前沿峰
1、樣品過載：被保留的樣品在正常出峰時間前陸續出來，形成前沿峰。降低樣品含量。
2、樣品溶劑選擇不恰當：當dang樣yang品pin溶rong劑ji的de洗xi脫tuo能neng力li大da大da強qiang於yu流liu動dong相xiang時shi會hui出chu現xian前qian沿yan峰feng，例li如ru，在zai反fan相xiang色se譜pu中zhong用yong已yi腈jing做zuo樣yang品pin溶rong劑ji，而er流liu動dong相xiang的de洗xi脫tuo力li較jiao弱ruo時shi會hui出chu現xian前qian沿yan峰feng。選xuan擇ze流liu動dong相xiang或huo者zhe接jie近jin流liu動dong相xiang的de比bi例li作zuo為wei樣yang品pin溶rong劑ji。
3、色譜柱損壞：色譜柱柱效損失，不能對物質形成保留。更換色譜柱。
4、在大峰前有小峰出現，假象前沿峰，即大峰前包埋了沒有分開的小峰。調整流動相洗脫梯度。
3、倒峰
1、樣品折射率小：示差折光檢測器測的信號是折射率，出現倒峰的原因是組分的折射率小於流動相。
2、密度的原因：密度不一樣，出來的峰正倒不一樣。
3、進樣所致：進樣時，樣品對原有流動相產生瞬間阻斷，然後瞬間湧流，所以產生先倒後高的“溶劑峰”。
4、基本不可避免：試著使用與流動相相同的溶劑作為溶樣溶劑，另外進樣之前注意平衡跟衝洗參比池。倒峰基本上不能避免，但是這樣操作會小些。
4、包裹
1、色譜柱問題：色譜柱流失，柱子被汙染。
2、樣品溶解度差：溫度可能會影響到溶解度。
3、流動相不均勻：一般是流動相沒配好，管路流動相不均勻，也會導致上述現象。
5、基線漂移
1、柱溫波動：即使是很小的溫度變化都會引起基線的波動，通常影響示差檢測器、電導檢測器、較低靈敏度的紫外檢測器或其它光電類檢測器。使用柱溫箱，控製好柱子和流動相的溫度，在檢測器之前使用熱交換器。
2、流動相不均勻：流動相條件變化引起的基線漂移大於溫度導致的漂移。使用HPLC級的溶劑，流動相在使用前進行脫氣處理。
3、流通池被汙染或有氣體：用甲醇或其他強極性溶劑衝洗流通池。如有需要，可以用1N的硝酸(不要用鹽酸)。
4、流動相配比不當或流速變化：更改配比或流速，為避免這個問題可定期檢查流動相組成及流速。
5、樣品中有強保留的物質：以yi饅man頭tou峰feng樣yang被bei洗xi脫tuo出chu，從cong而er表biao現xian出chu一yi個ge逐zhu步bu升sheng高gao的de基ji線xian。使shi用yong保bao護hu柱zhu，如ru有you必bi要yao，在zai進jin樣yang之zhi間jian或huo在zai分fen析xi過guo程cheng中zhong，定ding期qi用yong強qiang溶rong劑ji衝chong洗xi柱zhu子zi。
6、出現寬峰
1、色譜柱汙染或失效，造成塔板數降低：更換同樣類型的色譜柱，如果新柱子可以提供對稱的色譜峰，則用強溶劑衝洗舊柱子。
2、柱子與檢測器之間的管路太長或管路內徑太大：更換內徑較小的短管路。
3、檢測器對反應時間或池體積響應過大：減少響應時間或使用更小的流通池。
7、基線噪音
1、在流動相、檢測器或泵中有空氣(尖銳峰)：流動相脫氣，衝洗係統以除去檢測器或泵中的空氣。
2、漏液：檢查管路接頭是否鬆動，泵是否漏液，是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要，更換泵密封。
3、流動相混合不完全：用手搖動使混合均勻或使用低粘度的溶劑。
4、溫度影響(柱溫過高，檢測器未加熱)：使用柱溫箱，減少溫度差異或加上熱交換器。
5、在同一條線上有其他電子設備(偶然噪聲)：斷開LC、檢測器和記錄儀，檢查幹擾是否來自於外部，加以更正。采用精密級穩壓電源。
8、分離度不夠
1、流動相梯度洗脫設置不合理：優化梯度洗脫程序。
2、流動相汙染或變質(引起保留時間變化)：重新配製流動相。
3、保護柱或分析柱阻塞：去掉保護柱進行分析，如果必要則更換保護柱；如果分析柱阻塞，可進行反衝；如果問題仍然存在色譜柱可能被強保留的汙染物損壞，建議使用恰當的再生程序；如果問題仍然存在，進口可能阻塞了，更換入口處的篩板或更換色譜柱。
文章（文字）來源：分析測試百科網
