zhibeixinggaoxiaoyexiangsepuyitongchangdoubeirenweihedarongliangsepuzhuhegaoliusuyouguanliande。ranerbingbushiyishebeidedaxiaohexitongxiaohaodeliudongxiangdeduoshaolaijuedingzhibeigaoxiaoyexiangsepu,ershiyijufenlimudelaijueding。yufenxiyexiangbutong,zhibeiyexiangdemudeshiduichanpindedantijinxingtiquhechunhua。
與傳統的純化方法(如蒸餾、萃取)比較,製備液相是一種更有效的分離方法,因此被廣泛應用在樣品和產品的提取和純化上。隨著合成、植化、生化和製藥等領域對高純度組份的需求不斷增加,製備型液相色譜儀應用的領域也在迅速的擴大發展。
製備液相與分析液相的區別
hezhibeiyexiangduiyingde,shifenxiyexiang。tamendezuidachabie,buzaiyuwaixing,erzaiyumude。fenxiyexiangdemudedangranshiweilefenxiyangpin,youshenmechengfen,hanliangduoshao,yejiaozuodingxingdingliang。yaozuohaofenxiyexiang,zuiguanzhudeshifenliduhelingmindu,yaofendekai,cededao,cedezhun。erzhibeiyexiangshiliyongsepuzhudefenlinengli,laiquchuzazhi,dedaogaochunyangpin。weishenmeqiangtiaochundune?
在實驗室裏,紅外、紫外、核he磁ci這zhe些xie儀yi器qi,都dou要yao求qiu樣yang品pin達da到dao足zu夠gou的de純chun度du,才cai能neng得de到dao準zhun確que的de結jie果guo。除chu了le實shi驗yan室shi,藥yao品pin的de生sheng產chan也ye需xu要yao純chun化hua,特te別bie是shi生sheng物wu製zhi品pin和he藥yao劑ji。很hen多duo生sheng物wu製zhi品pin如ru果guo是shi直zhi接jie吃chi下xia去qu,跟gen吃chi個ge雞ji蛋dan也ye沒mei什shen麼me不bu同tong,直zhi接jie注zhu射she才cai能neng保bao留liu活huo性xing成cheng份fen。而er注zhu射she治zhi療liao,藥yao物wu會hui直zhi接jie進jin入ru血xue液ye,所suo以yi純chun度du非fei常chang重zhong要yao。在zai實shi驗yan室shi裏li,用yong於yu製zhi備bei的de液ye相xiang,配pei置zhi和he普pu通tong的de分fen析xi液ye相xiang差cha不bu多duo。有you泵beng,有you進jin樣yang器qi,有you柱zhu子zi,有you檢jian測ce器qi。為wei了le收shou集ji分fen離li出chu來lai的de化hua合he物wu,製zhi備bei液ye相xiang通tong常chang還hai配pei一yi個ge餾liu分fen收shou集ji器qi。餾liu分fen收shou集ji器qi就jiu像xiang液ye相xiang色se譜pu的de收shou納na盒he,把ba每mei次ci分fen析xi的de同tong類lei物wu質zhi收shou納na到dao一yi起qi。餾liu分fen收shou集ji器qi可ke以yi直zhi接jie串chuan聯lian在zai檢jian測ce器qi後hou麵mian。也ye可ke以yi連lian接jie一yi個ge三san通tong,和he檢jian測ce器qi並bing聯lian,都dou接jie在zai色se譜pu柱zhu的de後hou麵mian。有you些xie實shi驗yan室shi裏li需xu要yao收shou集ji的de量liang很hen大da,一yi個ge餾liu分fen收shou集ji器qi裝zhuang不bu完wan,還hai可ke以yi並bing聯lian好hao幾ji個ge。根gen據ju檢jian測ce器qi的de信xin號hao顯xian示shi,當dang化hua合he物wu出chu峰feng的de時shi候hou,儀yi器qi會hui自zi動dong收shou集ji。一yi般ban按an照zhao時shi間jian編bian程cheng,也ye可ke以yi根gen據ju檢jian測ce器qi的de信xin號hao強qiang度du自zi動dong觸chu發fa。一yi個ge個ge化hua合he物wu通tong過guo餾liu分fen收shou集ji器qi收shou集ji到dao小xiao瓶ping或huo者zhe試shi管guan裏li,也ye可ke以yi通tong過guo管guan路lu連lian接jie到dao更geng大da的de瓶ping子zi。
製zhi備bei液ye相xiang有you很hen多duo種zhong分fen類lei方fang法fa,比bi如ru按an壓ya力li分fen類lei,或huo者zhe按an產chan量liang分fen類lei,彼bi此ci之zhi間jian有you交jiao叉cha,沒mei有you明ming確que的de標biao準zhun。不bu同tong類lei型xing的de製zhi備bei液ye相xiang有you著zhe不bu同tong的de特te點dian。比bi如ru這zhe根gen用yong在zai生sheng產chan上shang的de製zhi備bei液ye相xiang柱zhu,模mo樣yang和he實shi驗yan室shi裏li有you些xie不bu同tong。僅jin僅jin內nei徑jing就jiu有you1.6m,色譜柱的重量有36噸(dun)重(zhong),每(mei)天(tian)消(xiao)耗(hao)的(de)流(liu)動(dong)相(xiang)能(neng)放(fang)滿(man)半(ban)個(ge)小(xiao)遊(you)泳(yong)池(chi)。除(chu)了(le)特(te)別(bie)大(da)的(de),還(hai)有(you)特(te)別(bie)小(xiao)的(de)。比(bi)如(ru)微(wei)克(ke)級(ji)製(zhi)備(bei),也(ye)常(chang)被(bei)稱(cheng)為(wei)微(wei)量(liang)製(zhi)備(bei),它(ta)的(de)有(you)趣(qu)之(zhi)處(chu)在(zai)於(yu)微(wei)量(liang)餾(liu)分(fen)收(shou)集(ji)器(qi),可(ke)以(yi)直(zhi)接(jie)使(shi)用(yong)MALDI點樣板。
製備色譜柱的材質及其特點
gezhongguigedebolizhuzizaishiyanshilitouhenrongyidedao,erqiejiagedilian,danbolizhuzizhimingderuodianshitanengchengshoudeyalihenxiao,qiefeichangrongyiposui。dangyouyuyalitaixiaoerdaozhiliudongxiangliusuhenmandeshihou,gaoweiyemianhuojiagaoyakongqi(或者氮氣)的采用是一個簡單的解決辦法。在底下加真空,也能在一定程度上解決這個問題。
不鏽鋼柱子具有良好的耐腐蝕、抗壓力性能,但其價格相對很貴。如果,隻有很小的分離任務且經費也允許,市麵上直徑為1cm的(de)小(xiao)型(xing)製(zhi)備(bei)柱(zhu)就(jiu)是(shi)首(shou)選(xuan)。有(you)機(ji)玻(bo)璃(li)柱(zhu)子(zi)也(ye)能(neng)抗(kang)壓(ya)力(li)耐(nai)腐(fu)蝕(shi),相(xiang)對(dui)不(bu)鏽(xiu)鋼(gang)柱(zhu)子(zi)而(er)言(yan),它(ta)是(shi)半(ban)透(tou)明(ming)的(de),可(ke)以(yi)看(kan)到(dao)液(ye)體(ti)的(de)運(yun)行(xing)狀(zhuang)態(tai),對(dui)有(you)色(se)的(de)物(wu)質(zhi)其(qi)特(te)點(dian)就(jiu)更(geng)為(wei)突(tu)出(chu)。
裝柱方法的選擇
genjugudingxiangkeliduhezhuzidechicun,caiyongbutongdezhuangzhufangfa,wangwangzhuangtianyuehaofenlixiaoguoyuehao。zhuangzhuxiaoguogentianliaodekeliduguanxihenda,kelidudejianshaohuidaozhizhuangzhudenandu。yibanlaishuo,kelizhijingxiaoyu20-30um的固定相采用濕法裝填。所謂“敲擊-裝填”技術適用於顆粒直徑大於25um的固定相。濕法的目的是迫使相對稀鬆的 固定相懸漿以高速裝入色譜柱子,從而減少空隙的形成。然而,當柱直徑大於20mm,所加壓力為30-40bar時shi,高gao壓ya懸xuan漿jiang裝zhuang填tian技ji術shu就jiu變bian得de十shi分fen複fu雜za。為wei將jiang小xiao顆ke粒li固gu定ding相xiang裝zhuang入ru更geng大da得de製zhi備bei型xing色se譜pu柱zhu,可ke采cai用yong柱zhu長chang壓ya縮suo技ji術shu。這zhe種zhong方fang法fa,先xian將jiang固gu定ding相xiang懸xuan漿jiang(或偶爾是幹填充物)裝入柱中加壓,利用物理方法將其壓緊。壓緊的方法有兩種:徑向壓縮和軸向壓縮。濕法裝柱需要一定的設備,在柱子填完後,應用有柱效的測量,對柱效低的柱子應該重填。
流動相的選擇
chulehefenxiseputongyangdekaolvwai,zaixuanyongliudongxiangshi,yaokaolvsepufenlihoumianjiayouxuanzhuanzhengfadengercifenlicaozuo。yibanlaishuo,buyicaiyonggaoduxingrongji,duiduoyuanrongjiyaojinkenengdeshaoyong。ruguochanpinzhonghanyoudaliangrongji,rongjidechunduyeyaokaolvzaiqizhong。
組分保留時間的估計
用分析柱子在同等色譜條件下(同樣的固定相和流動相)測定保留時間後,按照單一組分的線流速(不是體積流速)一定,通過計算可以知道組分的大致保留時間區域。分析譜圖的峰形狀,對確定保留時間也有很大的參考價值。
產品的收集
手工餾分收集費時費力,自動餾分收集器有很大的方便。許多實驗室和工廠都采用了餾分收集器。
超載、邊緣切割、中心切割、放大技術與非線性效用
在(zai)製(zhi)備(bei)色(se)譜(pu)中(zhong),因(yin)為(wei)沒(mei)有(you)必(bi)要(yao)達(da)到(dao)分(fen)析(xi)色(se)譜(pu)那(na)樣(yang)的(de)分(fen)離(li)度(du),可(ke)以(yi)在(zai)一(yi)定(ding)範(fan)圍(wei)內(nei)大(da)大(da)加(jia)大(da)進(jin)樣(yang)的(de)濃(nong)度(du)和(he)體(ti)積(ji)。在(zai)做(zuo)分(fen)離(li)的(de)時(shi)候(hou),也(ye)有(you)一(yi)些(xie)分(fen)析(xi)色(se)譜(pu)的(de)時(shi)候(hou),不(bu)能(neng)用(yong)到(dao)的(de)技(ji)巧(qiao)。因(yin)為(wei)篇(pian)幅(fu)關(guan)係(xi),不(bu)在(zai)這(zhe)裏(li)敘(xu)述(shu)。
柱轉換技術
通過接頭或者閥門,實現柱子的簡單延長,或者比較方便地實現對其中一個(或幾個)組分的精製。
新製備技術
模(mo)擬(ni)移(yi)動(dong)床(chuang)可(ke)以(yi)連(lian)續(xu)進(jin)樣(yang),並(bing)可(ke)以(yi)利(li)用(yong)邊(bian)緣(yuan)切(qie)割(ge)效(xiao)用(yong),而(er)且(qie)采(cai)用(yong)了(le)柱(zhu)切(qie)換(huan)技(ji)術(shu),能(neng)更(geng)好(hao)的(de)利(li)用(yong)溶(rong)劑(ji)和(he)填(tian)料(liao),已(yi)經(jing)應(ying)用(yong)於(yu)工(gong)業(ye)化(hua)生(sheng)產(chan)。其(qi)理(li)論(lun)和(he)技(ji)術(shu)也(ye)日(ri)益(yi)完(wan)善(shan)。迎(ying)頭(tou)色(se)譜(pu)、超臨界流體色譜、逆流色譜環形色譜、氣相製備色譜等在科研和工業生產中也得到了應用。
文章(文字)來源:色譜學堂等網絡
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